血脂檢測試劑對脂蛋白（a）測定結果的影響因素及防范措施

王玉敏

（吉林省人民醫院，吉林長春130021）

血脂檢測試劑對脂蛋白（a）測定結果的影響因素及防范措施

王玉敏

（吉林省人民醫院，吉林長春130021）

目的 探討血脂檢測試劑對脂蛋白（a）測定結果的影響因素并制定出相應的防范措施。方法 采用Olympus AU2700全自動生化儀先對新鮮混合血清進行脂蛋白（a）單獨檢測，再取同份標本分別置于高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）檢測后進行脂蛋白（a）的測定，記錄上述各組結果并進行統計學分析。結果 本次研究發現低密度脂蛋白膽固醇、總膽固醇、三酰甘油檢測試劑對脂蛋白（a）測定結果具有明顯的正干擾，高密度脂蛋白膽固醇對脂蛋白（a）（P＞0.05）測定結果則沒有干擾作用。結論 采用全自動生化儀測定脂蛋白（a），其不同測定項目之間存在試劑干擾，因此檢測人員應該熟悉待檢試劑的生化物理性質，并且盡量合理安排檢測順序，從而才能有效避免血脂檢測試劑對脂蛋白（a）測定的干擾。

血脂檢測試劑；脂蛋白（a）；影響因素；防范措施

血清脂蛋白（a）是在肝臟中合成的，能夠導致動脈硬化的一類脂蛋白。血清脂蛋白（a）的濃度不受年齡、性別、體質、降固醇類藥物等多種因素的影響，主要由基因調控，當其血漿濃度≥300mg/L，血清脂蛋白（a）則被認為是心肌梗死和動脈硬化的獨立危險因子[1]。另外，血清脂蛋白（a）水平不僅是是反映冠心病發展與轉歸的重要指標之一，同時與急性心肌梗死的病情發展、演化也具有密切的聯系，因此準確而又合理地測定血清脂蛋白（a）的濃度對疾病的診治具有重要的意義[2]。目前，有研究資料表明不同血脂檢測試劑如高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、總膽固醇、三酰甘油等檢測條件下血清脂蛋白（a）的測定結果具有比較明顯的差異。近年來，筆者對血脂檢測試劑對脂蛋白（a）測定結果的影響因素進行探討并制定出相應的防范措施，現將本次研究簡單介紹如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

采用日本OLYMPUS公司生產的Olympus AU2700全自動生化儀，該儀器采用了點光源技術，最小反應體積可設置為120μL，精確度高；Olympus AU2700全自動生化儀采用內外雙圈比色杯（即inner和outer），具有使分析儀發揮最大的測試速度，提高分析儀的使用效率的優點，同時還可以通過內外圈的合理分開而避免交叉污染的特點[3]?？偰懝檀迹═C，膽固醇氧化酶法）、三酰甘油（TG，去游離甘油法）、低密度脂蛋白膽固醇（選擇保護法）、高密度脂蛋白膽固醇（抗體阻礙法）試劑檢測盒由日本wako公司提供；脂蛋白（a）（免疫比濁法）檢測試劑申索佑福醫學診斷用品有限公司。

1.2 臨床標本

選取我院檢驗科的20份無黃疸、無脂血、無溶血的新鮮血清標本，制備出混合血清。

1.3 檢測方法

1.3.1 血脂試劑對脂蛋白（a）檢測的干擾程度

首先分析血脂試劑對脂蛋白（a）檢測的干擾程度，取混合血清在無干擾條件下單獨測定脂蛋白（a）12次，作為對照組；再取同份標本分別置于高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）檢測后進行脂蛋白（a）的測定，記錄上述結果并進行統計學分析。

1.3.2 血脂試劑的干擾持續時間

取混合血清在無干擾條件下單獨測定脂蛋白（a）12次，作為對照組；再取同份混合血清在血脂檢測后測定脂蛋白（a）3次，然后再重復檢測血脂和脂蛋白（a）12次。

1.4 統計學處理

采用SPSS11.0軟件來完成對數據的統計與處理，然后進行卡方檢驗，以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 血脂試劑對脂蛋白（a）檢測的干擾程度

對于同一份血清標本，單獨檢測其脂蛋白（a）以及高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）檢測后再進行脂蛋白（a）的測定，其檢測結果分別為（227±2.62）、（223±3.21）、（255±2.78）、（249± 3.11）、（251±2.92），低密度脂蛋白膽固醇、總膽固醇、三酰甘油檢測試劑（P＜0.05）對脂蛋白（a）測定結果具有明顯的正干擾，高密度脂蛋白膽固醇（P＞0.05）對脂蛋白（a）測定結果則沒有干擾作用。

2.2 血脂試劑的干擾持續時間

本研究中，低密度脂蛋白膽固醇、總膽固醇、三酰甘油檢測試劑對脂蛋白（a）的干擾持續到第三個測試，高密度脂蛋白膽固醇試劑則對脂蛋白（a）沒有干擾作用。

3 討 論

全自動生化分析儀對提高檢測率具有重要的作用，尤其是對于檢測工作量較大的醫院檢驗科室而言非常適用[4]。但全自動生化分析儀也存在一定的局限性，其主要局限表現為：當采用同一根試劑針吸取試劑時，往往為了提高效率，清洗程序和過程短暫而快速，特別是對于較高濃度的試劑，試劑針更加難以被清洗干凈；此外，對于部分檢測項目，前一項檢測的殘留成分可能會被帶到后一項的檢測成分中，并且發生生化反應，導致后面的檢測項目的測定結果出現較大的偏離，盡管在一定范圍內的偏離基本上不會對病情的判斷造成影響，但是如果偏離過大可能會導致誤判，從而造成嚴重的后果，因此探討血脂檢測試劑對脂蛋白（a）測定結果的影響因素并制定出相應的防范措施非常重要。全自動生化分析儀的攜帶污染是影響檢測結果的重要原因之一。攜帶污染不僅來自于樣品間，還來自于試劑間的化學污染，包括攪拌棒、比色杯污染、試劑針等。本研究中采用的Olympus AU2700全自動生化儀，其比色杯是硬質的PV材料，具有嚴格的清洗檢測程序及正常的保養措施，因此本儀器的交叉感染主要來自于攪拌棒和試劑針。在每次加樣完成之后，如果試劑中含對下面測試有影響的成分或者沖洗次數不夠，都將會對下一測試項目造成不同程度的干擾，導致其測定結果發生偏離，從而對檢驗診斷和臨床治療造成明顯的影響[5]。本研究中脂蛋白（a）的檢測采用免疫比濁法，其原理也就是現將人體血清脂蛋白（a）與結合在膠乳顆粒表面的羊抗人血清脂蛋白（a）抗體，使二者發生凝集反應，研究發現在反應體系600nm處的吸光度與血清脂蛋白（a）的含量呈正相關。因此可以判斷，如果血脂試劑中含有某種能與膠乳顆粒表面的羊抗人血清脂蛋白（a）抗體結合的物質，將會增加膠乳凝集的濁度，從而會對血清脂蛋白（a）的檢測造成一定的影響，使其測定結果偏高。而高密度脂蛋白膽固醇試劑檢測采用的是抗體阻礙法，其原理就是檢測之前先除去血脂試劑中含有的能與膠乳顆粒表面的羊抗人血清脂蛋白（a）抗體結合的物質，從而避免脂蛋白（a）的測定結果產生干擾[6]。為了避免試劑間的交叉污染，最有效的防范措施就是在每次檢測之后都進行比較徹底的清洗，但是卻不能保證全自動生化分析儀的高效進行，同時這在臨床實際檢測中也是不可能的。目前，卻又不少關于清除交叉污染的報道，如采用堿性、酸性清洗劑以及蒸餾水等以加強試劑針的清洗，雖然能夠減少干擾但卻不能完全清除，也有專家提出采用下面的方法消除干擾：隔絕某兩個檢測項目的聯系，可以從反應原理和試劑組成的角度上分析上一個項目對下一個項目干擾的可能性，從而合理安排項目分析的順序，將可能會被干擾的項目置于干擾項目之前；還可以通過設置特殊的沖洗程序來減少干擾，即對于可設定沖洗程序的生化分析儀，應該在存在干擾檢測項目之間設置加強沖洗程序[6]。并且在實際操作中，盡量將總膽固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白膽固醇等對脂蛋白（a）測定有影響的項目設定在不同的位置上，在試劑間還應該多間隔一些其他對脂蛋白（a）測定沒有影響的試驗，這樣才能有效避免對脂蛋白（a）測定的交叉感染，還可以將一些有交叉感染的試驗放在不同的批次進行測定。

此外，對于樣品針、攪拌棒、試劑針每天也都應該用75%的乙醇擦洗，在更換不同方法的試劑時應該觀察新選用的試劑對鄰近項目是否會有被其影響或者干擾的可能性，認真挑選異常結果并進行復查以最大限度的減少誤差[7]?？傊?，采用全自動生化儀測定脂蛋白（a），其不同測定項目之間存在試劑干擾，因此檢測人員在工作中應該加強儀器的日常維護和保養，熟悉待檢試劑的生化物理性質和儀器工作流程，并且盡量合理安排檢測順序，才能有效避免血脂檢測試劑對脂蛋白（a）測定的干擾，獲得準確的測定結果，從而為臨床提供客觀可靠的診斷依據。

[1] 李家偉,殷昌斌,王立秋.血脂檢測試劑對脂蛋白(a)測定結果的影響及防范措施[J].國際檢驗醫學雜志,2012,33(5):616-617.

[2] 胡俊萍,毛美嬌,梁燕,等.血脂檢測方法評價及影響因素研究[J].國際檢驗醫學雜志,2011,32(5):585-587.

[3] 朱武軍,邰飛,邵燕麗,等.循環酶法測定總膽汁酸試劑交叉污染及預防措施[J].國際檢驗醫學雜志,2011,32(9):990.

[4] 唐衡,桂滿元,易斌.血脂檢測試劑對總膽汁酸測定結果的影響及防范措施[J].醫學研究雜志,2009,38(10):92-95.

[5] 吳劍楊,黃燕爾.血脂檢測試劑對總膽汁酸測定結果的影響及防范措施探討[J].中國醫藥指南,2012,10(17):17-18.

[6] 鄧正輝,張華,李龍平.生化試劑對膽汁酸測定的交叉污染及防范措施[J].中國實用醫藥,2008,3(10):55-56.

[7] 于嘉屏.全自動生化分析儀及其試劑問化學污染對檢測結果的影響[J].中華檢驗醫學雜志,2007,30(11):1301-1302.

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1671-8194（2013）33-0102-02