血小板細菌檢測的必要性

張 燕* 方建華 劉玉振

（河南省紅十字血液中心檢驗科，河南 鄭州 450002）

血小板細菌檢測的必要性

張 燕* 方建華 劉玉振

（河南省紅十字血液中心檢驗科，河南 鄭州 450002）

血液制品；細菌檢測；單采血小板

血液制品的安全性一直是我們最為關注的問題，上個世紀相關學者一直致力于血液傳染病的研究，而血液的細菌污染同樣不可忽視，特別是血小板，它的保存溫度（22℃）為細菌生長創造了有利條件。因此，我們要嚴格預防和控制血液制品的細菌污染，單采血小板的細菌檢測勢在必行。

1 國內外對細菌檢測的研究

1.1 早在2001年，Matthew J就美國在1998～2000年的血小板細菌污染問題做了研究，其中單采血小板1804725U，濃縮血小板1033671U，共發現細菌污染29例，其中6例死亡[1]。在2000年英國的嚴重輸血危險性檢測系統報告表明，28例輸血相關死亡病例中，有3例是細菌污染引起的[2]。在2002年，英國的James對醫院輸血科機采血小板做常規細菌培養，2678份血小板中有16份陽性，陽性率為0.6%。法國的血液監視系統顯示，在1996～1997年，33例死亡病例中有5例是細菌污染引起的[3]。因此，美國紅十字會從2004年開始對單采血小板進行細菌培養，其陽性率高達血液傳染病的10倍。

1.2 國內對于細菌檢測的研究遠遠落后與西方國家，2004年衛生部在全國細菌大會專門討論了血液制品的細菌安全問題。同時，上海血液中心的高峰和成都血液中心的洪纓分別闡述了血液細菌污染問題的重要性和必要的措施[4-5]。2006年劉仁強等對3073例輸注血小板的細菌培養結果進行了分析，結果表明單采血小板的細菌陽性率為0.47%[6]。

2 常用檢測方法的介紹

2.1 細菌培養法

細菌培養法為細菌檢測的金標準，對于血液中的細菌培養同樣適用。宜昌市中心血站的高均翠對單采血小板進行了細菌培養實驗，分別采用了改良馬丁/硫乙醇酸鹽液體培養基和BacT/ALERT 3D 120全自動微生物檢測系統培養。1877份單采血小板均在采集后24h內取樣，充分混勻后擠壓到轉移帶10～15mL，熱合封閉。最終得出結論，硫乙醇酸鹽/改良馬丁法的陽性檢出率為0.1%，BacT/ALERT 3D 120系統陽性檢出率為0.6%，且BacT/ALERT 3D 120系統陽性結果檢出的時間早于硫乙醇酸鹽/改良馬丁法[7]。東莞市中心血站的秦艷蘭等對2390份單采血小板采用全自動微生物培養系統進行培養，發現其假陽性率高達83%，通常必須通過轉種培養才能確定[8]。由此可見，普通的細菌培養法時間長和檢出率低成為其不能再血站系統推廣的阻力。

2.2 核酸檢測法

隨著核酸檢測技術的不斷推廣，越來越多的血站建立了核酸檢測實驗室，這對于細菌檢測的核酸化提供了有利條件。2007年上海血液中心的馬敏等[9]就采用熒光定量PCR方法對金黃色葡糖球菌和大腸埃希氏桿菌的基因組DNA針對16s rRNA基因保守序列進行擴增，結果發現該方法對金黃色葡萄球菌的最低檢出量為0.3CFUs/PCR，對大腸埃希氏桿菌的最低檢出量為0.1 CFUs/PCR。

3 討 論

血小板制品細菌污染的情況要引起相關部門的重視，細菌的有效檢測也是減少血液制品輸注過程中產生一系列輸血反應及醫療糾紛的關鍵。國外的一些血站已經將細菌檢測作為常規項目開展，世界各地對于細菌污染問題的報道逐漸增多[10-12]，國內一些血液中心關于血小板細菌污染的調查研究表明國內同樣存在這種問題，這就提示我們血小板制品的細菌污染問題需要重視起來。隨著檢測技術的不斷提高，采用熒光定量PCR可以將血液中的低濃度的需氧菌和厭氧菌、死菌和活菌檢測出來，增加血液制品的安全系數。

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[2] Williamso L,Cohen H,Love E,et al.The serious hazards of transfusion (SHOT) initiative: the UK approach to haemovigelance[J].Vox Sang,2000,78(Suppl.2):291.

[3] Noel L,Debeir J,Cosson A.The French haemovigilance system[J]. Vox Sang,1998,74(Suppl.2):441.

[4] 高峰.必須重視血液細菌污染的預防和控制[J].中國輸血雜志.2004,17(4):221-222.

[5] 洪纓,孫啟鳳.血小板輸血中細菌污染及預防[J].中國輸血雜志. 2004,17(4):293-295.

[6] 劉仁強,劉赴平,葉柱江,等.3073例輸注血小板細菌培養結果[J].中國熱帶醫學,2006,6(5):868.

[7] 高均翠.全自動微生物檢測系統在單采血小板無菌試驗中的應用[J].中國輸血雜志,2011,24(2):147-148..

[8] 秦艷蘭,劉景春,劉赴平,等.全自動微生物培養系統在單采血小板細菌培養中假陽性結果的質量控制[J].中山大學學報,2009,30(4S):246-248.

[9] 馬敏,劉曉穎,徐忠,等.應用熒光定量PCR方法檢測血小板制品細菌污染[J].中國輸血雜志,2007,20(5):368-371.

[10] Bloch EM,VermeulenM,Murphy E.Blood Transfusion Safety in Africa: A Literature Review of Infectious Disease and Organizational Challenges[J].Transfus Med Rev,2012,26(2):164-180.

[11] DreierJ,StormerM,Kleesiek K.Real-Time Polymerase Chain Reaction in Transfusion Medicine: Applications for Detection of Bacterial Contamination in Blood Products[J].Transfus Med Rev,2007,21(3):237-254.

[12] Palavecino EL,Yomtovian RA, Jacobs MR.Bacterial contamination of platelets[J].Transfus Apheresis Sci,2010,42(1):71-82.

R446.5

A

1671-8194（2013）19-0091-02

*通訊作者：E-mail： zhangyan_hnxyzx@163.com