李 薇 陳怡杰 趙幸娟 李兆妍
鄭州市第一人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科 鄭州 450000
為了明確養(yǎng)血清腦顆粒對大腦缺血再灌注后有無認知功能改善,我科取3組大鼠做如下試驗,經(jīng)過分析總結(jié)歸納如下。
1.1 材料 取成年雄性大鼠36只,提供充足食物、水,室溫(2 5±1)℃
1.2 方法 制備雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎術(shù)后慢性腦缺血動物模型[1]膽堿能系統(tǒng):每組取6只大鼠,分3組:(1)假手術(shù)組,不閉索雙側(cè)頸總動脈;(2)缺血再灌注組,該組夾閉大鼠雙頸總動脈30min,而后解除結(jié)扎造成缺血再灌注損傷;(3)服用養(yǎng)血清腦水劑后夾閉大鼠雙頸總動脈30min,而后解除結(jié)扎造成缺血再灌注損傷。
2.1 養(yǎng)血清腦顆粒+缺血再灌注組 實驗前給大鼠注入養(yǎng)血清腦水溶液0.4g/kg,夾閉大鼠雙頸總動脈30min,而后解除結(jié)扎造成缺血再灌注損傷。該試驗主要監(jiān)測大鼠海馬和額葉皮層組織血漿中,乙酰膽堿轉(zhuǎn)氨酶和乙酰膽堿酯酶的活性,結(jié)果顯示:與假手術(shù)組相比,頸總動脈結(jié)扎后再通組海馬和皮層中乙酰膽堿轉(zhuǎn)氨酶和乙酰膽堿酯酶活性均降低。服藥后結(jié)扎再通組海馬和皮層中乙酰膽堿轉(zhuǎn)氨酶和乙酰膽堿酯酶活性較前者升高。見表1。

表1 3組乙酰膽堿轉(zhuǎn)氨酶和乙酰膽堿酯酶的活性比較
2.2 水迷宮試驗 仍同上取3組,每組6只,采用水迷宮試驗分別檢測3組大鼠學(xué)習(xí)和記憶能力。水迷宮包括一個盛水的圓形水池、隱藏在水面下平臺以及帶有一套圖像自動采集和處理的計算機系統(tǒng)。水池直徑100cm,池深40cm。水池按方位平均為4個假想的象限。水面布滿黑色浮動的樹脂珠以隱蔽平面。水池四周的墻壁上有視覺標志(正方形、三角形、圓形及菱形)等距離分布,供游泳時的大鼠用來定位平臺。在整個實驗期間,水溫保持在25℃左右,迷宮上方安帶有顯示系統(tǒng)的攝像機,攝像頭對準池中心,與之相連的計算機同步錄大鼠運動軌跡,采集并分析水迷宮數(shù)據(jù)和圖像結(jié)果。大鼠在水迷宮中找到平臺的時間越短,游過的距離越短,表明該大鼠學(xué)習(xí)記憶能力越強。結(jié)果表明:結(jié)扎后再通組記憶力高于假手術(shù)組,服藥后結(jié)扎再通組記憶力高于結(jié)扎后再通組。

表2 各組水迷宮試驗比較
腦缺血再灌注引發(fā)的微循環(huán)障礙是一個復(fù)雜的病理生理過程,它會誘導(dǎo)一系列的損傷反應(yīng),其特點為氧化應(yīng)激以及炎應(yīng)反應(yīng)[2],這些炎性介質(zhì)與血細胞和血管內(nèi)皮細胞相互作用,可導(dǎo)致血流不復(fù)灌及血漿滲出,對認知功能也有一定影響。ACh的動態(tài)平衡在多種高級腦功能包括學(xué)習(xí)記憶過程中發(fā)揮重要作用,用TChE及ChAT的活性來反映膽堿能系統(tǒng)的功能較為可靠[3]。大鼠雙側(cè)頸總動脈永久性結(jié)扎是近年來較常用的一種慢性低灌注模型,優(yōu)點為制作簡單,創(chuàng)傷小,重現(xiàn)性好,病死率低[4]。通過該試驗我們發(fā)現(xiàn):(1)養(yǎng)血清腦能夠改善低灌注導(dǎo)致的認知功能損傷,可以調(diào)節(jié)膽堿能系統(tǒng),使乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶活性升高。(2)養(yǎng)血清腦顆粒可能是通過改善大鼠腦部供血,提高海馬組織中CREB(一種核轉(zhuǎn)錄因子)的磷酸化水平來改善血管性認知功能障礙大鼠的空間記憶能力,明顯改善大鼠的學(xué)習(xí)、記憶功能。
[1]Tsuehiya M,Sako K,Yura S,et al.Local cerebral glucose utilization following acute and chronic bilateral carotid ligation in Wistar rats:relation to change in local cerebral blood flow[J].Exp Brain Res,1993,95(5):1-7.
[2]Colli M,Aragno M,Mastrocola R,et al.Oxidative stress and inflammatory response evoked by transient cerebral ischemia/reperfusion:effects of the PPAR-alpha agonist WY14643[J].Free Radic Biol Med,2006,41(4):579-589.
[3]邱瑜.阿爾茨海默病的膽堿能神經(jīng)退變及其機制[J].上海第二醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2001,21(5):475-478.
[4]扈榮,鐘曉明 .廊管性癡呆動物模型的研究概況[J].浙江中醫(yī)
藥大學(xué)學(xué)報,2008,32(1):137-140.