冷沉淀制備技術(shù)在血液成分制備中的臨床應(yīng)用效果淺析

王萬(wàn)仲 張雪 王艷

冷沉淀是一種白色絮狀物血液成分，廣泛應(yīng)用于血友病患者、低血容量性休克并發(fā)DIC和先天性或獲得性凝血因子VIII缺乏癥和纖維蛋白原缺乏癥的治療中。是由新鮮冰凍血漿在2℃～6℃條件下制備而成，主成分主要含有凝血因子Ⅷ、纖維蛋白原和血管性血友病因子、纖維結(jié)合蛋白、凝血因ⅹIII等。隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展，冷沉淀制備技術(shù)在臨床應(yīng)用中表現(xiàn)出越來(lái)越重要的作用。冷沉淀在零下30℃以下冰凍保存，從采血之日起有效期為一年，筆者對(duì)我州近年來(lái)的冷沉淀制備技術(shù)與冷沉淀的臨床應(yīng)用效果分析如下。

1 冷沉淀的制備與質(zhì)量

1.1 冷沉淀的制備 選取街頭采集的全血300～400 ml，在6～8 h內(nèi)分離出新鮮冰凍血漿，在零下50℃平板速凍機(jī)中冰凍成塊狀，再儲(chǔ)存于零下30℃的冰箱中保存。在制備冷沉淀時(shí)，將保存的新鮮冰凍血漿放置在4℃的環(huán)境下分離出白色絮狀物即為冷沉淀。其制備方法主要有改良快速融化離心法和水浴虹吸法兩種方法。改良快速融化離心法是把新鮮冰凍血漿放入到4℃的水浴箱內(nèi)，等到血漿融化超過(guò)二分之一后將還沒(méi)有融化的血漿捏碎成碎冰塊，加速血漿的溶解，約1 h后，將還存有少許的血漿冰塊取出，在零度、離心力3000 g的條件下離心10 min。在100級(jí)凈化臺(tái)上分離出上層血漿，剩下的下層血漿和白色沉淀物就是冷沉淀。水浴虹吸法是把新鮮冰凍血漿放在4℃的恒溫循環(huán)水浴箱中，將另外一個(gè)與新鮮冰凍血漿相連通的空轉(zhuǎn)移袋懸空在水溶箱外并低于新鮮冰凍血漿袋的高度，兩個(gè)袋子之間產(chǎn)生一定的落差，融化的血漿通過(guò)虹吸原理緩慢流入空袋中，剩余的約40～50 ml血漿塊就是冷沉淀[1]。整個(gè)過(guò)程要檢測(cè)水的溫度并進(jìn)行調(diào)節(jié)。兩種方法在制備的時(shí)間上相差不大。改良快速融化法雖然需要離心10 min，但是在血漿融化的過(guò)程中加入了捏碎步驟，減少了血漿融化的時(shí)間。但改良快速融化離心法在整個(gè)操作過(guò)程中，受到人為影響較多，操作過(guò)程也比較復(fù)雜。而水浴虹吸法受人為因素影響較小，所需的儀器也比較簡(jiǎn)單。所以，近來(lái)水浴虹吸法在冷沉淀制備中越來(lái)越受歡迎。

1.2 冷沉淀的質(zhì)量 冷沉淀的質(zhì)量主要是受到溫度和時(shí)間的影響，在制備的過(guò)程中需要控制室溫、掌握時(shí)間。有實(shí)驗(yàn)證明，經(jīng)過(guò)亞甲藍(lán)殺除病毒的血漿制備的冷沉淀和原血漿制備的冷對(duì)比，發(fā)現(xiàn)FVIII的活性下降了28%，而血管性血友病引子的活性下降了12%，纖維蛋白原的濃度也下降了45%[2]。另一個(gè)實(shí)驗(yàn)是在4℃的環(huán)境下保存18 h的血液的FVIII和在6℃下保存了8 h的相比下降了25%[3]，這也說(shuō)明冷沉淀制備受到溫度的影響。新鮮冰凍血漿一旦融化，F(xiàn)VIII的活性在12 h之內(nèi)下降了42%，到了24 h之后，則下降了44%，F(xiàn)VIII的活性隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而下降[4]。這些都說(shuō)明冷沉淀的質(zhì)量主要是受溫度和時(shí)間的影響。因此，在制備冷沉淀的時(shí)候，一定要注重對(duì)時(shí)間和溫度的控制。只有控制好時(shí)間和溫度，才能制備出高質(zhì)量的冷沉淀。

2 冷沉淀的臨床應(yīng)用和效果

2.1 冷沉淀的臨床應(yīng)用 冷沉淀主要應(yīng)用于補(bǔ)充凝血因子VIII、vWF、纖維蛋白原、因子ⅩⅢ等。冷沉淀通過(guò)形成纖維蛋白膜對(duì)潰瘍創(chuàng)面形成機(jī)械性牽拉作用，從而收縮創(chuàng)口[5]，而大量的I、VIII等凝血因子又可以使患者體內(nèi)的凝血因子迅速上升，促進(jìn)患者的凝血功能。因而冷沉淀可以用于體內(nèi)凝血因子活性降低或者喪失的凝血因子缺乏癥以及外科手術(shù)和肝臟移植手術(shù)中[6]。在外科手術(shù)中，可以一次注射冷沉淀15～20 U。在Fg缺乏癥的治療中，使用量通常低于1.0 U一次。如果心臟手術(shù)后出現(xiàn)凝血功能障礙，出現(xiàn)出血、滲血的情況，可以使用FVII。FVII可以減少輸血的計(jì)量而且凝血功能也會(huì)得到改善。冷沉淀中富含F(xiàn)VII、FVIII和纖維蛋白原、因子ⅩⅢ等。輸入體內(nèi)有助于凝血酶的形成，有利于患者止血功能的形成。手術(shù)中需要大量輸血的患者術(shù)后風(fēng)險(xiǎn)較高，由于術(shù)后患者的肝功能很差，容易發(fā)生胃腸道并發(fā)癥。根據(jù)臨床資料顯示，在手術(shù)中使用冷沉淀，可以減少術(shù)后的不良反應(yīng)，提高了手術(shù)的成功率。失血性休克患者在輸血時(shí)會(huì)引起微血管出血并發(fā)休克，對(duì)患者輸入冷沉淀之后，凝血指標(biāo)明顯得到改善，在24 h之內(nèi)有效止血率高達(dá)84%。冷沉淀制劑不僅具有良好的單獨(dú)使用效果，和紅細(xì)胞、血小板聯(lián)合使用之后也可以發(fā)揮出良好的治療效果。冷沉淀在外科手術(shù)和整形外科的手術(shù)中應(yīng)用較多，不僅可以控制出血，在術(shù)后的抗感染和消炎作用也十分的明顯。

2.2 冷沉淀的應(yīng)用效果 冷沉淀具有十分良好的凝血功能，他可以粘附結(jié)構(gòu)蛋白，加固細(xì)胞間的結(jié)合，防止腫瘤細(xì)胞的擴(kuò)散[7]。對(duì)于肝癌和肝臟移植手術(shù)的患者來(lái)說(shuō)，冷沉淀的合理使用可以有效的較少在手術(shù)中的出血量，促進(jìn)術(shù)后傷口的愈合。對(duì)于Fg缺乏癥患者來(lái)說(shuō)，冷沉淀明顯要比普通的Fg濃縮制劑的效果良好，并且可以快速提高Fg的濃度。在對(duì)200名腎炎患者進(jìn)行冷沉淀輸入之后，大部分患者的炎癥發(fā)展停滯，體內(nèi)循環(huán)再次建立。但是87%使用標(biāo)準(zhǔn)治療方法的腎炎患者，都出現(xiàn)了病情惡化，甚至出現(xiàn)并發(fā)癥的情況。由此可見(jiàn)，冷沉淀大大提高了外科手術(shù)的治療效果，對(duì)縮短療程、提高療效具有重要的作用。肝臟患者在手術(shù)中容易發(fā)生凝血功能紊亂的現(xiàn)象，這也是因?yàn)楦尾”旧碓斐傻哪蜃訙p少的原因。冷沉淀可以補(bǔ)充各種凝血因子，堅(jiān)守術(shù)中出血和術(shù)后感染的幾率[8]。部分血友病患者在進(jìn)行血液制品治療之后產(chǎn)生FVIII的抑制物。這種抑制物在患者免疫較低的情況下發(fā)生率較高。但是，通過(guò)注射冷沉淀可以使細(xì)胞建立對(duì)抑制物的免疫能力[9]。這說(shuō)明使用冷沉淀可以減少血友病患者在治療過(guò)程中產(chǎn)生的不良反應(yīng)。但是單獨(dú)使用冷沉淀不能形成持久的免疫能力，對(duì)于滴注量高、反應(yīng)高的抑制物患者的治療效果不佳。而且研究表明，年齡越小的患者越容易產(chǎn)生抑制物。所以在對(duì)不到一周歲的血友病患兒的治療中盡量不要輸入冷沉淀等含有FVIII的制品。

冷沉淀制備技術(shù)在血液成分制備中的應(yīng)用，可以更好地滿足臨床治療，滿足對(duì)于成分血的要求，為手術(shù)患者、DIC患者、血友病患者、纖維蛋白原缺乏癥等患者提供了治療保證。正確使用冷沉淀，可以縮短療程，提高療效，對(duì)臨床治療中具有重大的意義。但是我們也不能盲目使用冷沉淀，應(yīng)該根據(jù)患者自身的情況酌量使用。

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