氣相色譜法測定毒死蜱在花生及土壤中的殘留量

摘要：在山東濟南和浙江杭州、河南焦作三地進行了毒死蜱在花生上最終殘留試驗，采用氣相色譜法測定毒死蜱在花生及土壤中的殘留量。結(jié)果表明，施藥后到采收期時花生中的毒死蜱殘留量均低于0.2 mg/kg。30%毒死蜱微囊懸浮劑用于防治花生蠐螬，施藥劑量不超過2 250 g a.i./hm2 （推薦高劑量）、施藥1次是安全的。

關(guān)鍵詞：毒死蜱；花生；氣相色譜；殘留

中圖分類號：Q781文獻標識號：A文章編號：1001-4942（2013）01-0122-04

花生是我國重要的油料作物和經(jīng)濟作物，也是重要的食用油源、蛋白質(zhì)來源和食品工業(yè)的理想原料[1]。蠐螬俗名白地蠶，為多食性害蟲，可為害多種作物，尤喜食大豆、花生等作物。近年來蠐螬危害加重，嚴重影響了花生的產(chǎn)量和品質(zhì)。30%毒死蜱微囊懸浮劑是專門為防治花生蠐螬而研制的長效、高效控制釋放新劑型[2]。

毒死蜱（Chlorpyrifos）是一種高效、廣譜的殺蟲劑，化學名稱為O，O-二乙基-O-（3，5，6-三氯-2-吡啶基）硫逐磷酸酯，屬雜環(huán)類有機磷農(nóng)藥，具有觸殺、胃毒和熏蒸等作用[3]。毒死蜱在菠菜、韭菜、小白菜等以及小麥、獼猴桃上的殘留研究已有報道[4～9]，段勁生[10]、陳炳坤[11]等也對花生中毒死蜱的殘留量及消解動態(tài)作了研究，但樣品的凈化過程多采用液液萃取或過單一弗羅里硅土柱等方法，所用儀器有氣相、液相[12，13]、氣-質(zhì)[14]、液-質(zhì)[15]等。本試驗采用弗羅里硅土+氧化鋁（質(zhì)量比2∶1）層析柱凈化，GC-FPD（氣相色譜-火焰光度檢測器）定性、定量的方法，測定了花生植株、仁、殼及土壤中毒死蜱殘留量，可為制定相關(guān)合理使用準則提供依據(jù)。1材料與方法

1.1材料

30%毒死蜱微囊懸浮劑；毒死蜱標準品（1 000 mg/L）；丙酮（分析純，重蒸餾），乙酸乙酯（分析純，重蒸餾），石油醚、乙腈、氯化鈉、無水硫酸鈉均為分析純，氧化鋁（層析用）；弗羅里硅土：250～150 μm，650℃下活化4 h，用前于130℃烘2 h，加5%水減活，混勻備用。

氣相色譜儀：Agilent 6890N，F(xiàn)PD，帶自動進樣器；高速勻漿機：德國IKA公司T25 Basic型；超聲波提取器：昆山市超聲儀器有限公司KQ-500型；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：德國Heidolph LABOROTA 4000。

1.2田間試驗及樣品制備

于2009年和2010年在山東省濟南市、浙江省杭州市、河南省焦作市進行了30%毒死蜱微囊懸浮劑在花生上的最終殘留試驗。選擇未施用過毒死蜱的花生田塊，按照《農(nóng)藥殘留試驗準則》[16]的要求，共設(shè)2 250 g a.i./hm2（推薦最高劑量）施藥1次、3 375 g a.i./hm2（推薦最高劑量的1.5倍）施藥1次和空白對照3個處理，隨機區(qū)組排列，重復(fù)3次，小區(qū)面積不小于30 m2。

在花生播種時，藥劑對水用噴霧器均勻噴施于播種穴內(nèi)，淺土覆蓋（每666.7m2用藥液40 kg，花生密度按每666.7m2種植8 000穴計算，每穴噴藥液5 ml）。于花生收獲期采集樣品兩次。每小區(qū)隨機多點采集土壤（0～15 cm）1 kg，花生1 kg，花生秧1 kg以上，同時采集空白樣品。

按照《農(nóng)藥登記殘留田間試驗標準操作規(guī)程》[17]的要求，對花生植株、花生仁、花生殼、土壤樣品進行處理后置于-20℃冰箱保存。

1.3分析方法

1.3.1樣本提取土壤：稱取樣品20 g于具塞廣口瓶中，加水10 ml，分3次加入40、40、30 ml丙酮-石油醚（體積比1∶1），超聲波各提取15 min，經(jīng)無水硫酸鈉層過濾于平底燒瓶中，于35℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上減壓濃縮至約1 ml，待凈化。

花生植株：稱取樣品20 g，加入丙酮-乙酸乙酯（體積比1∶1）溶液100 ml，高速勻漿30 s，轉(zhuǎn)移到加有10 g氯化鈉的具塞量筒中，搖勻，靜置30 min后，準確移取50 ml上層浸提液，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮至約1 ml，待凈化。

花生殼：稱取樣品10 g于具塞廣口瓶中，分3次加入40、40、30 ml丙酮，超聲波各提取15 min，經(jīng)無水硫酸鈉層過濾于平底燒瓶中，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮至約1 ml，待凈化。

花生仁：稱取樣品10 g于具塞廣口瓶中，分3次加入40、40、30 ml乙腈，超聲波各提取15 min，經(jīng)無水硫酸鈉層過濾于平底燒瓶中，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮至約1 ml，待凈化。

1.3.2凈化用玻璃層析柱凈化濃縮的樣品。柱內(nèi)下部塞脫脂棉，加入少許無水硫酸鈉，再加入5 g氧化鋁+弗羅里硅土（質(zhì)量比2∶1），上部以無水硫酸鈉封頂，用50 ml石油醚預(yù)淋，將濃縮物上柱，依次用石油醚-乙酸乙酯（體積比4∶1）10、20、30 ml洗脫，收集洗脫液，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮至近干，乙酸乙酯定容至500 ml，待測。如定容后的樣品溶液過于混濁，應(yīng)用0.2 μm濾膜過濾后再進行測定。

1.3.3氣相色譜條件色譜柱：HP1701，25 m×0.32 mm×0.25 μm；柱溫：160℃保持4 min，10℃/min升溫至250℃，保持8 min；進樣口溫度：250℃；檢測器溫度：300℃；柱壓力：1.03×105 Pa；進樣量：1 μl。2結(jié)果與分析

2.1方法線性和檢測限

在上述儀器條件下，得到毒死蜱保留時間為16.4 min（見圖1）。將一定量的標準品用丙酮溶解后，配制一系列不同濃度的標準溶液，以峰面積為縱坐標，質(zhì)量濃度為橫坐標測得定標準曲線：Y=1624.8X-19.316，r=0.9998。毒死蜱的最低檢出量為5.0×10-11 g，在土壤、植株、花生殼和花生仁中的最低檢出濃度均為0.01 mg/kg。

2.2準確度和精密度

在空白樣品中分別定量加入不同質(zhì)量分數(shù)水平的毒死蜱標準溶液，用上述分析方法檢測，得到不同質(zhì)量分數(shù)下的回收率，回收率在85.0%～101.5%之間，相對標準偏差為1.4%～9.3%，均符合殘留分析的要求（見表1）。

2.3最終殘留試驗

從兩年試驗結(jié)果（表2）來看，毒死蜱施藥劑量為2 250 g a.i./hm2時，在植株中的殘留最高為0.02 mg/kg，土壤中的殘留量為<0.01～0.05 mg/kg，花生殼和花生仁中的殘留量均<0.01mg/kg。施藥劑量為3 375 g a.i./ hm2時，在植株中的殘留最高為0.05 mg/kg，土壤中的殘留量為<0.01～0.06 mg/kg，花生殼和花生仁中的殘留量≤0.01 mg/kg。 3結(jié)論

本試驗采用不同溶劑、不同方法對花生植株、花生仁、花生殼、土壤中殘留的毒死蜱進行提取，提取物采用過氧化鋁+弗羅里硅土（質(zhì)量比2∶1）固相萃取柱凈化，用帶FPD檢測器的氣相色譜儀測定。該方法前處理采用氧化鋁+弗羅里硅土（質(zhì)量比2∶1）固相萃取柱凈化，主要是考慮到花生仁含油脂較多，單一弗羅里硅土柱無法起到去除油脂的作用，用乙腈提取花生仁中的毒死蜱并在固相萃取柱中加入氧化鋁后可有效去除樣品中的油脂。

中國規(guī)定毒死蜱在花生中的MRL值為0.2 mg/kg。本試驗結(jié)果表明，毒死蜱在花生中的殘留量均小于0.2 mg/kg。由此得出結(jié)論：30%毒死蜱微囊懸浮劑用于防治花生蠐螬，施藥劑量不超過2 250 g a.i./hm2 （推薦高劑量）、在花生播種時藥劑兌水用噴霧器均勻噴施于播種穴內(nèi) （穴施）1次是安全的。

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