調節性T細胞在變應性鼻炎中的研究進展

孟 珣，沙驥超，董 震，朱冬冬

（吉林大學中日聯誼醫院 耳鼻喉－頭頸外科，吉林 長春 130033）

變應性鼻炎（Allergic Rhinitis，AR）是特應性個體接觸致敏原后由IgE介導的介質（主要為組胺）釋放，并由多種免疫活性細胞和細胞因子等參與的，鼻黏膜慢性炎癥反應性疾病。目前變應性鼻炎的發病機制占主導地位的是Th1／Th2失衡學說。但越來越多的證據顯示：Th1／Th2失衡學說并不能完全解釋變應性鼻炎的一些實驗和臨床表現。而調節性T細胞（T regular cells，Treg）與Th17細胞的發現完善了變應性鼻炎的研究，分析哮喘病人的血清［1］，發現，哮喘病人存在Treg／Th17失衡。目前以明確Treg細胞具有免疫抑制作用，但是關于其發揮功能的具體信號通路尚不明確。本文將針對調節性T細胞在變應性鼻炎中的相關研究進展做一綜述。

1 變應性鼻炎發病機制

人類上呼吸道黏膜中存在數量不等的抗原呈遞細胞（APCs），如單核細胞／巨噬細胞、樹突細胞。當吸入性變應原通過鼻黏膜上皮細胞，被抗原呈遞細胞識別、攝取，并被抗原呈遞細胞識別成可與主要組織相容性復合物（major histocompatibility complex，MHC）II結合的短肽鏈。抗原呈遞細胞將與MHCII結合的變應原呈遞給CD4＋T細胞，CD4＋T細胞在IL－4［2］、IL－10作用下分化為 Th2細胞，Th2細胞進一步分泌IL－4、IL－13等細胞活化因子，可促進B細胞由分泌Ig M轉化成漿細胞，大量分泌抗原特異性IgE［3］。同時IL－4又可進一步促進CD4＋T細胞向Th2細胞分化。在相同變應原再次入侵人體時，將啟動速發反應，記憶性B細胞迅速增殖、分化為漿細胞，釋放大量抗原特異性IgE。Ig E以Fc受體結合區（Fc Region）與肥大細胞上FcεRI受體緊密鏈接。一個肥大細胞上可結合大量IgE，同時IgE上的Fab段可與變應原結合［4］，這一過程可激活肥大細胞，導致肥大細胞發生脫顆粒，將組胺、類胰蛋白酶（tryptase）、激肽原酶 （kininogenase）、巨噬細胞集落刺激因子（GM－CSF）等介質通過胞吐作用釋放至細胞外，引起局部炎性反應，如鼻癢、噴嚏、清水樣涕等。

目前針對變應性鼻炎的治療主要以抗組胺藥物、糖皮質激素鼻噴劑及脫敏治療為主。這些治療手段頗有成效，但脫敏治療適用人群范圍狹窄，藥物治療又具有需要長期用藥的缺點。以至于約30%的患者不能很好的控制病情。這一現狀顯示了尋求新的治療方法的重要性。Treg細胞在變應性鼻炎發病中的作用，為治療這一疾病提供了新的思路。

2 Treg細胞亞型

骨髓產生的前T細胞選擇性的遷移到胸腺，在胸腺微環境中受遺傳控制，逐步分化成熟為不同種類的T細胞。調節性T細胞可廣義的分為：天然Foxp3＋調節性T細胞（n T－reg）和誘導型調節性T細胞（iTreg）。其中人類和鼠的天然Treg細胞占外周血中CD4＋T細胞的5%－10%。iTreg是Treg細胞發揮免疫抑制作用的核心成員，它在控制慢性、變應性、感染性疾病中發揮著重大作用。此外調節性T細胞還存在Tr1和Th3亞型。Tr1又稱為IL－10分泌型Treg細胞，Th3可特異性分泌TGF－β。

3 Treg細胞的誘導分化因素

一些觀點認為：在n Treg的分化形成過程中，樹突細胞沒有發揮作用，而是由胸腺上皮細胞中特異的抗原來表達誘導完成的［5］。相反的是，另外一種觀點認為：n Treg的分化形成過程中樹突細胞發揮著重要作用［6］。Proietto AI［7］等指出：胸腺中樹突細胞一般有 CD8loSirpαhi／＋和 CD8hiSirpαlo／－兩個亞型，而只有CD8loSirpαhi／＋亞型在自身陰性選擇的功能基礎上同時可誘導n Treg的產生。胸腺中的赫氏小體產生的胸腺間質淋巴蛋白（TSLP）可作用于樹突細胞，從而誘導Foxp3的表達，促進T細胞向n Treg細胞方向分化［8］。但即便是針對TSLP的作用，目前也沒有統一的觀點。有明確的證據表明肺組織和皮膚中TSLP的表達可以分別引起呼吸道變應性疾病和過敏性皮炎［9］。這暗示了TSLP并不會誘導外周血中Treg的產生。TGF－β在n Treg的分化中是否發揮作用也存在著爭議。有實驗表明：TGFβ－R1缺陷的小鼠n Treg細胞數正常［10］。但近年有人證明TGFβ－R1基因敲除小鼠在出生后的3－5天表現為n Treg缺乏，但隨著細胞對IL－2反應的代償，n Treg細胞生成逐漸增加［11］。

iTreg的分化目前已知與IDO、維甲酸、維生素E和TGF－β有關。維生素D［12］也可促進iTreg生成。存在于消化道上皮黏膜的CD103＋樹突細胞可以通過維甲酸和TGF－β刺激局部Treg細胞的成熟［13，14］。皮膚樹突細胞包括朗格漢斯細胞（LCs）和真皮樹突細胞（dermal DCs）。Schwarz A［15］等證明：朗格漢斯細胞在iTreg的誘導分化中發揮作用。而Stary G［16］等進一步證明 LCs可產生 TGF－β，從而在iTreg的誘導分化中發揮作用。

IL－10，IL－27，TGF－β［17］均可誘導 Tr1細胞的產生。此外Akbari O［18］等發現：成熟肺泡樹突細胞表達的ICOSL對于誘導Tr1細胞同樣重要。若抑制肺泡樹突細胞ICOSL的表達，Tr1的產生將會受到抑制。Ito T等［19］發現若外周血中成熟樹突細胞ICOSL的表達可以誘導Tr1產生。

4 Treg細胞免疫抑制作用

目前，研究發現哮喘與特異性皮炎患者的血清IgE、嗜酸性粒細胞、IFN－γ水平與 Foxp3表達水平成反比，且Foxp3＋／CD4＋比例顯著較健康對照人群低［20］。在變應性鼻炎患者接受系統免疫治療后，臨床癥狀減輕，而其局部鼻黏膜FOXP3＋CD25＋CD25－T 細胞增多［21］。

Treg細胞抑制抗原特異性免疫應答主要通過4條途徑。①抑制抗原呈遞細胞如樹突細胞功能，從而抑制效應性T細胞功能。②抑制Th1／Th2細胞。③抑制抗原特異性IgE生成，并誘導產生IgG4。④抑制肥大細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞功能。⑤與固有組織細胞交互作用，控制組織重塑［22］。

樹突細胞作為抗原提呈細胞，與Treg細胞具有緊密關系。樹突細胞可調控Treg細胞的分化成熟，Treg細胞也可影響抗原呈遞細胞包括樹突細胞的成熟及功能。將Treg細胞、CD4＋T細胞與抗原提成細胞共培養，可發現Treg細胞可抑制 CD4＋細胞的增殖［23］。Treg細胞的 LAG－3和CTLA－4與樹突細胞上相應受體結合，可抑制樹突細胞成熟。同時，CTLA－4與樹突細胞q表達的CD80或CD86相互作用，可促進IDO的表達。IDO是一種有效的免疫抑制分子，它可誘導色氨酸分解代謝為細胞凋亡前體代謝產物［24］。IL－10，TGF－β和IL－35均與Treg的免疫抑制作用相關。這三種細胞因子的功能有相同之處，并且也各有特點。一般認為Th1／Th2細胞的分化與所處的細胞因子環境密切相關，Treg細胞通過產生起調節作用的細胞因子（IL－10，TGF－β和IL－35）調控Th1／Th2細胞的分化方向，從而控制自身反應或直接對效應T細胞產生抑制作用。但另外也有觀點認為，IL－10僅僅是通過調節Treg細胞的分化成熟來參與Treg細胞的免疫抑制作用的。鼠Foxp3＋Treg細胞可優先表達IL－35，但激活的效應T細胞并不表達IL－35。體外實驗以證明：被激活發揮免疫抑制作用的Treg細胞對于IL－35的表達顯著升高，但IL－35在免疫抑制作用中扮演什么樣的角色？這一信號通路尚不明確。此外人類Treg細胞可通過粒酶A作用于目標細胞，產生細胞毒作用從而進行免疫抑制。Kearley等［25］也證明了Treg細胞可通過控制氣道上皮的組織重塑和粘液分泌過多，而控制哮喘癥狀。

值得注意的是：Th3細胞同時具有輔助型T細胞（Th）功能，和下調Th1細胞水平的功能。它可特異性分泌TGF－β，同時也可分泌少量IL－4和IL－10。TGF－β可以作為免疫抑制因子抑制Ig M，IgG1，IgG2a和IgG3的分泌。但TGF－β也可作為免疫激活因子，誘導B細胞分泌Ig A。所以有觀點認為，Th3細胞不能歸類于Treg細胞亞型的一種。正如，Th1細胞分泌干擾素－γ（IFN－γ）可抑制 Th2增殖［26］，Th2生成的IL－4可以抑制 Th1分化和分泌IFN－γ［27］。Th－17可分泌IL－17抑 制 Th1 分 化［28］。而 Th1、Th2、Th17 均可 分 泌IL－10［29］。IL－10作為免疫抑制因子，可以抑制多種T細胞的分化和細胞因子生成。也就是說Th細胞具有免疫激活作用之外也有免疫抑制作用。而Treg細胞區別于Th細胞之處在于，它僅有免疫抑制功能。

5 結語

目前，Treg細胞的免疫抑制作用信號通路尚不明確，但已知它與抗原呈遞細胞和效應性T細胞具有緊密聯系。在被結核分枝桿菌感染的人和鼠的肺組織中，Treg細胞含量明顯高于健康對照［30］。這表明Treg細胞的增多使機體面臨免疫力下降，感染風險上升的問題。但也從另一面啟發我們：是否可以尋找到分枝桿菌的特異性分子去刺激Treg，引起Treg細胞可控范圍內的增多，從而達到治療變應性疾病的目的？進一步，是否可以從抗原呈遞細胞上找到一個特異位點，通過皮下注射或鼻噴等途徑，激活抗原呈遞細胞，從而引發Treg細胞增殖？可以預見，通過Treg細胞調控機體免疫狀態將是未來變應性鼻炎治療手段研究的重點。

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