中藥有效提取物防治腎纖維化的機制研究*

周萍 李均

腎纖維化包括腎小球硬化和腎間質纖維化，以過量細胞外基質在腎間質積聚、腎臟組織結構破壞及功能喪失為主要特征，是多種慢性腎臟疾病最終導致腎功能衰竭的主要病理改變[1]。腎纖維化發生涉及炎癥反應、腎臟固有細胞及免疫細胞凋亡、氧化應激反應、促/抑纖維化細胞因子失衡等多個環節。近年來，廣大研究者發現中藥有效提取物可以延緩腎纖維化的發展，這將為中醫藥在防治腎纖維化方面開辟廣闊的前景，現將有關研究綜述如下。

1 大黃酸、大黃素

1.1 大黃酸 大黃酸（rhein，4，5-dihydroxyanthraquinone）為蒽醌衍生物的單體，主要分布于蓼科植物中，是中藥大黃分離提純的主要有效成分之一，具有抗炎、抗腫瘤、抗纖維化、利尿、免疫抑制等多種藥理活性。動物實驗研究表明該成分對UUO模型，STZ誘導的糖尿病大鼠模型，慢性腎移植腎病（CAN）大鼠模型均有顯著的防治作用，其機制主要有以下幾個方面：（1）減少UUO模型大鼠腎臟TGF-β1和bFGF的表達，阻止TGF-β信號傳導，從而抑制腎纖維化發展[2]。（2）顯著下調糖尿病大鼠腎小管上皮細胞內肌成纖維細胞標志蛋白α2SMA和間質細胞標志蛋白Vimentin的表達，阻抑腎小管上皮細胞表型轉化[3]。（3）大黃酸能改善CAN大鼠腎功能及腎組織慢性病理改變，降低CTGF表達，減輕腎臟纖維化[4]。（4）降低糖尿病大鼠MMP-9的高表達，糾正失衡的MMP/TIMP1比值，阻抑EMT，減輕糖尿病腎病（DN）腎間質纖維化[5]。同時體外研究發現，大黃酸可以抑制高糖環境下HK-2細胞向MyoF轉分化，阻抑TEMT，并推斷這可能是大黃酸防治DN的又一作用機制[6]。

1.2 大黃素 大黃素為大黃的另一主要有效成分，其延緩腎臟纖維化的機制主要與其抗增殖，抑制轉分化，抗氧化，清除自由基作用有關[7]。

2 川芎嗪

川芎嗪是從活血化瘀中藥川芎的根莖中提取的生物堿單體，化學結構為四甲基吡嗪（TMP），川芎嗪具有顯著抗腎間質纖維化的作用，其機制與降低腎組織中促纖維化細胞因子TGF1含量，同時恢復Smad 逆向調控因子Smad7和SnoN蛋白表達水平有關[8]。李健芝觀察川芎嗪可以降低腎間質纖維化大鼠腎組織腎小管中MMP-9、TIMP-1的表達，并且療效與纈沙坦治療組相當[9]。體外研究發現，川芎嗪能抑制AGE-BSA（糖基化終末產物）誘導的HK-2細胞FN、ColⅠα1的合成，進而抑制腎小管上皮細胞分泌ECM[10]。川芎嗪并且能呈劑量依賴性地減少高糖誘導下HK-2中α-SMA mRNA的表達，并逐漸恢復E-鈣黏素mRNA的表達，進而阻斷高糖誘導的腎小管上皮細胞轉分化[11]。

3 丹參總酚酸、丹參酚酸B、丹參酮

3.1 丹參總酚酸、丹參酚酸B 丹參中水溶性成分主要有丹參素、迷迭香酸、原兒茶醛、咖啡酸、紫草酸、丹酚酸A、B等，總稱為丹參總酚酸，其中丹酚酸B含量最高，并且為主要的活性成分。丹參總酚酸具有明顯的抗血栓形成、溶纖和抗脂質過氧化的作用，動物實驗研究發現，丹參總酚酸、丹參酚酸B對單側輸尿管梗阻（uuo）大鼠、馬兜鈴酸腎損害和大鼠HgCl2中毒大鼠腎間質纖維化具有顯著的防治作用。其機制為：（1）降低大鼠尿NAG和β-MG水平，減少Ⅲ型膠原、纖維連接蛋白、a-平滑肌肌動蛋白在腎組織的表達[12]。（2）抑制α2SMA蛋白表達，維持上皮細胞的表型[13]。（3）增強MMP的活性和降低TIMP21，PAI21mRNA的活性從而拮抗ITGβ21mRNA的致纖維作用[14]。

3.2 丹參酮 丹參中脂溶性成分是以丹參酮為代表的醌類化合物，其中丹參酮Ⅱ-A磺酸鈉在腎纖維化中研究最多，主要以體外研究居多。

4 姜黃素

姜黃素是從姜科植物姜黃中提取的一種植物多酚， 也是姜黃發揮藥理作用最重要的活性成分。姜黃素對多種原因所致的腎損害、糖尿病大鼠腎臟均具有保護作用。其機制是：（1）干預UUO大鼠TGF-β/Smads信號通路中多個位點，阻抑腎小管上皮細胞EMT的發生[15]。（2）降低腎組織內Ang-Ⅱ、ET-1的表達，改善腎組織的缺血、缺氧狀態[16]。（3）下調腎組織內а-SMA和波形Vimentin的蛋白表達[17]。

5 三七總皂苷

三七總皂苷為中藥三七的主要活性成分，具有抗凝、抑制血小板聚集、改善循環、降低血脂和抗纖維化等功能。其改善腎纖維化機制主要與抑制細胞轉分化及細胞外基質分泌，降低細胞因子血小板源性生長因子（PDGF）和IL22的水平有關[18]。

6 水飛薊素

水飛薊素是菊科草本植物水飛薊的活性成分，多用于臨床肝纖維化的治療，近年來的研究發現水飛薊對延緩腎間質纖維化其同樣有效，其機制：（1）減少小管間質Ⅲ型膠原沉積[19]。（2）下調內皮素21（ET21）及內皮素A受（ETaR）表達而抑制纖維化的發生[20]。（3）下調腎組織核轉錄因子2κB（NF2κB）和細胞間黏附分子21（ICAM21）表達，進而減少炎性細胞因子、趨化因子和促纖維化因子的產生，減少ECM的合成[21]。

7 銀杏葉提取物

銀杏葉提取物（EGb）是從銀杏葉中提取的天然活性物質，其有效成分為黃酮甙及銀杏內酯。銀杏葉提取物片能降低腎間質纖維化大鼠的血清肌酐、尿素氮，減少24 h MTP，具有腎功能保護作用。由于其具有清除自由基，抑制氧化應激反應，因此其在防治DN方面有良好的應用前景[22]。

綜上所述，中藥有效提取物防治腎纖維化的實驗研究，主要從動物、組織、細胞等層面展開，多選擇腎纖維化的關鍵途徑TGF-β/Smads信號途徑為切入點，主要涉及關鍵致纖因子TGF-β1、а-SMA，波形蛋（Vimentin），結締組織生長因子（CTGF），細胞外基質Ⅳ型膠原、纖維連接蛋白（FN）。但選擇其他途徑如Wnt/β-catenin、Rho-ROCK等傳導通路進行中藥有效提取物防治腎纖維化的機制研究較少，在TGF-β/Smads信號途徑中得到證實的結果，是否在其他的信號途徑中起作用，除了對致纖因子的研究，其對內源性抗纖維化因子的影響如何，值得進一步的研究。

在藥物成分、劑型、劑量方面，研究主要涉及藥物主要成分的含藥血清和注射液，對藥物最佳劑量，量效關系和時效關系的研究但相對較少。在結合中醫機理方面，大多數研究都是針對單味中藥的有效成分進行，其作用機制主要偏向補氣或活血化瘀，而慢性腎臟病的后期腎纖維化階段，慢性腎臟病病機多屬氣虛和血瘀同時并見，因此積極開展聯合多種有效單體或者不同劑量有效單體配伍干預慢性腎臟病腎纖維化的研究，對揭示中醫藥干預腎纖維化發生發展的內在機制，發揮中醫藥在慢性腎臟病中的特色治療具有廣泛的應用前景。

[1]Michael Zeisberg，Eric G，Neilson.Mechanisms of Tubulointerstitial Fibrosis[J].J Am Soc Nephrol，2010，21（11）：1819-1834.

[2]黃娟，陳文莉，朱紅.大黃酸對輸尿管梗阻大鼠腎組織纖維化的保護制[J].中國藥師，2009，12（11）：1529-1531.

[3]劉倫志，寧建平.大黃酸對糖尿病大鼠腎小管上皮細胞表型轉化的影響[J].內科急危重癥雜志，2007，13（1）：33-35.

[4]殷立平，蘇健，張鑫，等.大黃酸對慢性移植腎腎病大鼠轉化生長因子β1、結締組織生長因子和纖維連接蛋白的影響[J].腎臟病與透析腎移植雜志，2011，20（4）：342-351.

[5]李文星.大黃酸對糖尿病大鼠腎小管上皮細胞轉分化與MMP-9/TIMP-1的影響[D].碩士學位論文，2008：1-46.

[6]陸小蘭.大黃酸對高糖環境下腎小管上皮細胞轉分化的影響[D].碩士學位論文，2008：1-43.

[7]金國華，房向東.大黃素在延緩腎臟纖維化過程中的作用[J].山東醫藥，2011，51（32）：114-115.

[8]陸敏，周娟，王飛，等.川芎嗪對腎間質纖維化模型大鼠Smad7和SnoN蛋白表達的影響[J].中國中藥雜志，2009，34（1）：84-88.

[9]李健芝，庾江東，劉玉明，等.川芎嗪對腎間質纖維化大鼠中MMP-9、TIMP-1表達的影響[J].醫學理論與實踐，2012，25（3）：249-251.

[10]許艷芳，林久茂，江德文，等.川芎嗪對糖基化終末產物誘腎小管上皮細胞外基質表達的影響[J].福建中醫學院學報，2009，19（1）：20-23.

[11]吳小南，吳異蘭，陳潔.川芎嗪對高糖誘導的人腎小管上皮細胞轉分化的影響[J].中國全科醫學，2009，12（5）：843-846.

[12]胡曉穎，何立群，王云滿，等.丹酚酸B干預慢性馬兜鈴酸腎病大鼠療效研究[J].陜西中醫，2008，29（1）：116-118.

[13]陸海英，周娟，陸敏.丹參酚酸B對實驗性腎間質纖維化大鼠的保護作用及其機制[J].中藥材，2010，33（11）：1755-1759.

[14]何立群，黃迪，王云滿.丹酚酸B改善馬兜鈴酸腎病作用機制的研究[J].西安交通大學學報（醫學版），2010，31（6）：766-769.

[15]李彧，陳朝青，李亞東.姜黃素對單側輸尿管梗阻大鼠腎小管上皮細胞分化及TGF-β/Smads信號轉導途徑的影響[J].中國中西醫結合雜志，2011，31（9）：1224-1228.

[16]王巖，李建華，梁昭紅.姜黃素對單側輸尿管梗阻大鼠腎臟表達血管緊張素Ⅱ、內皮素-1的影響[J].中國現代醫學雜志，2008，18（8）：1052-1059.

[17]趙愛青，張曉明，侯恒.姜黃素對單側輸尿管梗阻大鼠腎小管上皮細胞轉分化影響的研究[J].中國中西醫結合急救雜志，2007，14（6）：348-351.

[18]謝紀青，金建生，付次雙.三七總皂苷對慢性腎缺血腎間質纖維化的防治作用[J].福建醫科大學學報，2010，44（1）：104-105.

[19]趙海霞，韓子明，趙德安.水飛薊素對大鼠腎小管間質纖維化的影響[J].中國中西醫結合腎病雜志，2008，9（2）：145-146.

[20]韓玫瑰，郭勇，韓子明.水飛薊素對大鼠腎小管間質纖維化的影響及其作用機制探討[J].細胞與分子免疫學雜志，2011，27（3）：339-341.

[21]錢茜，韓子明，王鵬，等.水飛薊素對腎小管間質纖維化大鼠核轉錄因子2κB和細胞間黏附分子21表達的影響[J].實用兒科臨床雜志，2009，24（18）：1447-1449.

[22]李雪竹，嚴海東，余晨.銀杏葉提取物對腎間質成纖維細胞中糖基化終產物誘導的血管生成素及其受體表達的影響[J].腎臟病與透析腎移植雜志，2010，19（6）：534-551.