苦瓜抗氧化活性物質(zhì)的初步鑒定

劉葦芬

（重慶市食品藥品監(jiān)督管理局渝北區(qū)分局，重慶 401120）

苦瓜抗氧化活性物質(zhì)的初步鑒定

劉葦芬

（重慶市食品藥品監(jiān)督管理局渝北區(qū)分局，重慶 401120）

對苦瓜抗氧化活性物質(zhì)（AA樣品）進(jìn)行初步鑒定，通過試管預(yù)測試驗，并進(jìn)行紫外掃描，結(jié)果表明AA樣品是酚類和黃酮類物質(zhì)，含有酚羥基，再經(jīng)過紅外光譜檢測分析顯示，AA樣品可能含有、芳醚鍵、締合的氫鍵、-CH2-、伯醇和羰基。

苦瓜；抗氧化活性；紫外掃描；紅外光譜

苦瓜（Momordica charantia L.）是葫蘆科（Cucurbitaceae）苦瓜屬植物，性苦、寒，主要生長在亞洲、亞馬遜河、東非和加勒比海一帶，在全世界的許多地方例如巴西、中國、印度等苦瓜的種植既被當(dāng)作食用又被當(dāng)作藥用，通常具有治療糖尿病，抗病毒，抗腫瘤，抗艾滋病，抗白血病，抗菌，抗氧化，抗生育，抗蠕蟲，抗?jié)裾睿節(jié)儯笛牵瑝櫶ィń?jīng)，抗瘧，牛皮癬[1-2]等功效。這些功能都預(yù)示著苦瓜具有某種抗氧化作用。因此近年來，尤其是苦瓜的抗氧化的作用日益受到各國學(xué)者的關(guān)注。根據(jù)文獻(xiàn)及相關(guān)的研究發(fā)現(xiàn)，對苦瓜抗氧化活性物質(zhì)的成分確定是有意義的。

1 材料和方法

1.1 材料和試劑

1.1.1 原料

AA樣品[3-4]：用40%乙醇浸提苦瓜后的浸提樣，通過洗脫大孔樹脂H103和凝膠樹脂SephadexLH-20得到的洗脫樣，再經(jīng)凍干燥后制得。

1.1.2 主要試劑

氫氧化鈉，硝酸鋁，亞硝酸鈉，飽和溴水，F(xiàn)eCl3，高錳酸鉀，硼氫化鈉，NaOH、H2SO4，AlCl3，鋅粉，鹽酸，濃硫酸，均為分析純。

1.1.3 儀器及設(shè)備

LABCONCO FreeZone 2.5L型真空冷凍干燥系統(tǒng)：美國；UV-1601PC紫外分光光度計：日本島津公司；RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器：上海比朗儀器有限公司；SHB-ⅢA循環(huán)水式多用真空泵：北京宏昌信科技有限公司；GSY-Ⅱ型恒溫水浴箱：北京醫(yī)療設(shè)備廠；Thermo nicolet 470型紅外檢測設(shè)備：美國Thermo Nicolet廠。

1.2 方法

1.2.1 AA樣的試管預(yù)測試驗

1.鹽酸-鋅粉反應(yīng)：將AA樣品溶于1 mL乙醇中，加適量的鋅粉，然后滴加濃鹽酸。檢驗AA樣品中是否含有黃酮類化合物。

2.硼氫化鈉還原：在試管中加入0.1 mL含有樣品的乙醇液，再加等量2%NaBH4的甲醇液，1 min后，加濃鹽酸或濃硫酸數(shù)滴，是否生成紫至紫紅色。檢驗AA樣品中是否含有二氫黃酮類化合物。

3.中性醋酸鉛沉淀反應(yīng)：取AA樣品1 mL，逐滴加入新配制的飽和中性醋酸鉛溶液，觀察現(xiàn)象。檢驗AA樣品中是否含有酚類化合物。

1.2.2 紅外光譜分析[5]

傅立葉吸收光譜法，即KBr壓片法，先在瑪瑙缽中粉碎光譜級的溴化鉀，并研磨至細(xì)，在真空箱中干燥待用。試驗時將干樣品和溴化鉀混合在一起，并在瑪瑙缽中進(jìn)行混磨直至兩者混合均勻，壓模，制成直徑13mm、厚0.8mm的薄片，然后在400cm-1～4000cm-1范圍用紅外光譜儀進(jìn)行掃描檢測，確定AA樣品的紅外吸收光譜特征吸收峰。

2 結(jié)果與討論

2.1 AA樣的試管預(yù)測試驗

對AA樣品進(jìn)行試管預(yù)測試驗，并進(jìn)行紫外掃描，結(jié)果見表1和圖1。

表1 樣品AA的試管預(yù)測實驗Table 1 Sample AA identify with the means of pretest tube

鹽酸-鋅粉反應(yīng)是鑒別黃酮類化合物的最常用的反應(yīng)，從表1結(jié)果顯示，AA樣品經(jīng)鹽酸-鋅粉反應(yīng)為紅色，經(jīng)NaOH反應(yīng)其呈深黃色，與硼氫化鈉反應(yīng)無現(xiàn)象，并與濃硫酸反應(yīng)呈淡黃色，表明AA樣品含有黃酮類物質(zhì)的性質(zhì)。金屬試劑的絡(luò)合反應(yīng)中AlCl3顯色反應(yīng)常用，它在AA樣品液中呈黃色，顯示黃酮類化合物的性質(zhì)。

FeCl3溶液、FeCl3－KFe（CN）6溶液及 KMnO4溶液是酚類物質(zhì)的特征顯色反應(yīng)。AA樣品在FeCl3溶液中呈藍(lán)綠色，在 FeCl3－KFe（CN）6溶液中呈藍(lán)色，還能使KMnO4溶液褪色，并且在AA樣品中滴加飽和中性醋酸鉛溶液后，產(chǎn)生藍(lán)紫色沉淀，并隨飽和中性醋酸鉛加入量的增多，沉淀增多，這些都表明AA樣品成分中含有酚類物。其紫外掃描圖見圖1，可見AA樣品在紫外區(qū)域的215 nm有明顯的吸收峰，并結(jié)合上述的顯色特征，可以看出，AA樣品呈現(xiàn)酚類物質(zhì)的特征反應(yīng)[6-7]，表明AA樣品中含有酚類物質(zhì)。

圖1 AA樣品的紫外掃描圖Fig.1 The UV spectrum of sample AA

因此AA樣品是酚類和黃酮類物質(zhì)，含有酚羥基。

2.2 AA樣的紅外光譜分析

AA樣品經(jīng)紅外光譜檢測結(jié)果見圖2。

圖2 AA樣品的紅外圖譜Fig.2 The infrared absorption spectrogram figure of sample AA

表2 AA樣品的紅外解析Table 2 The IR analysis of sample AA

由圖2可明顯見10個吸收峰，其值可見表2，根據(jù)紅外解析（表2），可得出結(jié)論是，AA樣品中可能含、芳醚鍵、締合的氫鍵、-CH2-、伯醇和羰基結(jié)構(gòu)。

3 結(jié)論

對AA樣品進(jìn)行試管預(yù)測試驗，并進(jìn)行紫外掃描，根據(jù)結(jié)果分析，表明AA樣品主要是由酚類和黃酮類物質(zhì)構(gòu)成，并且含有酚羥基。再經(jīng)過紅外光譜檢測分析對照顯示，AA樣品可能含有、芳醚鍵、締合的氫鍵、-CH2-、伯醇和羰基結(jié)構(gòu)。

[1]Yesilada E,Gurbuz I,Shibata H.Screening of Turkish anti-ulcerogenic folk remedies for anti-Helicobacter pylori activity,Journal of Ethnopharmacology,1999,66,289-293

[2]Basch E,Gabardi S,Ulbricht C.Bittermelon(Momordica charantia):a review of efficacy and safety[J].American Journal of Ethnopharmacology,2003,31,115-118

[3]劉葦芬,文良娟.大孔樹脂對苦瓜多酚吸附分離研究[J].食品研究與開發(fā),2006(5):95-97

[4]劉葦芬,文良娟.苦瓜抗氧化活性成分的研究[J].現(xiàn)代食品科技,2006(2):60-62

[5]于世林.波譜分析法[M].重慶:重慶大學(xué)出版社,1994:35-84

[6]全國衛(wèi)生學(xué)校統(tǒng)編教材《中草藥化學(xué)》編寫組.《中草藥化學(xué)》[M].江蘇:江蘇科技出版社,1984:189

[7]南京大學(xué)化學(xué)系有機(jī)化學(xué)教研室.《有機(jī)化學(xué)》(上冊)[M].北京:人民教育出版社,1978:21-78

Antioxidant Activity of Bitter Gourd Identification of Substances

LIU Wei-fen

（School of Management，Chongqing Nanfang Translators College of Sichuan International Studies University，Chongqing 401120，China）

Antioxidant activity of bitter gourd (AA sample)were identified,predicted by in vitro tests,and the UV scan,the results show that the AA sample is phenolic and flavonoid substances containing hydroxyl groups that,through the infrared spectroscopy analysis showed that,the sample AA possibly had the benzyl,the fragrant ether linkage,the association hydrogen bond,-CH2-,the primary alcohol and the carbonyl.

Momordica charantia L.；antioxidant activity；UV scanning；infrared spectrum

劉葦芬（1981—），女（漢），講師，碩士，研究方向：碳水化合物提純分離理論與技術(shù)。

2011-12-27