藏藥翁布的酚性成分研究

曾 陽，喇曉琴，許 敏，張穎君

1青海師范大學(xué)生命與地理科學(xué)學(xué)院;2青藏高原環(huán)境與資源教育部重點實驗室，西寧810008; 3中科院昆明植物研究所植物化學(xué)與西部植物資源持續(xù)利用國家重點實驗室，昆明650204

藏藥翁布(Myricaria germanicaauct.non Linn.Desv)是檉柳科(Tamaricaceae)水柏枝屬(Myricaria)植物，生長于海拔2000～2900 m。灌木，莖直立，具多數(shù)分枝，枝紅棕色，葉線形，總狀花序，花期6～7月，蒴果。藥用部位為嫩枝，青綠色，其性平，味澀，微苦，治黃水病、內(nèi)腔毒熱、發(fā)散透疹，用于瘟疫、血熱、中毒熱證，麻疹不透及咽喉腫痛等癥［1］。藏藥翁布具有抑菌、抑制炎癥、抗疲勞和抗氧化等作用，但對其酚性化學(xué)成分的研究未見報道。為闡明其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，我們對采自青海民和古鄯的藏藥翁布的化學(xué)成分進行深入研究，已從其丙酮提取物的水層和乙酸乙酯部位分離得到的11個黃酮類化學(xué)成分［2］，本研究報道了從中分離鑒定的11個酚性化合物，所有成分均首次從藏藥翁布中分離得到，其中化合物1～6和8～11首次從水柏枝屬植物中分離得到。

1 儀器與材料

Bruker AM 400和500 MHz核磁共振儀;Auto Spec-3000型質(zhì)譜儀;Bruker Tensor 27型紅外光譜儀(KBr壓片);Shimadzu UV-2401 PC紫外光譜儀; JASCOP-1020型高分辨旋光光譜儀;硅膠H板(薄層用)，柱色譜用硅膠(200～300目)為青島海洋化工廠出品;顯色劑為5%的硫酸乙醇溶液和5%茴香醛溶液;其他試劑為工業(yè)試劑重蒸。藏藥翁布的嫩枝采自青海民和古鄯，由青海師范大學(xué)生命與地理科學(xué)學(xué)院馬繼雄副教授鑒定為Myricaria germanica。

2 提取分離

藏藥翁布干燥嫩枝(12 kg)以60%丙酮室溫浸提3次，每次7 d，合并提取液，并減壓濃縮去除有機溶劑后，用乙酸乙酯萃取5次，合并萃取液，得乙酸乙酯萃取物147.0 g。水層部分(1.5 kg)經(jīng)Diaion HP20SS柱層析，以水-甲醇(1∶0～0∶1)進行梯度洗脫得到6個部分(Fr.1-6)。Fr.2(20.8 g)經(jīng)重結(jié)晶，MCI-gel CHP20P(水-甲醇，1∶0-0∶1)，Sephadex LH-20(水-甲醇，1∶0～0∶1)以及硅膠(氯仿-甲醇，9∶1-5∶5)得到化合物1(30 mg)，2(86 mg)，3(10 mg)，4(16 mg)。乙酸乙酯部分(147 g)經(jīng)Sephadex LH-20柱層析，以水-甲醇(1∶0～0∶1)進行梯度洗脫得到7個部分(Fr.E1-E7)。Fr.E3(2.9g)經(jīng)MCI-gel CHP 20P(水-甲醇，1∶0～0∶1)和Sephadex LH-20 (水-甲醇，10∶0～4∶6)反復(fù)柱層析，得到化合物5 (90 mg)，8(5 mg)。Fr.E6(2.5 g)經(jīng)硅膠(氯仿-甲醇，10∶0～9∶1)，Sephadex LH-20(水-甲醇，10∶0～2∶8)和MCI-gel CHP20P(水-甲醇，5∶5-0∶10)柱層析，得到化合物6(400 mg)。Fr.E4(9.0g)經(jīng)MCI-gel CHP20P(水-甲醇，1∶0～0∶1)，Sephadex LH-20(水-甲醇，10∶0～9∶1)和硅膠(氯仿-甲醇，10∶0～7∶3)反復(fù)柱層析，得到化合物9(6 mg)，10(50 mg)和11 (30 mg)。Fr.E5(9.0 g)經(jīng)MCI-gel CHP20P(水-甲醇，1∶0～0∶1)和重結(jié)晶得到化合物7(3.5g)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 白色粉末，1H NMR(CD3OD，500 MHz)δ:3.75(3H，s)，6.34(1H，d，J=16.0 Hz，H-8)，7.58(1H，d，J=16.0 Hz，H-7)，6.84(1H，d，J= 8.3 Hz，H-5)，6.91(1H，d，J=8.3 Hz，H-6)，7.29 (1H，d，J=2.0 Hz，H-2);13C NMR(CD3OD，100 MHz)δ:127.4(C-1)，110.2(C-2)，149.3(C-3)，148.0(C-4)，114.2(C-5)，115.1(C-6)，145.2(C-7)，122.3(C-8)，169.2(C-9)，55.1(OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻［2］中阿魏酸(ferulic acid)的數(shù)據(jù)一致。

化合物2 白色粉末，1H NMR(CD3OD，500 MHz)δ:3.83(3H，s)，4.21(2H，d，J=5.1 Hz，H-9)，6.28(1H，d，J=16.0 Hz，H-8)，6.56(1H，d，J=16.0 Hz，H-7)，6.94(1H，d，J=8.2 Hz，H-5)，7.39(1H，d，J=8.2 Hz，H-6)，7.06(1H，d，J=0.8 Hz，H-2);13C NMR(CD3OD，100 MHz)δ:130.4(C-1)，110.2(C-2)，149.1(C-3)，148.0(C-4)，115.2(C-5)，121.1 (C-6)，132.2(C-7)，127.3(C-8)，64.2(C-9)，56.1 (OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻［3］中松柏醇(coniferol)的數(shù)據(jù)一致。

化合物3 白色粉末，1H NMR(CD3OD，500 MHz)δ:3.34(3H，s)，7.00(1H，d，J=1.8 Hz，H-3)，6.82(1H，d，J=8.1 Hz，H-5)，6.75(1H，d，J= 8.1Hz，H-6)，7.98(1H，d，J=16.0 Hz，H-7)，5.70 (1H，d，J=16.0 Hz，H-8)，4.52(6.2 Hz，glc-H1)，3.83～3.85(4H，m，glc-H2，3，4，5);13C NMR(CD3OD，100 MHz)δ:149.4(C-1)，148.2(C-2)，111.3(C-3)，128.0(C-4)，122.2(C-5)，115.1(C-6)，144.2(C-7)，117.3(C-8)，168.2(C-9)，99.5(C-1')，73.0(C-2')，77.4(C-3')，69.5(C-4')，76.8(C-5')，60.4(C-6')，55.1(OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻［4］中阿魏酸葡糖苷(feruloyl glucose)的數(shù)據(jù)一致。

化合物4 白色粉末，1H NMR(acetone-d6，400 MHz)δ:3.79(3H，s)，3.78(3H，s)，6.65(1H，d，J= 1.9 Hz，H-2)，6.67(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.60 (1H，d，J=8.0 Hz，H-6)，4.09(1H，d，J=10.3 Hz，H-7)，1.93(1H，m，H-8)，3.86(1H，m，H-9)，3.76 (1H，m，H-9)，6.71(1H，s，H-2')，6.18(1H，s，H-5')，2.82(1H，m，H-7')，2.79(1H，m，H-7')，1.91 (1H，m，H-8')，3.33(1H，m，H-9')，3.30(1H，m，H-9');13C NMR(CD3OD，100 MHz)δ:128.3(C-1)，112.3(C-2)，148.8(C-3)，145.2(C-4)，117.3(C-5)，123.0(C-6)，47.8(C-7)，45.1(C-8)，67.7(C-9)，129.1(C-1')，114.2(C-2')，145.9(C-3')，145.2 (C-4')，116.1(C-5')，133.7(C-6')，33.5(C-7')，39.1(C-8')，67.7(C-9')，56.3(OCH3)，56.4 (OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻［5］中異落葉松脂醇(isolariciresinol)的數(shù)據(jù)一致。

化合物5 白色粉末，1H NMR(CD3OD，400 MHz)δ:6.24(1H，d，J=16.0 Hz，H-8)，7.55(1H，d，J=16.0 Hz，H-7)，6.94(1H，d，J=8.3 Hz，H-6)，6.92(1H，d，J=8.3 Hz，H-5)，7.03(1H，d，J= 2.0 Hz，H-2);13C NMR(CD3OD，100MHz)δ:127.4 (C-1)，116.0(C-2)，146.3(C-3)，148.6(C-4)，115.2(C-5)，122.1(C-6)，145.2(C-7)，114.3(C-8)，168.2(C-9)。以上數(shù)據(jù)與文獻［6］中咖啡酸(caffeic acid)的數(shù)據(jù)一致。

化合物6 白色粉末，1H NMR(CD3OD，400 MHz)δ:6.28(2H，d，J=16.0 Hz，H-8)，7.61(1H，d，J=16.0 Hz，H-7)，7.45(2H，d，J=8.0 Hz，H-2，H-6)，6.80(2H，d，J=8.0 Hz，H-3，H-5)。以上數(shù)據(jù)與文獻［7］中對羥基桂皮酸(p-hydroxycinnamic acid)的數(shù)據(jù)一致。

化合物7 白色粉末，經(jīng)與標準品作TLC對比，其Rf值一致，將其結(jié)構(gòu)鑒定為沒食子酸(gallic acid)。

化合物8 白色粉末，1H NMR(CD3OD，500 MHz)δ:7.04(2H，s，H-2，H-6)，3.81(3H，s);13C NMR(CD3OD，100 MHz)δ:120.4(C-1)，109.2(C-2，6)，146.3(C-3，5)，139.1(C-4)，167.2(C-7)，52.3(OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻［8］中3，5-二羥基-4-甲氧基苯甲酸 (3，5-dihydroxy-4-methoxybenzoic acid)的數(shù)據(jù)一致。

化合物9 白色粉末，1H NMR(CD3OD，400 MHz)δ:1.17(3H，d，J=6.0 Hz，CH3)，1.70(2H，m，H-3)，2.62(2H，m，H-4)，6.72(2H，d，J=8.0 Hz，H-3'，H-5')，7.02(2H，d，J=8.0 Hz，H-2'，H-6');13C NMR(CD3OD，100 MHz)δ:23.5(C-1)，67.9(C-2)，42.4(C-3)，32.2(C-4)，134.4(C-1')，130.2(C-2'，C-6')，116.0(C-3'，C-5')，156.3(C-4')。以上數(shù)據(jù)與文獻［9］中杜鵑醇(rhododendrol)的數(shù)據(jù)一致。

化合物10 白色粉末，1H NMR(CD3OD，400 MHz)δ:7.56(1H，s，H-2)，7.54(1H，d，J=8.6 Hz，H-6)，6.84(1H，d J=8.0 Hz，H-5)，3.88(3H，s);13C NMR(CD3OD，100 MHz)δ:125.2(C-1)，115.8 (C-2)，148.6(C-3)，152.6(C-4)，113.7(C-5)，123.0(C-6)，170.0(C-7)，56.3(OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻［10］中3-甲氧基-4-羥基苯甲酸(3-methoxy-4-hydroxybenzoic acid)的數(shù)據(jù)一致。

化合物11 白色粉末，1H NMR(CD3OD，400 MHz)δ:6.16(1H，d，J=15.0 Hz，H-7)，6.75(2H，s，H-2，H-6)，7.76(1H，d，J=15.0 Hz，H-8);13C NMR(CD3OD，100 MHz)δ:125.2(C-1)，103.6(C-2，C-6)，146.1(C-3，C-5)，136.6(C-4)，146.4(C-7)，115.8(C-8)，167.2(C-9)。以上數(shù)據(jù)與文獻［11］中3，4，5-三羥基肉桂酸(3，4，5-trihydroxycinnamic acid)的數(shù)據(jù)一致。

圖1 化合物1～11的化學(xué)結(jié)構(gòu)Fig.1 Structures ofcompounds 1-11

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