對2010年版《中國藥典》（二部）中鹽酸普魯卡因注射液鑒別試驗（1）的探討

石天松（南寧食品藥品檢驗所，南寧 530001）

鹽酸普魯卡因是一種局部麻醉藥，是國內外臨床上廣泛應用的基本藥物之一，國內于1957年開始生產。《中國藥典》（以下簡稱藥典）自1953年版以來，歷版均有收載[1-5]，其化學名為4-氨基苯甲酸-2-（二乙氨基）乙酯鹽酸鹽，因其含有芳伯胺基及鹽酸根離子，所以歷版藥典均對這2個基團（離子）進行鑒別，作為驗證鹽酸普魯卡因存在的依據之一。鹽酸普魯卡因注射液作為鹽酸普魯卡因的應用劑型之一，也須對這2個基團（離子）進行鑒別。筆者在檢驗中發現，由于鹽酸普魯卡因注射液中這2項鑒別試驗是轉述于鹽酸普魯卡因，后者又轉述自藥典附錄Ⅲ中的“一般鑒別試驗”中“芳香第一胺與氯化物的鑒別試驗”，而品種標準與共性標準對物態的描述不一致，導致鑒別結果不一致、不明確，筆者對此分析如下。

1 材料

鹽酸普魯卡因注射液（天津藥業集團新鄭股份有限公司，批號：1011222、1012252；鄭州羚銳制藥股份有限公司，批號：1003272；規格均為：40 mg∶2 ml）。

稀硝酸、硝酸銀試液、氨試液、二氧化錳、硫酸、碘化鉀淀粉試紙、純化水、稀鹽酸、0.1 mol/L亞硝酸鈉溶液、堿性β-萘酚試液等試藥純度均符合要求（分析純），試液、溶液均按2010年版藥典（二部）所規定的方法制備并在有效期內使用。

2 方法與結果

2.1 品種方法

2.1.1 鹽酸普魯卡因注射液[5]。鑒別：（1）取本品，照鹽酸普魯卡因項下的鑒別（3）、（4）項試驗，顯相同的反應。

2.1.2 鹽酸普魯卡因[5]。鑒別：（3）本品顯氯化物的鑒別反應（附錄Ⅲ）；（4）本品顯芳香第一胺類的鑒別反應（附錄Ⅲ）。

2.1.3 歷版藥典方法。除2005年版藥典與上述描述一致外，之前的版本均描述為鹽酸普魯卡因項下（1）、（3）鑒別試驗。經查證，這2項也分別為氯化物、芳香第一胺類的鑒別反應，故各版藥典品種方法對此要求是一致的。

2.2 共性方法

2.2.1 氯化物的鑒別試驗（附錄Ⅲ）[2-5]。（1）取供試品溶液，加稀硝酸使成酸性后，滴加硝酸銀試液，即生成白色凝乳狀沉淀；分離，沉淀加氨試液即溶解，再加稀硝酸酸化后，沉淀復生成。如供試品為生物堿或其他有機堿的鹽酸鹽，須先加氨試液使成堿性，將析出的沉淀濾過除去，取濾液進行試驗。（2）取供試品少量，置于試管中，加等量的二氧化錳，混勻，加硫酸濕潤，緩緩加熱，即發生氯氣，能使用水濕潤的碘化鉀淀粉試紙顯藍色。

2.2.2 芳香第一胺類的鑒別試驗（附錄Ⅲ）[2-5]。取供試品約50 mg，加稀鹽酸1 ml，必要時緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1 mol/L亞硝酸鈉溶液數滴，滴加堿性β-萘酚試液數滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。

2.3 實際操作結果分析

2.3.1 氯化物鑒別試驗。（1）銀鹽沉淀試驗。取上述3批樣品，按照藥典附錄Ⅲ的方法（從結構判定為有機堿的鹽酸鹽）進行試驗（即：先加氨試液使成堿性，將析出的沉淀濾過除去，取濾液進行試驗），其試驗現象與結果均與附錄Ⅲ的描述不一致（實際情況為：加入氨試液后，開始迅速生成白色沉淀，振搖時，沉淀又慢慢溶解并生成油狀物，無法濾除本應除去的普魯卡因沉淀；在后續操作中加氨試液時，氯化銀溶解卻又析出普魯卡因沉淀，使沉淀與溶解的現象不能明顯區分），致使檢驗者無法作出正確判斷。經試驗，如按普通氯化物的方法操作（即：不預先加入氨試液而直接將供試品溶液加稀硝酸酸化）則可以很好地對氯化物進行驗證，反應現象與附錄Ⅲ所描述的一致。（2）氯氣生成試驗。對比上述標準可知，鹽酸普魯卡因注射液是取“本品”（即：直接取鹽酸普魯卡因注射液）而附錄Ⅲ是取“供試品”進行氯氣生成試驗，兩者的規定不具等同性。為驗證2種方法的可行性，筆者分別對上述3批樣品按“本品”及“2.1.2”項鑒別（3）項下的殘渣（“取本品約相當于鹽酸普魯卡因80 mg，水浴蒸干……”）進行試驗，結果直接法未能生成氯氣，未使用水濕潤的碘化鉀淀粉試紙顯藍色；而殘渣法的反應現象非常明顯，同時可以聞到氯氣特有的刺激性氣味。2.3.2 芳香第一胺類鑒別試驗。取上述3批樣品進行該試驗，均生成猩紅色沉淀，而共性標準（附錄Ⅲ）的描述為“視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀”，這種供試品與顏色不是一一對應關系的描述可能導致錯誤的結論（對一個首次做該品種此項鑒別試驗的檢驗者而言，由于沒有借鑒，如果試驗結果是生成橙黃色沉淀或紅色沉淀，依據標準的字面表述，都可以判斷為呈正反應、符合規定，顯然這是錯誤的）。

3 討論

3.1 品種特殊性

從鹽酸普魯卡因鑒別（1）[5]得知，其在堿性溶液中于加熱的條件下是可以發生反應而溶解的。而本試驗證實，鹽酸普魯卡因注射液在室溫的條件下（10～30℃）也可以溶于以氨試液調節的堿性溶液中，所以不能通過預先調節溶液為堿性除去普魯卡因。若按一般情況處理則不會發生上述問題，因為對鹽酸普魯卡因而言，加稀硝酸使成酸性后，普魯卡因在此環境中是以鹽態溶于體系中的，滴加硝酸銀試液所生成白色凝乳狀沉淀正是氯化銀；分離時，硝酸普魯卡因一起隨溶液被棄去，往后的操作不必擔心被其干擾。建議將附錄Ⅲ中的表述“……須先加氨試液使成堿性……”修改為“……必要時先加氨試液使成堿性……”，檢驗者則優先按一般方法進行試驗，若有生物堿或有機堿干擾再考慮加氨試液將其除去，這樣的表述才沒有歧義，并可兼顧一些特殊品種；也可以將該鑒別方法在品種項下予以詳述。

3.2 物態兼顧性

藥典附錄Ⅲ中使用“供試品”及“供試品溶液”這2個修飾詞是有區別的：“供試品”是指某一樣品物質，一般是固態的；而“供試品溶液”一般是指某一樣品物質的水溶液（未指明何種溶劑時），其是液態的。如果標準要求以“供試品”和（或）“供試品溶液”進行不同的鑒別試驗，檢驗者必須嚴格按照規定操作，否則可能無法作出正確鑒別。現根據氧化還原反應中的有關原理及能斯特方程式[6]對此進行分析，在標準狀態（20℃，各物質的量均為1 mol/L）下，MnO2+4H++2e→Mn2++2H2O的E0（V）為1.208，而Cl2+2e→2Cl－的E0（V）為1.358 3，此時是不能生成氯氣的。為逆轉上述反應從而生成氯氣，該反應體系必須ε＝1.208+（0.059 2/2）lg（[MnO2][H+]4/[Mn2+]）－1.358 3－（0.059 2/2）lg（PCl2/[Cl－]2）＞0。假設取本品1 ml、二氧化錳1 g、硫酸1 ml進行試驗，則[Cl－]約為0.04 mol/L（注射液規格：40 mg∶2 ml，分子量為272.77）[5]；[MnO2]/[Mn2+]、PCl2為一定值。此時以“殘渣”作反應物的[H+]、[Cl－]為上述反應體系中的2倍、50倍，影響分別為24＝16倍、502＝2 500倍，即：反應體系有水時，不利于氯氣的生成，當[H+]、[Cl－]小到一定數值（即水越多）時，ε≤0，則將不能生成氯氣；當反應體系的水很少或基本無水時，[MnO2]/[Mn2+]及PCl2不變，[H+]、[Cl－]均很大，則越有利于氯氣的生成。所以，為確保反應的順利進行并體現重現性，按藥典附錄Ⅲ的要求，以“供試品（殘渣）”進行試驗是最妥的，但鹽酸普魯卡因注射液標準的表述過于節省篇幅導致描述過于簡單，忽略了物態要求，造成了顧此失彼的局面。應將與共性規定不同的標準部分在品種中表述，相同部分再標明“按附錄Ⅲ……”即可消除歧義。

3.3 結果唯一性

芳香第一胺類鑒別試驗是一大類物質的鑒別試驗，作為這類物質的共性描述，兼顧了所有物質的反應現象，所以描述為“視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀”，這是一個較寬的顏色區域描述。然而，對于具體品種來說，其反應后生成是唯一的、固定的顏色，其與共性描述不是一一對應關系，必須在具體品種中標明，否則則失去鑒別意義。建議所有屬于芳香第一胺類的藥物都應在具體品種中明確規定其生成的顏色，方可消除誤判。

3.4 項目延續性

2010年版藥典中，從段落及序號編排來看，鹽酸普魯卡因注射液鑒別試驗有3項，而從內容上看應有4項，其中鑒別試驗（1）包含了鹽酸普魯卡因鑒別試驗的（3）、（4）共2項。這樣一來，不但造成與鹽酸普魯卡因鑒別試驗的項目數量與順序不一致，還導致檢驗者對項目把握的偏差、檢驗機構出具檢驗項目數的困惑性和隨意性，甚至可能引起不必要的爭議或法律糾紛，這種過于自由的裁決度相當于將標準缺陷所帶來的風險轉移到檢驗者及檢驗機構身上。筆者認為，將現行版標準中的（3）、（4）項分別修改為（1）、（2）項，而將（1）項拆分為與鹽酸普魯卡因（3）、（4）項鑒別試驗一致的內容表述即能消除由此所產生的所有問題。鹽酸普魯卡因注射液鑒別試驗（1）之所以出現上述問題，是由于標準2次轉述后出現項目合并的情況，這種情況僅僅是由描述不當引起而不是原文的含義，是過度節省篇幅所產生的。這種節省篇幅思路引發的標準缺陷應引起相關部門足夠重視，應注意品種標準與共性標準之間的連貫性與涵接度，使所引用的不同標準之間具有很好的邏輯性、流暢性。

3.5 修改建議

綜上所述，筆者建議將鹽酸普魯卡因注射液鑒別試驗（1）修改如下：（3）取本品，加稀硝酸酸化后，應顯氧化物的鑒別反應（1）；取本品2 ml蒸干，殘渣應顯氧化物的鑒別反應（2）。（4）取本品，按芳香第一胺類的鑒別反應（附錄Ⅲ）進行試驗，應產生猩紅色沉淀。

[1]衛生部藥典委員會.中華人民共和國藥典：藥典注釋：二部[S].1990年版.北京：化學工業出版社，1990：603-605.

[2]衛生部藥典委員會.中華人民共和國藥典：二部[S].1995年版.北京：化學工業出版社，1995：713、附錄14-16.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：二部[S].2000年版.北京：化學工業出版社，2000：685、附錄23-25.

[4]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：二部[S].2005年版.北京：化學工業出版社，2005：580、附錄20-21.

[5]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：二部[S].2010年版.北京：中國醫藥科技出版社，2010：793-794、附錄20-22.

[6]章琦.無機化學[M].北京：人民衛生出版社，2001：160-170.