HPLC 法測定對乙酰氨基酚緩釋片中對乙酰氨基酚的含量

顧海霞

江蘇省啟東市中醫院藥劑科，江蘇 啟東 226200

對乙酰氨基酚緩釋片為上海強生制藥有限公司生產的治療感冒常用藥物，原標準中對乙酰氨基酚的含量測定為滴定法，操作費時費力，我們用高效液相法 (HPLC)測定本品內的對乙酰氨基酚的含量，取得良好效果。

1 儀器、試劑和樣品

高效液相色譜儀系統：所含儀器包括Waters 515高效液相色譜儀 (美國Waters公司制造);高壓泵 (型號為：P200);紫外檢測器 (型號為：Waters 2487);色譜柱 (型號為：Hanbang C18;規格為：200mm×4.6mm×5μm;B3500S-MT型超聲波清洗器 (上海必能信儀器有限公司);BP211D電子分析天平 (德國賽多利斯公司)，對乙酰氨基酚 (100018-200107)對照品由中國藥品生物制品檢定所提供。

2 方法與結果

2.1 色譜條件［1］色譜柱型號 Hanbang C18(規格為：200mm×4.6mm×5μm);流動相：甲醇-水 (體積比為40∶60);使用前以0.45μM微孔濾膜減壓過濾，檢測波長為UV210nm;流速為0.5ml/min，理論塔板數以對乙酰氨基酚峰值計算大于3000。

2.2 對照品溶液的制備 分別精密稱取對乙酰氨基酚對照品適量，加乙醇溶解并用水定量稀釋成每1ml中約含0.5 mg對乙酰氨基酚溶液，作為對照品溶液。

2.3 線性關系考察 精密稱取對乙酰氨基酚對照品適量，用乙醇配制成含對乙酰氨基酚1.25 mg/ml的對照品混合溶液。精密量取對照品溶液 2.0ml、5.0ml、10.0ml、20.0ml、25.0ml置25ml量瓶中，分別加水至刻度，搖勻。分別精密量取20 μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積為縱坐標，進樣質量為橫坐標，繪制標準曲線。對乙酰氨基酚回歸方程：Y=2E+05X-1E+08，相關系數γ=0.9995，對乙酰氨基酚在2.50～31.25 μg具有良好的線性關系。

2.4 精密度試驗 取對照品溶液，重復進樣6次，每次20 μl，對乙酰氨基酚峰面積的RSD為0.24%。表明儀器精密度良好。

2.5 穩定性試驗 取同一供試品溶液，間隔一定時間測定1次，共測24h，對乙酰氨基酚峰面積的RSD為0.35%(n=6)。實驗結果表明：供試品溶液在24 h內穩定。

2.6 重現性試驗 取同批號樣品5份，按供試品溶液的制備方法制備，測定，計算。結果對乙酰氨基酚的平均質量分數分別為99.5%，RSD分別為0.39%(n=5)。

2.7 加樣回收率試驗 取已知含量的對乙酰氨基酚緩釋片，研細，精密稱取適量 (約相當于對乙酰氨基酚0.06 g)，稱取 6份，分別加入對乙酰氨基酚 0.0472mg、0.0698mg、0.0935 mg，按供試品溶液制備方法制備，測定，計算回收率。結果對乙酰氨基酚的平均回收率分別為99.6%，RSD 分別為0.59%(n=6)。

2.8 供試品溶液的制備 取對乙酰氨基酚緩釋片，研細，精密稱取適量，約相當于對乙酰氨基酚0.125 g，置具塞三角瓶中，精密加入乙醇50ml，振搖使溶解，濾過，精密量取續濾液10ml，置50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.9 樣品測定 取對乙酰氨基酚緩釋片，按上述條件測定，結果對乙酰氨基酚質量分數在95.9% ～101.1%(n=6)。

3 討論

3.1 對乙酰氨基酚緩釋片原檢測標準中，對乙酰氨基酚的檢測方法是用亞硝酸鈉滴定液進行重氮化滴定，操作過程較為繁瑣，現改為高效液相法，具有快速、穩定、重現性好的特點。

3.2 取同一批號的樣品，用滴定法和HPLC法分別對對乙酰氨基酚含量進行測定，結果分別為 99.5%、99.1%，RSD分別為1.16%、0.37%(n=6)，測定結果顯示，兩種方法結果幾乎一致。

［1］靳建中，王占林.高效液相法測定氨酚啡啉片中對乙酰氨基酚、鹽酸偽麻黃堿和咖啡因的含量［J］.藥物分析雜志，1997，17(6)：26.