冷沉淀制備技術在血液成分制備中的臨床應用效果淺析

王萬仲 張雪 王艷

冷沉淀是一種白色絮狀物血液成分，廣泛應用于血友病患者、低血容量性休克并發(fā)DIC和先天性或獲得性凝血因子VIII缺乏癥和纖維蛋白原缺乏癥的治療中。是由新鮮冰凍血漿在2℃～6℃條件下制備而成，主成分主要含有凝血因子Ⅷ、纖維蛋白原和血管性血友病因子、纖維結合蛋白、凝血因ⅹIII等。隨著醫(yī)療技術的不斷發(fā)展，冷沉淀制備技術在臨床應用中表現(xiàn)出越來越重要的作用。冷沉淀在零下30℃以下冰凍保存，從采血之日起有效期為一年，筆者對我州近年來的冷沉淀制備技術與冷沉淀的臨床應用效果分析如下。

1 冷沉淀的制備與質量

1.1 冷沉淀的制備 選取街頭采集的全血300～400 ml，在6～8 h內(nèi)分離出新鮮冰凍血漿，在零下50℃平板速凍機中冰凍成塊狀，再儲存于零下30℃的冰箱中保存。在制備冷沉淀時，將保存的新鮮冰凍血漿放置在4℃的環(huán)境下分離出白色絮狀物即為冷沉淀。其制備方法主要有改良快速融化離心法和水浴虹吸法兩種方法。改良快速融化離心法是把新鮮冰凍血漿放入到4℃的水浴箱內(nèi)，等到血漿融化超過二分之一后將還沒有融化的血漿捏碎成碎冰塊，加速血漿的溶解，約1 h后，將還存有少許的血漿冰塊取出，在零度、離心力3000 g的條件下離心10 min。在100級凈化臺上分離出上層血漿，剩下的下層血漿和白色沉淀物就是冷沉淀。水浴虹吸法是把新鮮冰凍血漿放在4℃的恒溫循環(huán)水浴箱中，將另外一個與新鮮冰凍血漿相連通的空轉移袋懸空在水溶箱外并低于新鮮冰凍血漿袋的高度，兩個袋子之間產(chǎn)生一定的落差，融化的血漿通過虹吸原理緩慢流入空袋中，剩余的約40～50 ml血漿塊就是冷沉淀[1]。整個過程要檢測水的溫度并進行調節(jié)。兩種方法在制備的時間上相差不大。改良快速融化法雖然需要離心10 min，但是在血漿融化的過程中加入了捏碎步驟，減少了血漿融化的時間。但改良快速融化離心法在整個操作過程中，受到人為影響較多，操作過程也比較復雜。而水浴虹吸法受人為因素影響較小，所需的儀器也比較簡單。所以，近來水浴虹吸法在冷沉淀制備中越來越受歡迎。

1.2 冷沉淀的質量 冷沉淀的質量主要是受到溫度和時間的影響，在制備的過程中需要控制室溫、掌握時間。有實驗證明，經(jīng)過亞甲藍殺除病毒的血漿制備的冷沉淀和原血漿制備的冷對比，發(fā)現(xiàn)FVIII的活性下降了28%，而血管性血友病引子的活性下降了12%，纖維蛋白原的濃度也下降了45%[2]。另一個實驗是在4℃的環(huán)境下保存18 h的血液的FVIII和在6℃下保存了8 h的相比下降了25%[3]，這也說明冷沉淀制備受到溫度的影響。新鮮冰凍血漿一旦融化，F(xiàn)VIII的活性在12 h之內(nèi)下降了42%，到了24 h之后，則下降了44%，F(xiàn)VIII的活性隨著時間的延長而下降[4]。這些都說明冷沉淀的質量主要是受溫度和時間的影響。因此，在制備冷沉淀的時候，一定要注重對時間和溫度的控制。只有控制好時間和溫度，才能制備出高質量的冷沉淀。

2 冷沉淀的臨床應用和效果

2.1 冷沉淀的臨床應用 冷沉淀主要應用于補充凝血因子VIII、vWF、纖維蛋白原、因子ⅩⅢ等。冷沉淀通過形成纖維蛋白膜對潰瘍創(chuàng)面形成機械性牽拉作用，從而收縮創(chuàng)口[5]，而大量的I、VIII等凝血因子又可以使患者體內(nèi)的凝血因子迅速上升，促進患者的凝血功能。因而冷沉淀可以用于體內(nèi)凝血因子活性降低或者喪失的凝血因子缺乏癥以及外科手術和肝臟移植手術中[6]。在外科手術中，可以一次注射冷沉淀15～20 U。在Fg缺乏癥的治療中，使用量通常低于1.0 U一次。如果心臟手術后出現(xiàn)凝血功能障礙，出現(xiàn)出血、滲血的情況，可以使用FVII。FVII可以減少輸血的計量而且凝血功能也會得到改善。冷沉淀中富含F(xiàn)VII、FVIII和纖維蛋白原、因子ⅩⅢ等。輸入體內(nèi)有助于凝血酶的形成，有利于患者止血功能的形成。手術中需要大量輸血的患者術后風險較高，由于術后患者的肝功能很差，容易發(fā)生胃腸道并發(fā)癥。根據(jù)臨床資料顯示，在手術中使用冷沉淀，可以減少術后的不良反應，提高了手術的成功率。失血性休克患者在輸血時會引起微血管出血并發(fā)休克，對患者輸入冷沉淀之后，凝血指標明顯得到改善，在24 h之內(nèi)有效止血率高達84%。冷沉淀制劑不僅具有良好的單獨使用效果，和紅細胞、血小板聯(lián)合使用之后也可以發(fā)揮出良好的治療效果。冷沉淀在外科手術和整形外科的手術中應用較多，不僅可以控制出血，在術后的抗感染和消炎作用也十分的明顯。

2.2 冷沉淀的應用效果 冷沉淀具有十分良好的凝血功能，他可以粘附結構蛋白，加固細胞間的結合，防止腫瘤細胞的擴散[7]。對于肝癌和肝臟移植手術的患者來說，冷沉淀的合理使用可以有效的較少在手術中的出血量，促進術后傷口的愈合。對于Fg缺乏癥患者來說，冷沉淀明顯要比普通的Fg濃縮制劑的效果良好，并且可以快速提高Fg的濃度。在對200名腎炎患者進行冷沉淀輸入之后，大部分患者的炎癥發(fā)展停滯，體內(nèi)循環(huán)再次建立。但是87%使用標準治療方法的腎炎患者，都出現(xiàn)了病情惡化，甚至出現(xiàn)并發(fā)癥的情況。由此可見，冷沉淀大大提高了外科手術的治療效果，對縮短療程、提高療效具有重要的作用。肝臟患者在手術中容易發(fā)生凝血功能紊亂的現(xiàn)象，這也是因為肝病本身造成的凝血因子減少的原因。冷沉淀可以補充各種凝血因子，堅守術中出血和術后感染的幾率[8]。部分血友病患者在進行血液制品治療之后產(chǎn)生FVIII的抑制物。這種抑制物在患者免疫較低的情況下發(fā)生率較高。但是，通過注射冷沉淀可以使細胞建立對抑制物的免疫能力[9]。這說明使用冷沉淀可以減少血友病患者在治療過程中產(chǎn)生的不良反應。但是單獨使用冷沉淀不能形成持久的免疫能力，對于滴注量高、反應高的抑制物患者的治療效果不佳。而且研究表明，年齡越小的患者越容易產(chǎn)生抑制物。所以在對不到一周歲的血友病患兒的治療中盡量不要輸入冷沉淀等含有FVIII的制品。

冷沉淀制備技術在血液成分制備中的應用，可以更好地滿足臨床治療，滿足對于成分血的要求，為手術患者、DIC患者、血友病患者、纖維蛋白原缺乏癥等患者提供了治療保證。正確使用冷沉淀，可以縮短療程，提高療效，對臨床治療中具有重大的意義。但是我們也不能盲目使用冷沉淀，應該根據(jù)患者自身的情況酌量使用。

[1]孫啟軍，徐樹良，杜毅真，等.恒溫水循環(huán)式冷沉淀制備裝置的研制與應用.臨床輸血與檢驗，2012，9(1):237-240.

[2]Yousef H，Neyrath D，F(xiàn)reedman M，et al.Cryoprecipitate production:the use of additives to enhance the yield.Ciln Lab Haematol，2011，28(40):2144-2146.

[3]盧文靜，任芙蓉.4℃保存過夜全血制備新鮮冷凍漿的質量.國際輸血與血液學雜志，2006，29(1):11-15.

[4]朱祥明，楊通漢，姚福柱，等.新鮮冰凍血漿融化后不同放置時間凝血因子的變化.中國輸血雜志，2011，18(3):211-212.

[5]嚴松旭，王明珠，林逸和，等.冷沉淀制劑在腫瘤患者放療后口腔潰瘍治療中的應用.臨床輸血與檢驗，2010，12(2):172-173.

[6]曾永芳，郭鵬，陳方祥，等.冷沉淀制劑在肝臟移植手術中的聯(lián)合應用.中國輸血雜志，2009，38(12):1431-1432.

[7]陳玲，林證明，江建鋒，等.淡菜血小板聯(lián)合冷沉淀治療大出血患者的療效觀察.臨床輸血與檢驗，2010，12(2):172-173.

[8]舒淑華，方才，崔中路.自體血液回收術在肝移植中的應用.臨床輸血與檢驗，2009，8(2):104-105.

[9]Aleem A，Saidu A，Aboulkarim H，et al.Rituximab as a single agent in the management of adult patients with haemophilia A ang inhibitors:marked reduction in inhibitor level and clinical improvement in bleeding but failure to eradicate the inhibitor.Haemophilia，2009，15(1):1068-1069.