探討實時熒光PCR法檢測乙肝病毒DNA在臨床中的應用

王金梅

（吉林省四平市傳染病醫院 檢驗科 ，吉林 四平 136000）

探討實時熒光PCR法檢測乙肝病毒DNA在臨床中的應用

王金梅

（吉林省四平市傳染病醫院 檢驗科 ，吉林 四平 136000）

目的 分析并探討實時熒光PCR法檢測乙肝病毒DNA在臨床中的應用。方法 首先要對患者采用血清學標志物這種方法檢測，進一步確定他是乙型肝炎的患者。再次就是選擇500例患者進行檢測，這樣有利于保證實驗的準確性。結果 實時熒光PCR方法檢測的乙肝病毒DNA數據與采用血清學標志物方法檢測的乙肝病毒數據大致一致，但是采用熒光PCR方法檢測的病毒DNA數據更準確，更詳細。大三陽、小三陽患者血清中PCR的結果拷貝數均較高，而HbsAb（+）或HbsAg（-）的標本PCR有個別陽性結果[2]。結論 實時熒光PCR法可以準確檢測出乙肝病毒和其詳細數據，這說明實時熒光PCR法檢測乙肝病毒DNA具有良好的臨床意義，值得臨床使用。

乙肝病毒；血清學；拷貝數目

以前要想檢測患者是否是乙性肝炎病毒攜帶者，大部分都是采用血清學標志法，要采集患者的血液進行檢驗，如果操作適當不當，還容易造成工作人員也感染乙肝病毒。所以各個國家的醫學專家積極尋找其他可以檢測乙型肝炎病毒DNA的方法，最終發現熒光PCR方法可以得到準確的乙型肝炎病毒DNA的數據，此文章就是在探討和分析實時熒光PCR法檢測乙肝病毒DNA在臨床中的應用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

首先選擇可能攜帶乙型肝炎的患者，這些患者最好是年齡跨度較大，在15～70歲的年齡段中都有患者存在，這樣更有利于實驗的準確性，防止出現偏差。然后采用血清學標志法進一步確定他們是乙肝患者，這樣可以使實驗結果的偏差較小。最重要的是要記錄好乙型肝炎患者中乙肝病毒DNA的數據，并且要注意保存仔細。然后將這500位乙肝病毒攜帶者和患者，再用熒光PCR的方法對其進行檢測，然后仔細記錄這些數據。最后把用血清學標志法檢驗的乙肝病毒DNA數據與用熒光PCR方法檢驗的乙肝病毒DNA數據做比較，然后把比較的數據進行分析，并用論文的形式呈現出來。

1.2 方法

將用血清學標志法檢驗的乙肝病毒DNA數據作為對照組，然后把用熒光PCR的方法檢驗的乙肝病毒DNA數據作為觀察組。然后把觀察組與對照組的數據做比較，發現觀察組即用熒光PCR的方法檢驗乙肝病毒DNA的數據與對照組里的數據差別不大，而且從觀察組數據里發現，用熒光PCR方法檢驗的數據中PCR拷貝數較高的是大三陽者和小三陽者，而HbsAg（-）和HbsAb（+）的PCR中有陽性的因素，拷貝數較低。

1.3 療效標準

顯效：觀察組即用熒光PCR方法檢測乙肝病毒的數據與對照組即用最普通的檢驗方法血清學標志法檢驗的乙肝病毒數據作比較，發現差別不大，而且用熒光PCR方法檢測的乙肝病毒數據更加準確，PCR拷貝數較高的是大三陽者和小三陽者。效果不明顯：觀察組即用熒光PCR方法檢測乙肝病毒的數據與對照組即用最普通的檢驗方法血清學標志法檢驗的乙肝病毒數據做比較，發現差別效果較小，而且熒光PCR方法在準確度上還有其他數據中也沒有突出的表現。無效：觀察組即用熒光PCR方法檢測乙肝病毒的數據與對照組即用最普通的檢驗方法血清學標志法檢驗的乙肝病毒數據做比較，發現觀察組的數據與對照組的數據差別較大，且對照組的數據不及觀察組的數據準確。

1.4 統計學分析

采用spss10.0統計學軟件對所得數據進行t檢驗，對于用熒光PCR方法檢測的乙肝病毒的DNA數據與用血清學標志法檢測出的乙肝病毒DNA數據進行統計學分析，如果差異較大，即P＜0.05.則有統計學意義。如果兩者的數據差異較小，即P＞0.05，則沒有統計學意義。

2 結 果

通過實驗，發現實時熒光PCR方法檢驗乙肝病毒的DNA數據很準確，有良好的臨床意義。且療效標準是顯效，即用熒光PCR 方法檢測的乙肝病毒DNA數據與用普通方法血清學標志法提供的乙型肝炎病毒DNA數據相似，且在用熒光PCR方法檢測的數據更加準確。比如數據顯示，HbsAg（+）、HbcAb（+）即大三陽中的陽性率達到了97%，HbsAg（+）、HbeAb（+）、HbcAb（+）即小三陽的陽性率則是70%，而HbsAg（-）、HbsAb（-）、HbeAg（-）、HbeAb（-）、HbcAb（-）的陽性率則是2.2%。這充分證明了實時熒光PCR方法檢驗肝病毒的DNA具有良好的臨床效果，值得臨床應用。

3 討 論

乙肝是乙型病毒性肝炎的簡稱[1]，它屬于內科中的消化內科，發病的部位主要是人們的肝臟，是人們至今都非常擔心的一種病癥[2]。因為乙肝是一種具有嚴重傳染性的疾病，他的傳染途徑主要有血液傳播，所以要杜絕接觸到乙肝患者的血液；母嬰傳播，所以國家規定乙肝患者不能進行生育，以防下一代也成為乙肝患者；性傳播、皮膚黏膜破損傳播都是乙肝傳染的主要途徑。乙肝根據病程的長短也分為急性乙型肝炎和慢性乙型肝炎，從字面意思來了解，急性乙型肝炎比慢性乙型肝炎更可怕，甚至會危及到人的性命。乙型病毒性肝炎根據病情的輕重也可以分成乙肝攜帶者、重型肝炎患者、活動性乙型肝炎患者、肝炎肝硬化患者等。

這個實驗充分證明了實時熒光PCR方法檢測乙肝病毒DNA在臨床中有重要的意義，相比運用血清學標志法來說[3]，測出的數據更加準確，內容更加全面，從而為研究乙型病毒型肝炎的其他方面做了充分的準備。所以，實時熒光PCR方法可以進行臨床應用。

[1] 黃惠宜.250例慢性乙型肝炎患者的HBVDNA、HBsAg、HBeAg與HBVpreS1-Ag臨床關系的探討[A].第十三次全國中西醫結合肝病學術會議論文匯編[C].2004.

[2] 郭亞光,樓大勇.乙肝前S1抗原與HBV-DNA、HBe Ag(HBeAb)相關性的研究[J].安徽醫藥,2007,11(5):444.

[3] 丁遠杰.實時熒光PCR檢測轉基因農產品的研究[D].長沙:湖南農業大學,2004.

R446.5

B

1671-8194（2013）25-0173-01