食管靜脈曲張動物模型研究進展

劉翔宇，魏 志，孫自勤，楊 鵬

(濟南軍區總醫院消化科，山東 濟南 250031)

食管靜脈曲張是由于多種原因造成的門靜脈壓力增高系列反應中的最后一步，隨著門靜脈壓力的不斷增高，曲張的靜脈從輕度向重度進展，最后導致破裂出血。食管靜脈曲張出血是上消化道出血的常見原因，是內科的危重癥，患者死亡率極高。建立食管靜脈曲張動物模型，對進一步治療研究至關重要。

目前，食管靜脈曲張動物模型的建立還不夠成熟，國外從1960年開始就報道成功制備了恒河猴的食管靜脈曲張模型［1］，國內近些年來對大型動物，特別是犬類的靜脈曲張模型的研究也逐漸增多。因為需要在短時間內使門靜脈壓力迅速升高，目前的造模多采用手術造模。現就目前食管靜脈曲張模型的建立方法做一綜述。

1 門靜脈部分結扎法

門靜脈部分結扎法(PVL)是一種廣泛用于研究門靜脈高壓病理生理的造模方法，也是制備食管靜脈曲張模型的常用方法。這種方法可以用于大鼠、小鼠與兔的造模。切開腹部皮膚后游離出一部分門靜脈血管主干，用一鈍性針頭和血管平行放置并緊貼血管表面，用3-0絲線將血管連同鈍性針頭一起結扎，最后抽出針頭，使門靜脈血管達到一定程度的縮窄。可以通過控制鈍性針頭的直徑使血管得到不同程度的縮窄。目前大鼠常用直徑0.889mm針頭，而兔則使用直徑1.270mm針頭。1980年Van Thiel［2］采用這種辦法來建立門脈高壓癥動物模型。Nishida［3］采用部分門靜脈結扎法，14天后發現大鼠的食管靜脈曲張突入腔內。1991年，Tanoue等［4］加以改進，采用門靜脈兩步結扎加左腎靜脈周圍血管離斷的方法，成功制備了大鼠食管靜脈曲張模型。2003年，尹朝暉等［5］在 Tanoue的基礎上加以改進，使用門靜脈兩步結扎加左腎上腺靜脈結扎，3周左右即可制備出大鼠的靜脈曲張模型。任崇仁等［6］重復了尹朝暉的方法，成功制備了 SD大鼠的食管靜脈曲張模型。

2 門－腔靜脈吻合法

門-腔靜脈吻合法其基本原理是行下腔靜脈-門靜脈吻合，并在吻合口上方進行腔靜脈結扎，使結扎處下方的血流完全注入門脈系統，從而造成門靜脈高壓。早在1976年，Saku等［7］提出用此方法來制作犬門靜脈高壓癥模型，但效果不理想。Dennis［8］在此基礎上又同時縮窄門靜脈主干:于吻合口上方的門靜脈內置入1個含有瓊脂環的鋼圈。瓊脂吸水后發生膨脹，從而使門靜脈逐步阻塞;并在吻合口的上方雙重扎閉腔靜脈，使其下方的血液可以完全注入門靜脈系統。此法3～6周后，食管胃底靜脈呈不同程度的曲張。秦云峰等［9］對上述方法做了改進，在下腔靜脈-門靜脈行側側吻合、下腔靜脈結扎及門靜脈部分縮窄的基礎上，采用介入學的方法，經導管用自制不銹鋼絲卷阻塞門脈肝端，造成了成活動物的食管下段黏膜下的曲張靜脈。而徐輝等［10］對實驗犬門靜脈結扎，使門靜脈管徑縮窄40% ～60%，同時在腎上水平截斷下腔靜脈，近端關閉，遠端與門靜脈行端側吻合，從而建立了相對穩定的門靜脈高壓食管靜脈曲張動物模型。方和平等［11］在門-腔吻合的同時將一可充式水囊縮窄環套于肝門部門靜脈，人為地控制門靜脈縮窄程度，最終阻斷門靜脈，使造模的成功率進一步提高。孫斌等［12］采用類似于 Dennis的方法，使用ameroid收縮器使門靜脈主干逐步閉塞從而制備犬的食管靜脈曲張。

3 膽總管結扎法

膽總管結扎法(CBDL)的具體操作方法是:通過復扎法截斷膽總管，第一道絲線結扎在肝管匯合處下方，第二道絲線則結扎在膽總管進入到胰管前方，兩道結扎線之間的膽總管予以切斷，以避免膽管再通，從而使膽汁排出受阻，肝內膽汁淤積。此方法4～6周左右即可形成膽汁性肝硬化，從而導致門靜脈高壓。王艷梅等［13］在膽總管結扎的基礎上用40%CCl40.2 mL/kg加入等量花生油，予腹腔內注射，每周1次，共16周，術后6～8周左右形成了穩定犬的食管靜脈曲張。

4 藥物誘導法

目前用于誘導動物形成肝硬化門脈高壓的藥物很多，CCl4法制備肝硬化門脈高壓動物模型是最經典最常用的方法，早在1936年Cameron等首次報道了應用CCl4制作肝硬化動物模型。硫代乙酰胺(TAA)、二甲基亞硝胺(DMNA)、乙醇等都可以用于肝硬化門脈高壓模型的制備。Nishida等［14］采用CCl4法制備鼠模型，在18周時成功制備了食管靜脈曲張模型。

在理論上，所有肝硬化、門靜脈高壓癥動物模型建立的方法均可以用于食管靜脈曲張模型。上述方法雖說可以成功制備出食管靜脈曲張的動物模型，但是均有一定的不足之處。門靜脈部分結扎法是目前建立動物食管靜脈曲張相對比較完善的方法，其成模率較高，可重復性強，操作相對簡單，對基礎研究有重要意義。但是其主要用于大鼠及小鼠這類小動物的模型建立，小動物術后死亡率也較高，且小動物食管細，不利于進行內鏡下治療的研究。門-腔靜脈吻合法是目前建立大型動脈食管靜脈曲張模型的常用方法，但單純行門-腔靜脈吻合效果差，常在手術中聯合其他方法將門靜脈縮窄甚至將門靜脈完全閉塞。這種辦法在大動物的造模中效果好，成模率高，造模周期短，可重復性強。但是相對門靜脈部分結扎法手術過程復雜，手術操作精細，要求高，常需要專業的外科醫生在無菌手術間來完成，使其開展具有一定的局限性。膽總管結扎法多用于制備膽汁淤積型肝硬化門脈高壓模型，但是不宜單純用于食管靜脈曲張的造模。可和其他的方法聯合使用來進行造模。藥物誘導法在理論上是制備食管靜脈曲張理想的方法，通過藥物先誘導動物行程肝硬化門脈高壓，在此基礎上逐漸形成食管靜脈曲張。在疾病的演變過程、病理基礎等和人類的肝硬化門脈高壓所致食管靜脈曲張基本類似。但由于肝硬化后并發食管靜脈曲張所需時間長，從而造模成功所需時間較手術方法長，且模型的成模率較低，故在研究食管靜脈曲張時較少使用，多是在建立肝硬化動物模型時發現其合并存在食管靜脈曲張。

理想的建立食管靜脈曲張動物模型的方法應該具備:與人類肝硬化門脈高壓所形成食管靜脈曲張具有相似的病理生理基礎;重復性好;造模動物的死亡率低，成模率高，周期短，造模方法可靠;方法簡單易行等特點。單純使用某一種造模方法都難以達到要求，復合多因素的造模方法，將手術造模與藥物誘導相結合應該是下一步研究的重點。

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