布魯氏菌S19疫苗免疫奶牛血清凝集抗體的動態變化與水解素皮膚變態反應相關分析

摘要：觀察奶牛在布魯氏菌S19疫苗免疫狀態下血清凝集抗體的動態變化規律和免疫后奶牛對布魯氏菌水解素的皮膚遲發性變態反應差異，并探索兩者的相關性，尋找選擇布魯氏菌病抗性牛的方法。選擇布病陰性的性成熟青年黑白花奶牛50頭，注射S19疫苗1×109 CFU/頭，定期采集血液測抗體水平，第60天用布魯氏菌水解素皮內注射，檢測變態反應。結果顯示，所有免疫牛均能在15天時檢測到凝集抗體，30天達到峰值。遲發性變態反應表明，免疫牛對布魯氏菌水解素具有良好的敏感性，變態反應強度與抗體峰值水平存在相關性，但差異不顯著，相關系數為0.235。

關鍵詞：奶牛；布魯氏菌；凝集抗體；變態反應

中圖分類號：S852.4+5文獻標識號：A文章編號：1001-4942（2013）02-0011-04

布魯氏桿菌病是一種廣泛流傳的重要的動物傳染病。在多數宿主動物中主要表現為流產。依據對宿主的偏好性可以將其分為9個主要種，其中6個經典種包括：Brucella melitensis（羊種）， Brucella abortus （牛種）， Brucella suis （豬種）， Brucella canis （犬種）， Brucella neotomae （沙林鼠種）， Brucella ovis （綿羊附睪種）。根據培養和生物學特性又將這6個種劃分為18個亞型。最近又鑒定到3個新種，分別為B. microti（田鼠型），Brucella pinnipediae（鰭型）和 Brucella cetacea（鯨型）。這些種主要感染山羊、牛、豬以及綿羊等[1]。

世界上約有101個國家和地區的牛有布病流行。目前在我國31個省市區中有25個省市區的人、畜有布病存在和流行。我國受布病威脅的人口約有3.5億。人間布病發病率的回升與動物布病的發病率呈正相關，這些數據表明，我國動物布病的危害非常嚴重[2]。

致病布魯氏菌通過在胎盤滋養層定殖引起雌性動物流產以及雄性動物不育。人感染B. abortus 或B. Melitensis后表現不同的癥狀甚至威脅生命。該病的確診主要依靠在流產的組織、分泌物中分離出布魯氏菌來確認[3]。疑似病例的診斷一般采用血清學反應來進行診斷： 孟加拉玫紅試驗、玻片凝集試驗，補體結合試驗或酶聯免疫吸附法（ELISA）等。然而，由于凝集抗體的消失，還沒有一種血清學方法能很好地檢測個體或群體流行情況下的布病的存在。間接ELISA或乳汁環狀試驗在檢測批量的乳牛布魯氏菌時還是很有效的。但是乳汁環狀試驗檢測大量的獸群布病的結果卻不太可信[4～6]。

布魯氏菌素皮膚試驗又稱變態反應試驗，主要檢測機體變態反應水平的高低。因為變態反應一般在感染后20～25天出現，因此不宜做早期診斷。本方法主要用于動物的大群檢疫。本實驗具有極高的特異性，布魯氏菌素陽性而血清學陰性的動物可視作感染動物。但布魯氏菌素試驗不能檢出所有感染動物個體，因此，在國際貿易中不能單獨作為正式的診斷試驗，而應有可靠的血清學試驗進一步證實。皮內注射布魯氏菌素可誘導細胞反應的暫時性無應答，因此同一動物兩次檢查之間應間隔6周以上。布魯氏菌作為胞內寄生的細菌，能誘導機體發生變態反應，該方法也是判斷動物是否感染布魯氏菌的經典方法之一[7，8]。

目前評價布病疫苗效果的主要方法仍是攻毒實驗，這是一種耗時而昂貴的評價手段。如何利用抗體水平、變態反應強度或二者結合評價布病疫苗的免疫效果，是布病疫苗研究領域中值得探討的課題之一。本實驗用布魯氏菌疫苗免疫奶牛，分析了奶牛在免疫情況下抗體水平和變態反應強度之間的相關性，為布病的防控和疫苗評價提供技術方法。