冷凝集素對血型鑒定和交叉配血的干擾及處理方法

王佳

冷凝集素對血型鑒定和交叉配血的干擾及處理方法

王佳

目的通過研究進而分析出高效價冷凝集素對血型鑒定和交叉配血試驗的影響。方法將紅細胞或二巰基乙醇(2-me)放入37℃～45℃的生理鹽水反復洗滌，達到對紅細胞的處理目的，在進行正反定型及交叉配血前需對此前的紅細胞與血清做吸收放散處理。結果處理以后的標本正反定型及交叉配血未出現異常反應。結論含高效價冷凝集素標本經過不同方法的檢驗處理后再進行正方定型結果未出現異常反應；經過輸血后，不良反應情況也未在交叉配血的患者上出現。

冷凝集素；血型鑒定；交叉配血

高效價冷凝集素大部分情況下是源于病理因素，一般有16以上的效價，高達32℃的作用溫度。高效價冷凝集素在給ABO血型和Rh血型鑒定、抗體鑒定及交叉配血帶來困難的同時還將具有臨床意義的同種異型抗體的存在事實掩蓋。其中18例存在高效價冷凝集素的標本經過多種方法檢測后，血型鑒定和交叉配血的難點被解開，貧血癥患者輸血以后癥狀緩解，病情有所好轉。

1 資料與方法

1.1一般資料 18例患者冷凝集素出現增高現象，其中15例為男性，3例為女性，年齡跨度為10～90歲。其中，14例為腎移植患者，3例患有感染性心內膜炎，1例患有慢性肺心病。效價跨度為521～4096。

1.2試劑 二巰基乙醇應用液(2-me)、抗人球蛋白試劑、譜紅細胞試劑、抗體篩查試劑、ABO反定型細胞、ABO血型鑒定試劑和Rh血型鑒定試劑。

1.3方法 對紅細胞進行處理將紅細胞從抗凝管里取出，在37℃的水中將自身凝集的紅細胞進行30 min的水浴處理；或放置到37℃的生理鹽水中進行洗滌，3遍后，若洗滌后的紅細胞經過檢測未出現凝集現象，就可進行ABO正定型、Rh血型鑒定、直接抗人球蛋白試驗、自身吸收試驗，最后確認無異常現象就可交叉配血;若出現凝集現象，則將標本重復上述操作，檢測無凝集才可往下進行。

血清處理需要用到二巰基乙醇，將血清從干燥管中取出來，將與血清等量的二巰基乙醇混合后，放置在37℃中進行水浴，40 min取出標本后，進行正反定型、抗體篩查和交叉配血的后續工作。將處理后無凝集的患者紅細胞與等量自身血清混合，放到4℃的冰箱內進行冷藏吸收處理30 min，可多次重吸收冷凝集較強的血清標本，再進行ABO反定型、抗體篩查和交叉配血的后續工作。

血清學試驗因血型正、反定型不一致的標本未進行檢測，經過處理后ABO正反定型一致、RhD鑒定呈陽性。

測定冷凝集素效價未稀釋的患者血清與O型成人紅細胞發生凝集后做效價滴定測驗，并記錄數據，以此判定冷凝集素所具有的特異性。

2 結果

在23℃環境下進行的ABO血型鑒定結果正定型都為AB型的患者出現18例，反定型為O型，自身對照出現凝集現象。處理后標本或水浴中血型正反定型結果及用二巰基乙醇處理后的血標本正反定型的結果：O型患者正反定型均為O型的患者有14例，B型患者正反定型均為B型的為3例，A型患者正反定型為A型為1例。血型物質檢測為分泌型有18例，經過血型物質檢測含有H物質的正定型為O型的患者有14例，正定型均含有B、H物質的為B型，正定型均含有A、H物質的為A型。通過直接抗人球蛋白試驗檢測的為陽性，抗C3 d也均為陽性，并且冷凝集素存在抗-I特異性。本次研究的18例患者血液內含有的冷凝集素去除后經交叉配血都未出現不合現象，輸血后，溶血現象也未發生。

3 討論

生理性冷凝集素是當效價不高于16的冷凝集素，在室溫和37℃進行血型血清學試驗基本不受到影響的一種冷凝集素;冷凝集素處于病理狀態時，效價會出現升高現象，這是由某些病理因素所致，而出現ABO和Rh血型鑒定、抗體效價和交叉配血困難情況是因為冷凝集素效價和反應溫度較高。本調查中18例患者冷凝集素效價都不低于16，效價跨度為521～4096，在進行實驗時，處于室溫環境下血型鑒定正反定型結果出現不一致，而經37℃水浴或經洗滌處理后正反定型結果則一致。所以對標本進行37℃水浴或37℃生理鹽水洗滌3次的處理后，才可懷疑是由冷凝集素引起血型鑒定時正反定型不符。

冷凝集素具有以下特點：①大多數是IgM型抗體。少數是IgG型抗體，后者又稱為雙相抗體。②反應的最適溫度是4℃，在20℃以下時可以凝集自己的紅血球，加溫至30～37℃又會和紅血球分離，如再遇補體即會發生溶血。③它與補體的親和力較大，在冷處和溫處都可與補體結合。在冷處與補體結合后，當溫度上升至30～32℃以上時，或環境中呈微酸性時(pH6.5-7.0)，即發生溶血，所以在患者血管內可發生溶血，出現血紅蛋白尿。④大多是不完全抗體，少數是完全抗體。⑤這種抗體與紅血球及補體結合后，容易從紅血球上彌散而只留補體在紅血球表面上。

本文18例受冷凝集素影響的ABO正反定型病例，通過二巰基乙醇滅活后使IgM抗體聚合力喪失，從而使正反定型結果一致。有資料顯示，血清中的抗-A、抗-B、抗-AB抗體大多數是IgM性質的抗體，也有IgG成分，在正常獻血員中，IgG1和IgG2多于IgG3和IgG4，因此IgG成分的反定型通過間接抗人球蛋白試驗會得出與正定型一致的結論。本文與報道相似，故經二巰基乙醇處理后的18例患者血清因IgM未得到徹底清除而直接離心出存在A、B、O、AB血型，而IgG效價的評定未受影響，所以反定型試驗與正定型試驗得出的結論一致。

若血型鑒定和交叉配血因高效價冷凝集素受到影響，最好用上述幾種方法配合應用，從而使輸血順利、安全進行。

[1] 林國連,詹奕榮,劉紅杏,等.冷凝集素對血型鑒定和交叉配血的影響相關研究分析.河北醫學,2010,03:302-304.

[2] 吳松遠,魏淑英,孔祥騫.冷凝集素對血型鑒定的影響與處理.實用醫技雜志,2010,12:1143-1144.

[3] 王華.冷凝集素在血型鑒定和交叉配血不合中的鑒別.實用心腦肺血管病雜志,2011,10:1758.

Coldagglutinintobloodtypeidentificationandcrossmatchinginterferenceandprocessingmethod

WANGJia.

Departmentofbloodtransfusion,The264HospitalofthePLA,Taiyuan,30001,China

ObjectiveThrough the research and analysis of the high price of cold agglutinin blood typing and cross matching test influence.MethodsThe red blood cells or 2 mercaptoethanol (2-me) in 37 ℃～45 ℃ of physiological saline repeated washing,treatment was on red blood cells,In the positive and negative Settings and cross matching need previous erythroid and serum absorbed radiation therapy.ResultsThe experimental results didn’t appear abnormal reaction.ConclusionWith a high price cold agglutinin specimen after different methods of inspection of the reentry after processing square finalize the design results are not abnormal reaction,a blood transfusion after,adverse reaction was not appear on the patient.

Cold agglutinin；Blood grouping；Cross matching

030001 太原，解放軍二六四醫院