乙肝攜帶產婦血清、乳汁及新生兒血清中HBV DNA載量的關系探討

夏 偉 陳 芳

1.重慶市大渡口區人民醫院檢驗科，重慶 400084；2.四川省自貢市第三人民醫院檢驗科，四川自貢 643000

中國屬于乙型肝炎病毒（HBV）感染高流行區，一般人群的HBsAg陽性率高達9.09%。接種與未接種乙型肝炎疫苗人群的HBsAg陽性率分別達4.51%和9.51%[1]。文獻報道[2]，產婦HBV感染度高達23.51%。如何阻斷HBV的母嬰傳播是臨床傳染病學研究的焦點之一。目前對于乙肝攜帶者產后母乳喂養會否傳染HBV仍存在爭議[3]。血清HBV DNA是判斷乙肝傳染性和病毒復制最直接可靠的指標[4-6]。筆者采用熒光定量PCR技術檢測乙型肝炎病毒攜帶產婦血清、乳汁和新生兒血清中HBV DNA含量，以探討產婦血清不同HBV DNA水平與乳汁和新生兒血清HBV DNA載量之間的關系，為臨床采取合適的孕期處理措施和產后母乳喂養提供實驗依據。

1 材料與方法

1.1 標本采集與處理

收集2009年12月～2011年12月我院婦產科分娩的乙型病毒性肝炎病毒感染產婦293例，年齡19～43歲，平均27歲。血清標本采集：產婦空腹靜脈采血2 mL、新生兒出生后24 h內（未實施被動和主動免疫）于股靜脈采血2 mL，均在2 h內分離血清備用。乳汁標本采集：清洗乳房后，擠乳汁1.5～2.5 mL于消毒試管內立即送檢。乳汁標本處理參考文獻[7]，先將標本3 000 r/min離心10 min（離心半徑20 cm），棄上層脂肪層，取中層乳清進行檢測。分離后的血清和乳汁標本儲存于-70℃冰箱保存，同時完成檢測。

1.2 試劑、方法與儀器

HBV DNA熒光定量檢測試劑盒（中山大學達安基因股份有限公司），嚴格按照試劑盒說明書進行操作，檢測過程實施全面質量控制。以病毒載量≥1.0×103copies/mL判為陽性。實時熒光定量PCR擴增儀FTC-2000型（上海楓嶺生物技術有限公司）。

1.3 分組方法

根據實驗結果，將產婦血清HBV DNA載量劃分為血清陰性組（HBV DNA＜103copies/mL）、血清低拷貝組（103copies/mL≤HBV DNA≤106copies/mL）和血清高拷貝組（HBV DNA＞106copies/mL）。

1.4 統計學方法

采用SPSS11.0統計軟件，計數資料采用百分率表示，組間對比采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HBV感染產婦血清HBV DNA載量

293例HBV感染產婦中，HBV DNA陰性組、低拷貝組和高拷貝組分別占50.2%、21.8%和28.0%。見表1。

表1 293例產婦血清中HBV DNA檢測結果

2.2 HBV感染產婦血清HBV DNA不同載量組與乳汁及新生兒血清中HBV DNA載量的關系

血清HBV DNA陰性組產婦乳汁中HBV DNA檢出率為0。而血清低拷貝組和高拷貝組產婦乳汁HBV DNA的陽性檢出率分別為12.5%（8/64）和76.8%（63/82），前者明顯低于后者（P＜0.01）。而血清HBV DNA陰性組、低拷貝組和高拷貝組之間新生兒血清HBV DNA陽性率分別為2.0%（3/147）、3.1%（2/64）和3.7%（3/82），三者之間差異無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 HBV感染產婦乳汁及新生兒血清中HBV DNA檢測結果[n（%）]

3 討論

乙型肝炎病毒（HBV）屬嗜肝DNA病毒科（hepadnaviridae），為部分雙鏈環狀DNA。HBV DNA是乙肝病毒的遺傳物質基礎，是反映HBV復制及傳染性的直接標志。從本研究結果看，有50.2%乙肝攜帶產婦血清HBV DNA陰性，49.8%為陽性，其中低拷貝組和高拷貝組HBV DNA陽性率分別為21.8%和28.0%。在147例血清HBV DNA陰性組中，產婦乳汁中HBV DNA全部陰性。在血清HBV DNA的陽性的產婦中，低拷貝組產婦乳汁HBV DNA的陽性率僅為12.5%，而高拷貝組產婦乳汁HBV DNA的陽性率高達76.8%，陽性率顯著高于低拷貝組。說明產婦血清HBV DNA分泌到乳汁中可能存在一個濃度臨界值（閾值），106copies/mL很可能就是產婦血清HBV DNA分泌到乳汁的閾值濃度。血清HBV DNA達到或超過臨界值濃度時，乳汁中HBV DNA陽性率大幅顯著增加，而小于這個界值濃度時乳汁HBV DNA陽性率低。這與文獻[8]研究結果基本一致。低拷貝組乳汁HBV DNA陽性率仍比血清HBV DNA陰性組產婦高，兩者差異有統計意義。

因此，對于母乳喂養問題建議如下，乳汁HBV DNA陽性的產婦，不宜哺乳喂養，而應采取人工喂養。當產婦血清和乳汁HBV DNA均陰性時可以放心實行母乳喂養，當產婦血清HBV DNA陽性濃度在103～106copies/mL時，應檢測乳汁HBV DNA濃度確定可否母乳喂養（乳汁HBV DNA陰性可進行，陽性則不可進行母乳喂養）；當產婦血清HBV DNA濃度達到或超過閾值濃度106copies/mL時，HBV DNA容易大量進入乳汁，則不宜進行母乳喂養，而建議進行人工喂養。

本研究結果表明，新生兒血清HBV DNA陽性率為2.0%～4.9%，在血清陰性組、低拷貝組和高拷貝組產婦中無差異（P＞0.05）。這說明產婦血清中HBV DNA陽性率與胎兒宮內感染率無顯著相關性，與文獻報道相符[9]。HBsAg陽性產婦中49.8%（146/293）具傳染性，而宮內感染率才3.1%～4.9%。其原因很可能是HBV母嬰垂直傳播受到胎盤屏障的阻隔。換言之，胎盤屏障受損是胎兒宮內感染的一個重要因素。這一點啟示我們臨床醫師針對HBV感染的孕婦在孕期要盡量減少藥物或其他因素對胎盤屏障損傷，以減少胎兒宮內感染率。

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