無患子皂苷的提取、類型及藥理活性

李 芳，霍光華 ，葉亞建，陳明輝

江西農業大學生物與工程學院，南昌330045

無患子(Sapindus mukorossi Gaertn.)也叫肥皂樹或洗手果，為無患子科無患子屬的一種落葉喬木，東南亞各國、我國的臺灣省及淮河以南各省均有分布［1］。無患子的干燥成熟果皮，始記載于《本草綱目》，具有清熱祛痰，消積殺蟲等作用，用于喉痹腫痛、咳喘、食滯、白帶、疳積、瘡癬、腫毒［2］。無患子皂苷還是一種天然溫和型非離子表面活性物質，具有較好的起泡、去污性能，易降解，且無有害殘留，對皮膚刺激性小，是洗發香波、化妝品以及各種生物洗滌劑的優良原料［3］。近年國內外研究表明，無患子所含皂苷成分具有抗炎癥作用［4］、抗細菌和真菌［5］、抗腫瘤［6］、滅螺活性［7］、殺蟲活性［8］、保肝［9］、抗精子［10］及促進抗生素吸收和提高藥效等活性。本文對無患子皂苷近年來的提取方法、化學成分及藥理作用這三方面的研究進展作一綜述，為開發利用有藥用價值的天然產物提供科學依據。

1 無患子皂苷的提取和初步純化

無患子皂苷的提取方法主要包括水提法或有機溶劑提取法。魏鳳玉等人［11，12］采用水提-大孔樹脂吸附分離工藝和水提-超濾法從天然無患子果皮中提取分離無患子皂苷，前者正交實驗結果表明，當水與原料的質量比為5∶1，在55 ℃下提取3 次時，無患子皂苷的產率達到11.36%，產品純度達85.0%以上，后者實驗結果表明在水提液中加入體積分數為2. 0% 的殼聚糖-醋酸絮凝劑時，預處理效果較好，正交實驗表明，采用截留分子量為20 K～50 K的超濾膜，在溫度25 ℃、膜面流速2.78 ×10-5m/s、壓力0.08 MPa 的條件下，所得無患子總皂苷的純度可達67.02%;而采用6 K 超濾膜所得無患子皂苷的產品純度可達72.42%。朱亞紅等人［13］對無患子皂苷的甲醇提取法、無水乙醇提取法、無患子果皮剪碎甲醇提取法及水提取法進行了比較，結果表明出用甲醇浸泡4 d，組織搗碎機搗碎，甲醇浸泡液循環使用2 次，皂苷粗提物提取率為59.85%，優于水浸泡(51. 6%)和無患子果皮剪碎后甲醇浸泡(48.1%)。黃素梅等人［14］通過單因素試驗和正交試驗研究各種提取條件對無患子皂苷得率的影響，得出乙醇提取法的最佳提取工藝為:提取溶劑為乙醇，提取溫度為60 ℃時，料液比為1∶9，提取時間為3 h，提取為3 次，在該條件下，無患子皂苷得率為9.32%。饒厚曾等人［15］用索氏提取法比較了50%乙醇、95%乙醇、正丁醇等對水預處理后的無患子的提取效果，結果表明用乙醇提取時，提取率在72%～74%，而正丁醇的提取率僅為34. 77%。Huang 等人［16］用乙醇提取法獲得無患子皂苷的乙醇粗提物，然后用己烷、正丁醇和氯仿對其進行萃取，過柱達到分離純化的目的。Supradip 等人［8］用己烷對無患子果皮進行脫脂處理后，用甲醇進行浸提，再用正丁醇進行萃取，最后用丙酮沉淀獲得無患子皂苷粗體物。魏鳳玉等人［17］采用酶法提取無患子皂苷，研究了酶的類型對無患子皂苷提取的影響，并通過正交實驗優化酶法提取工藝，結果表明，纖維素酶有助于無患子皂苷的提取，酶提法的較優工藝條件為:纖維素酶用量為無患子粉末質量的0.1%，酶提時間2.5 h，酶提溫度50 ℃，pH 值4.7，此時無患子皂苷的提取率達到86.59%，比未加酶處理時提高了19.63%。饒厚曾等人［18］還采用微波萃取法從無患子果皮中萃取無患子皂苷，得出微波萃取皂苷較佳的工藝條件:微波爐采用低火檔，選用正丁醇作萃取劑，體積為30 mL，萃取時間控制在30 min。解輝［19］采用超濾膜分離和泡沫分離等新型分離技術對無患子皂苷進行分離純化，在無患子水提液中加入體積分數為2.0%的殼聚糖一醋酸絮凝劑時，除雜效果較好，20～50 K 超濾膜正交實驗表明，影響超濾分離的大小順序為:膜面流速＞壓力＞溫度;超濾分離的最優條件是:溫度25 ℃，膜面流速2.78 ×10-5，壓力0.08 MPa，在此條件下，所得無患子總皂昔的純度為67.02%，與20～50K 超濾膜相比，6K 超濾膜對無患子皂昔的富集程度更高，產品純度可達72.42%，由泡沫分離的正交實驗可知，影響泡沫分離的大小順序為:氣體流速＞進料濃度＞溫度＞pH 值，氣體流速與進料濃度的交互作用并不顯著，最佳泡沫分離條件是:進料濃度2.5 g/mL，氣體流速0.9 L/min，溫度30 ℃，pH 值4.8，在此條件下，所得無患子總皂昔的收率是69.42%，純度“66. 24%，富集比為2.48。魏鳳玉等人［20］用泡沫分離法純化無患子皂苷，當原始料液濃度2.5 g/L、氣體流速0.9 L/min、溫度30 ℃、pH 值4. 8 時，無患子皂苷的收率為69.42%，富集比為2.48，純度達67.78%。雖然研究者們對無患子的分離提取做了不少工作，但總的來說都還處于初步研究階段，要實現規模化生產還存在純度低(如水提法，水提法的提取率較高，但是往往會將一些單糖、寡糖、氨基酸、蛋白質、黏液質等也被提取出來，從而導致提取物中的皂苷純度降低，或是成本高、可操作性差等缺點。因此很有必要對無患子皂苷提取工藝進行更深入的研究，以獲得低成本、高純度、操作簡便、綠色環保的提取工藝，實現或完善無患子皂苷的工業化生產。

2 無患子皂苷化學成分

無患子皂苷含有五環三萜類齊墩果烷型皂苷［21，22］(如常春藤皂苷)、五環三萜類甘遂烷型皂苷［23，24］和四環三萜類達瑪烷型皂苷［25］。查閱相關參考文獻可以發現，無患子皂苷側鏈主要有糖基和酰基組成，還有羧基、羥基、甲氧基和甲基等，其中糖類，常見的有葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李糖、木糖等。這些側鏈基團中，糖基和酰基主要連接在C-3 位置，也有一些連接在C-2、28，甲氧基主要連接在C-25、21、23，羧基主要連接在C-17、28，羥基主要連接在C-20、22、23，甲基主要在C-20。五環三萜類齊墩果皂苷主要來源于無患子果實，四環三萜類達瑪烷型皂苷主要來源于無患子蟲癭，而五環三萜類甘遂烷型皂苷主要來源于無患子根和無患子蟲癭。無患子皂苷的名稱、分布以及結構式分別見表1、2、3 和圖1、2、3。

表1 五環三萜類齊墩果烷型皂苷Table 1 Saponin of oleanane quinque cyclic triterpenoids

4 Hederagenin-3-O-(4-O-Acetyl-β-D-xylopyranosyl)-(1 →3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1 →2)-α-Larabinopyranoside 無患子果實 7 5 Hederagenin-3-O-(3，4-O-di-Acetyl-β-D-xylopyranosyl)-(1→3)-α -L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α -L-arabinopyranoside 無患子果實 7 6 Hederagenin-3-O-β-D-Xylopyranosyl-(1 →3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1 →2)-α-L-arabinopyranoside 無患子果實 7 7 Hederagenin-3-O-β -L-arabinopyranoside 無患子果實 7 8 hederagenin-3-O-(3-O-acetyl-a-L-arabinopyranosyl)-(1 →3)-a-L-rhamnopyranosyl-(1 →2)-a-Larabinopyranoside 無患子果實 16 9 hederagenin-3-O-(4-O-acetyl-a-L-arabinopyranosyl)-(1 →3)-a-L-rhamnopyranosyl-(1 →2)-a-Larabinopyranoside 無患子果實 16 10 hederagenin-3-O-(2，3-O-diacetyl-β-D-xylopyranosyl)-(1 →3)-a-L-rhamnopyranosyl-(1 →2)-a-L-arabinopyranoside 無患子果實 16 11 hederagenin-3-O-(2，4-O-diacetyl-β-D-xylopyranosyl)-(1 →3)-a-L-rhamnopyranosyl-(1 →2)-a-L-arabinopyranoside 無患子果實 16 12 3-O-［O-acetyl-β-D-xylopyranosyl-β-D-arabinopyranosyl-β-D-rhamnopyranosyl］ hederagenin-28-O［β-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranosyl-β-D-rhamnopyranosyl］ester 無患子果實 29 13 3-O-(3，4-O-di-acetyl-a-L-arabinopyranoside)-(1 →3)-a-L-rhamnopyranosyl-(1 →2)-a-L-arabinopyranoside 無患子果實4

圖1 五環三萜類齊墩果烷型皂苷結構式Fig.1 Structures of saponin of oleanane quinque cyclic triterpenoids

表2 四環三萜類達瑪烷型皂苷Table 2 Dammarane Sapogenin of tetracyclic triterpenoid

4 25-Methoxy-3β，7β，20(S)，22-tetrahydroxydammar-23-ene-3-O-α–L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside 無患子蟲癭 6 5 25-Methoxy-3β，7β，20(R)-trihydroxydammar-23-ene-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside 無患子蟲癭 6 6 12，3，7，20(S)-trihydroxydammar-24-ene-3-O-a-L-rhamnopyrnosyl-(1 →2)-β-D-glucopyranoside 無患子蟲癭 16 7 3，7，20(R)-trihydroxydammar-24-ene-3-O-a-L-rhamnopyrnosyl-(1 →2)-β-D-glucopyranoside 無患子蟲癭16

圖2 四環三萜達瑪烷型皂苷結構式Fig.2 Structures of dammarane saponin of tetracyclic triterpenoid

表3 五環三萜類甘遂烷型皂苷Table 3 Tirucallane saponin of pentacyclic triterpenoid

圖3 五環三萜類甘遂烷型皂苷結構式Fig.3 Structures of tirucallane saponin of pentacyclic triterpenoid

3 無患子皂苷的藥理作用

3.1 抗細菌和真菌作用

3.1.1 抗細菌作用

G.P.等人［5］用純化的無患子皂苷、姜黃色素以及印度醋栗的提取物配置成的一種新穎、多面殺微生物制劑倍欣，它能抑制WHO 菌株和臨床分離到的淋病奈瑟氏菌(其中包括對盤尼西林(青霉素)、四環霉素、萘啶酮酸和環丙氟哌酸有抗性的淋球菌)，人類已經確定倍欣對從患有外陰陰道假絲酵母菌病的女性身上分離到的假絲菌、光滑念珠菌、白色念珠菌、熱帶念珠菌有抑制作用(其中包括對唑類藥物和兩性霉素B 有抗性的菌株)。Mohammed等人［27］研究發現，無患子乙醇提取物對金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、普通變形桿菌和幽門螺旋桿菌(H.pylori)有抑制作用。體外試驗結果表明無患子醇提取物在非常低的濃度時(10 μg/mL)對幽門螺旋桿菌有抑制作用。體內試驗發現無患子提取物在2.5 mg/mL 時能清除H. pylori 對模型小鼠的感染，而且這些受試菌株未產生耐藥性。研究發現，濃度為10 μg/mL 的無患子提取物能抑制30 株臨床分離的抗藥性幽門螺旋桿菌菌株，這些菌株分離自十二指腸潰瘍、胃潰瘍、非潰瘍消化不良和胃癌患者的活體標本，包括敏感型和有抗藥性H.pylori 菌株。這一抑菌濃度能與以前報道的蒜素6～12 μg/mL，蒜油8～32 μg/mL 和從大蒜中提取的阿焦烯(ajoene )10～25 μg/mL 相比。實驗證明，無患子提取物比磺胺甲噻二唑40 μg/mL，乙烯二噻烯(vinyldithiins)＜100 μg/mL 以及大蒜粉250 μg/mL更有潛力。而且幽門螺旋桿菌在連續傳代10 次后易對阿莫西林、甲基紅霉素抗生素等產生抗性，但不會對無患子提取物產生抗性。另外，Moammed 等人還發現無患子醇提取物不論對抗生素敏感型H.pylori 菌株還是抗藥性菌株均有相同的生物活性。動物試驗顯示口服無患子醇提取物有抗炎癥和抗潰瘍作用，有助于防治胃潰瘍。

3.1.2 抗真菌作用

Tamura 等［28］研究了無患子果皮中皂苷的抗皮真菌活性及其構效關系。研究發現，從無患子果皮中用甲醇提取的粗皂苷對釀酒酵母菌和產朊假絲酵母有明顯的抗菌活性。70%和85%甲醇洗脫液混合后的皂苷混合物(包括單鏈和雙鏈苷)的抗皮真菌作用顯著(單鏈苷抑制作用較強，而雙鏈苷無效)，對酵母菌抑制作用較強，對一般真菌無效;對革蘭氏陽性菌有中度抑制作用，而對革蘭氏陰性菌無效。該皂苷混合物不僅可以作為清潔劑成分加人化妝品，而且具有抗皮真菌、念珠菌和防止頭屑產生的作用。Supradip 等人［29］用發現無患子皂苷對兩種真菌(Rhizoctonia bataticola (Taub.)Briton Jones和Sclerotiumrolfsii Sacc.)有明顯的抗菌活性(EC50在181～407 ug/mL)，他們還發現單糖鏈常春藤皂苷要比雙糖鏈常春藤皂苷對真菌的抗性明顯下降，如果去除糖鏈部分會使活性完全喪失。

3.2 滅螺活性

Huang 等人［7］用無患子的提取物來處理福壽螺，結果無患子皂苷的粗提物表現出滅螺活性，用無患子皂苷粗提物分別處理24，48 和72 h 之后的LC50(Lethal Concentration 50)分別為85，22 和17 ppm，而且從無患子中分離出一種新的乙酰化的常春藤皂苷，同時還有六種已知的常春藤皂苷。實驗數據表明這七種皂苷(Sapinmusaponin K (1)、Sapinmusaponin L (2)、Sapinmusaponin M (3)、Sapinmusaponin N (4)、Sapinmusaponin O (5)、Sapinmusaponin P (6)和hederagenin 3-O-(2，4-O-di-acetyl-R-L-arabinopyranoside)-(1f3)-R-L-rhamnopyranosyl-(1f2)-R-L-arabinopyranoside)用10 ppm 的劑量就可導致金蘋果螺100%的死亡率。

3.3 殺蟲活性

Supradip 等人［8］在實驗室研究了無患子皂苷及它的水解產物對害蟲斜紋夜盜蛾的拒食和害蟲生長調節效應，用無患子皂苷及其水解產物處理5 d 后，結果表明無患子皂苷的水解產物能夠提高害蟲的生長調節活性。錄麗平等人［30］通過浸漬法、飼料混藥法、無限量取食法提取無患子中的皂苷，再進行對小菜蛾、玉米象、果蠅的室內毒力測定，結果表明無患子粗提取物皂苷對玉米象沒有活性，對小菜蛾和果蠅有毒殺活性，但對果蠅的毒力較高，濃度為50.000 mg/mL 時，72 h 果蠅的死亡率為100%，72 h對果蠅的LC50(Lethal Concentration)為4. 06 mg/mL。

3.4 抗炎癥作用

研究發現，活化的嗜中性粒細胞能產生高濃度的超氧陰離子和彈性蛋白酶，這涉及到導管粘液過量分泌，進而能引起慢性肺炎等疾病，Hwang 等人［4］在人類嗜中性粒細胞中研究SMG-1(一種從無患子中分離到的皂苷)的消炎功能和根本的作用機制時發現，SMG-1 能抑制N-甲酰基-蛋氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸(FMLP)活化的人類嗜中性粒細胞中超氧陰離子的產生和彈性蛋白酶的釋放，而且SMG-1 能減少FMLP 誘導的完整嗜中性粒細胞中和膜相連的p47phox的表達，但是卻不能改變重組體系中亞細胞NADPH 氧化酶的活性。SMG-1 能減弱FMLP 誘導的細胞溶質Ca 濃度的增加和p38 MAPK，ERK，JNK，and AKT 磷酸化作用，然而SMG-1 對細胞中cAMP 水平和腺苷酸酶和磷酸二酯酶的活性并沒有影響，受體結合分析表明SMG-1 抑制FMLP 和相應的受體結合，SMG-1 是一種天然的FMLP 受體抑制劑，很有潛力發展成為一種有用的治療嗜中性粒細胞的炎癥疾病的治療劑。

3.5 抗腫瘤作用

無患子的甲醇提取物對小鼠黑素瘤、hela、人胃癌細胞增殖具有抑制作用，其中單皂苷具有抑制腫瘤活性，而雙皂苷則完全沒有活性［31］。長尾常敦發現無患子的甲醇提取物對小鼠黑素瘤、Hela 、MK-1(人胃癌)細胞增殖具有抑制活性［32］。從甲醇提取物中分離得到的無患子皂苷A 及B、常春藤皂苷E，及G 和3-O-乙酰無患子皂苷B ，對以上三種腫瘤細胞增殖的抑制程度與常春藤皂苷元相同。并且糖鏈中乙酰基結合時有使活性增強的趨勢。Huang 等［16］的研究也表明以常春藤皂苷元為苷元的10 種單皂苷對Hela、WiDr、KB 等6 種人類腫瘤細胞具有細胞毒性。Kuo 等人［6］用MTT 處理Hepa59T/VGH，NCI，Hela 和Med 腫瘤細胞，初步的試驗數據表明無患子皂苷1，3-5(ED50～9～18 μg/mL)對其有中度的細胞毒性。G.P.等人［5］用純化的無患子皂苷、姜黃色素以及印度醋栗的提取物配置成的一種新穎、多面殺微生物制劑倍欣，其表現出高度的抗病毒活性，它對人類免疫缺陷病毒HIV-1NL4.3，EC50(Effective Concentration)的稀釋度為1∶20000，當稀釋度為1∶1000 時，它的抑菌率高達98%;它也能阻止病毒HIV-1(IIIB)進入P4-CCR5 細胞(EC50～1 ∶2492)。

3.6 保肝作用

時京珍等人研究了α-常春藤皂苷(α-hederin)和無患子皂苷(sapindoside)對小鼠肝細胞色素p-450 的影響與保肝作用的關系［9］。研究結果顯示，α-常春藤皂苷20 mg/kg，無患子皂苷20 mg/kg 和常春藤皂苷 + 無患子皂苷B20 mg/kg 使肝細胞色素p-450 分別降低了40%，55%和50%，這種抑制作用在3 d 后基本恢復正常。苯巴比妥腹腔注射50 mg/kg 使小鼠肝細胞色素p-450 增加2.5 倍，常春藤皂苷 +無患子皂苷B 使苯巴比妥誘導的p-450 降低了50%，小鼠肝微粒體體外與常春藤皂苷+無患子皂苷B 共孵對p-450 沒有影響，推測常春藤皂苷和無患子皂苷B 的保肝作用至少在某一方面是由于降低了肝細胞色素p-450 而產生的。

3.7 抗精子作用

Manish 等人［10］研究了無患子水提取物在雄性實驗鼠精子成熟過程中對精子膜的改變作用。研究結果顯示:用50 mg/kg/d 劑量的無患子水提取物給雄性實驗鼠灌胃45 d，灌胃組實驗鼠的附睪頭、體、尾部精子活力均低于對照組，并觀察到灌胃組實驗鼠精子中的超氧化物歧化酶活性呈現非常態分布:附睪頭部活性最低，附睪尾部最高，與對照組實驗鼠精子中的超氧化物歧化酶活性分布相反。但對照組和灌胃組實驗鼠的精子數量和形態沒有差異，實驗鼠睪丸和附睪未見組織病變。

3.8 促進抗生素吸收和提高藥效的作用

Tanaka 等人［33］用含三萜皂苷的無患子提取物和β-內酰胺類抗生素同時喂養實驗動物，發現無患子提取物能提高口服或直腸給藥時抗生素的吸收和藥理活性，并能將血中抗生素濃度較長時間地維持在最低有效濃度以上。

3.9 表面活性作用

Raghava 等人［34，35］用從無患子果實中提取到的天然表面活性劑溶液來除去土壤中的疏水性有機化合物(HOC)，以六氯代苯(HCB)為代表，結果表明和傳統的表面活性劑、水相比，HCB 的除去率會隨著無患子天然表面活性劑濃度的增加而提高。Chen 等人［36］對無患子皂苷和油茶皂苷的去污能力進行了比較發現無患子皂苷的去污能力優于油茶皂苷。Rao 等人［37］比較了無患子表面活性劑、人工合成的表面活性劑(Triton-X100，Tx-100 等)和兩者兩兩的混合溶液對萘的溶解效率，結果表明人工合成的表面活性劑優于兩者兩兩的混合溶液，兩者兩兩的混合溶液優于無患子表面活性劑。

除了以上列舉的幾種藥理活性外，無患子皂苷還具有抗血小板聚集［38］(大戟烷型皂苷)、降血壓［39］等作用。

4 展望

無患子皂苷的提取分離工藝主要有水提和醇提取溶劑萃取工藝。醇提萃取工藝技術成熟，但有機溶劑量耗費較大，投資較高，但產率不高，純度有限，此工藝的推廣受到一定限制。水提取工藝操作簡單，溶劑易得，投資小，且無污染，缺點是收集的溶液量大，對其進行進一步的分離精制較困難。從文獻報道的無患子皂苷提取分離方法可以看出，分離方法的選擇，能很好的提高無患子皂苷的提取效率，所以如果能夠設計出一種新型的無患子皂苷提取分離方法，就可以解決水提和醇提溶劑萃取中的不足，為無患子的有效利用提供更加廣闊的前景。

由于無患子中皂苷成分獨特的生物活性，引起了人們的很大興趣，人類通過各種先進的技術手段(如羥基磷灰石柱層析、高效液相層析法、中壓液相層析法、低壓液相層析法和雙向高高效薄層色譜等)，分離到各種無患子皂苷成分，并采用化學方法、土壤細菌法、紫外光分解法、四醋酸鉛氧化堿水解法、醋酐吡啶分解法、x-射線晶體衍射法以及各種光譜方法等新技術對已分離到的無患子皂苷的結構進行了鑒定［40］。隨著人類對各種技術的進一步探索和應用，相信人類會發現更多的有效的無患子皂苷成分，并利用各種手段對生物活性大的無患子皂苷成分進行結構或生化改造，以找到活性更強、更特異的化合物。加快無患子皂苷成分的工業化生產及應用研究，進一步研究無患子皂苷的藥理作用，明確有效成分和活性的相互關系也將成為未來關注的焦點。

1 中國植物志編輯委員會. 中國植物志四十七卷(第一分冊).北京:科學出版社，1998.

2 中國常用中草藥彩色圖譜，貴州科技出版社，371.

3 Zhang MJ，et al.無患子的開發利用.Nat prod Res Dev(天然產物研究與開發)，1993，5(4):76-78.

4 Hwang TL，et al.The hederagenin saponin SMG-1 is a natural FMLP receptor inhibitor that suppresses human neutrophil activation.Biochem Pharm，2010，80:1190-1200.

5 GPT，et al. A novel polyherbal microbicide with inhibitory effect on bacterial，fungal and viral genital pathogens. Int J Antimicrob Agents，2008(32):180-185.

6 Kuo YH，et al.New dammarane-type saponins from the galls of Sapindus mukorossi. J Agric Food Chem，2005，53:4722-4727.

7 Huang HC，et al. Molluscicidal Saponins from Sapindus mukorossi，Inhibitory Agents of Golden Apple Snails，Pomacea canaliculata.J Agric Food Chem，2003，51:4916-4919.

8 Supradip S，et al. Screening for feeding deterrent and insect growth regulatory activity of triterpenic saponins from Diploknema butyracea and Sapindus mukorossi. J Agric Food Chem，2010，58:434-440.

9 Shi JZ，Liu G.Effect of a hederin and sapindoside B on hepatic microsomal cytochrome P-450 in mice.Acta Pharmacol Sin，1996，17:264-266.

10 Nivsarkar M，et al.Sperm membrane modulation by sapindus mukorossi during sperm maturation. Asian J Andrology，2002，4:233-235.

11 Wei FY，et al. 天然無患子皂苷的提取分離. 安徽化工，2007，33(3):15-17.

12 Wei FY，et al.超濾法分離提純無患子皂苷.膜科學與技術，2008，28(2):85-88.

13 Zhu YH，et al.無患子皂苷粗提物提取方法比較. 浙江農業科學，2008(2):247-248.

14 Huang SM，et al.無患子總皂苷的提取工藝研究，安徽農業科學，2010，38:354-356.

15 Rao CH，Guo LH.無患子皂苷提取工藝研究. 江西科學，2002，20:55-58.

16 Huang HC，et al.Triterpenoid saponins from the fruits and galls of Sapindus mukorossi，Phytochemistry 69 2008:1609-1616.

17 Wei FY，Fang C.酶法提取無患子皂苷的工藝研究，應用化工，2010，39:1150-1151.

18 Rao HC，Sang CT.微波萃取法提取無患子皂苷工藝.遼寧石油化工大學學報，2006，26(4):70-72.

19 Xie H.無患子皂昔分離純化的研究.2007.

20 Wei FY，et al. 泡沫分離法純化無患子皂苷，中成藥，2009.

21 Nakayama K，et al.Saponins of pericarps of Chinese Sapindus delabayi(Pyi-shiau-tzu)，a source of natara surfactants.Chem Pharm Bull，1986，34:2209-2213.

22 Kimata H，et al.Saponins of pericarps of Sapindus mukorossi Gaertn and solubilization of monodesmosides by bisdesmosides.Chem Pharm Bull，1983，31:1998-2002.

23 Huang HC，et al. Sapinmusaponins F-J，Bioactive Tirucallane-Type Saponins from the Galls of Sapindusmukorossi. J Nat Prod，2006，69:763，767.

24 Wei N，et al.New tIirucallane-type triterpenoid saponins from sapindus mukorossi gaetn，J Asian Nat Prod Res，2004，6:205-209.

25 Kuo YH，et al. New Dammarane-Type Saponins from the Galls of Sapindus mukorossi，J Agric Food Chem，2005，53:4722-4727.

26 Wei N，et al.Tirucallane-Type Triterpenoid Saponins from the Roots of Sapindus mukorossi，Chem Pharm Bull，2006，54:1443-1446.

27 Ibrahim M，et al.Antimierobial activity of sapindus mukorossi and Rheum emodi extracts against H. Pylori:in vitro and in vivo studies.World J Gastroenterol，2006，14:7136-7142.

28 Tamura Y.無患子果皮中皂苷的抗皮真菌活性.Nat Med，2001，55:11-16.

29 Supradip S，et al.Structure-biological activity relationships in triterpenic saponins:the relative activity of protobassic acid and its derivatives against plant pathogenic fungi.Pest Manag Sci，2010，66:825-831.

30 Lu LP，et al.無患子皂苷粗提物殺蟲活性研究.安徽農業科學，2010，38:10755-10756.

31 Supradip S，et al.Synergistic/potentiation interaction between nematostatic constituents from Azadirachta indica，Madhuca indica and Sapindus mukorossi，Archives of Phytopathology and Plant Protection.2010，43:357-367.

32 Chang WC.關于腫瘤細胞增殖抑制成分的研究. 無患子果皮中的活性成分. 國外醫學:中醫中藥分冊，2002，24:246-247.

33 Osamu T，Noboru Y.Promotion of absorption of drugs administered through the alimentary system，United States Patent 4501734，1985-02-26.

34 Raghava RK，et al. Soil flushing using colloidal gas aphron suspensions rgeneated from a plant-based surfactant. J Hazardous Mater，1998，60:73-87.

35 Raghava RK，et al. Aqueous solubility and desorption of hexachlorobenzene from soil using a plant-based surfactant.Wat Res，1997，31:2161-2170.

36 Chen YF，et al. Foam Properties and Detergent Abilities of the Saponins from Camellia oleifera.Int J Mol Sci，2010，11，4417-4425.

37 Jagajjanani KR，Santanu P. Solubilization of Naphthalene in the Presence of Plant Synthetic Mixed Surfactant Systems. J Phys Chem B，2009，113:474-481.

38 Huang HC，et al.Chem Pharm Bull，2007:1412-1415.

39 Wang WS.無患子皂苷對腎性高血壓大鼠血壓及血管活性物質的影響.中國中藥雜志，2007，32:1703-1705.

40 Zhong LM.三萜皂苷提取分離和結構鑒定技術.中醫藥學刊，2004，4(4).