微生物檢驗培養(yǎng)基質(zhì)量控制探討

景曉敏

培養(yǎng)基(Medium)即生物實驗中一種為微生物、植物及動物組織提供生存及生長的人工配制養(yǎng)料。此養(yǎng)料通常富含多種生物所需的水、維生素、碳水化合物、含氮物質(zhì)以及微量元素等。而也有專用的培養(yǎng)基含有抗菌素及色素，特針對于對單種微生物培養(yǎng)及鑒定工作。然而隨著近年來其醫(yī)療及科研技術(shù)的不斷成熟與發(fā)展，生物實驗及微生物檢驗中所需的培養(yǎng)基呈現(xiàn)著越來越廣泛的運用趨勢，而隨之市面上出現(xiàn)的培養(yǎng)基生產(chǎn)廠商也不斷增多。此種由規(guī)模化量產(chǎn)的培養(yǎng)基雖然為廣大微生物檢驗提供了極大的方便，但據(jù)多項調(diào)查及研究結(jié)果指出，此行業(yè)量產(chǎn)的培養(yǎng)基，其制作工藝、生產(chǎn)質(zhì)量等還未達(dá)到規(guī)范化指標(biāo)，產(chǎn)品的有關(guān)質(zhì)量更是存在一定的問題，且有待完善。而實驗室中微生物檢測的質(zhì)量與其使用的培養(yǎng)基息息相關(guān)，培養(yǎng)基的質(zhì)量保障正是微生物檢驗結(jié)果準(zhǔn)確性的前提［1］。故嚴(yán)格進(jìn)行實驗室微生物檢驗中培養(yǎng)基的質(zhì)量控制，對提高檢驗質(zhì)量具有重要的意義。本文就對現(xiàn)今如何進(jìn)行培養(yǎng)基質(zhì)量控制的方法作一簡要的闡述。

1 培養(yǎng)基的采購及驗收

現(xiàn)今市面上的培養(yǎng)基生產(chǎn)廠家非常多，但是其產(chǎn)品質(zhì)量均有一定的差異。故我們在進(jìn)行實驗室微生物培養(yǎng)基的采購方面，需要嚴(yán)格控制其采購質(zhì)量。首先，采購培養(yǎng)基的生產(chǎn)廠家必須是通過國家相關(guān)企業(yè)質(zhì)量認(rèn)證的，如ISO9001體系認(rèn)證及其他資質(zhì)認(rèn)證。其次采購的培養(yǎng)基產(chǎn)品均需通過各項國家相關(guān)規(guī)定的質(zhì)量檢測，且達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，產(chǎn)品出廠后有各項嚴(yán)格指標(biāo)，如名稱、成分、添加成分、技術(shù)數(shù)據(jù)、質(zhì)量控制證、性能評價數(shù)據(jù)及有效期等相關(guān)數(shù)據(jù)［2］。最后則是采購的產(chǎn)品產(chǎn)商需選擇市面上信譽度高，服務(wù)好的企業(yè)。而培養(yǎng)基的驗收則包含了對采購?fù)瓿傻呐囵B(yǎng)基進(jìn)行的各項檢驗工作，包括核對生產(chǎn)廠家名稱、產(chǎn)品名稱、生產(chǎn)批號及規(guī)格數(shù)量，對比真實產(chǎn)品與各項數(shù)據(jù)清單有無差異，確定產(chǎn)品的外觀、質(zhì)量以及保質(zhì)有效期。發(fā)現(xiàn)采購后的培養(yǎng)基出現(xiàn)上述各項中的任何差異及問題，一律歸為驗收不合格，且不得使用。

2 培養(yǎng)基的儲放

商品化規(guī)格的培養(yǎng)基及干粉培養(yǎng)基均應(yīng)嚴(yán)格按照其產(chǎn)品說明上的存放環(huán)境進(jìn)行保存，產(chǎn)品存放于干燥且陰涼的位置。通常培養(yǎng)基的有效保存期為2年，但若一但開封且未使用完的培養(yǎng)基很易吸收室內(nèi)空氣中所含的水分，造成損壞。故一經(jīng)開封應(yīng)盡快使用完，保存則嚴(yán)格注意防潮。檢驗人員對保存中的培養(yǎng)基應(yīng)作詳細(xì)的定期檢查，確保其密封性及是否處于有效使用期。若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基在保管中出現(xiàn)問題，如過期、變色、結(jié)塊等情況，需及時廢棄。

3 培養(yǎng)基的制備

首先制備培養(yǎng)基所選用的水必須是專用純凈水或者經(jīng)消毒過后的無菌水。水中電阻率需在25℃時大于300000Ω/cm，重金屬含量需小于0.05 mg/L。而在進(jìn)行培養(yǎng)基的稱量時需專業(yè)人員在干燥通風(fēng)的環(huán)境中采用專門的角匙，且操作過程需嚴(yán)格規(guī)范。培養(yǎng)基進(jìn)行復(fù)水的容器則需要采用專用的盛裝容器，其容器的體積須大于復(fù)水后培養(yǎng)基總體積的2倍，預(yù)防出現(xiàn)溢出情況。在對培養(yǎng)基進(jìn)行加熱時，若培養(yǎng)基內(nèi)含有瓊脂粉成分，則需要將其充分浸泡一段時間。加熱的過程中不斷進(jìn)行攪拌防止出現(xiàn)培養(yǎng)基結(jié)底炭化從而造成成分損害。部分培養(yǎng)基則需要使用沸水進(jìn)行加熱，預(yù)防發(fā)生局部燒焦及沸騰溢出。而當(dāng)對培養(yǎng)基實施滅菌時，需嚴(yán)格按照說明規(guī)范操作。通常均會采用121℃行15 min高壓滅菌，但是也不能盲目按照說明的時間進(jìn)行，需結(jié)合實際情況，合理調(diào)節(jié)滅菌時間，防止出現(xiàn)培養(yǎng)基滅菌過度而造成的成分變性。為有效體現(xiàn)培養(yǎng)基其生物學(xué)特性，其制備生長及繁殖需要特定的PH范圍［3］。當(dāng)在實施培養(yǎng)基滅菌過程中，往往PH值會因滅菌而產(chǎn)生改變。可采用適量的NaOH1 mol/L及鹽酸1 mol/L對培養(yǎng)基的PH值進(jìn)行適當(dāng)調(diào)節(jié)，但也應(yīng)注意調(diào)節(jié)次數(shù)不宜過多。

4 培養(yǎng)基的性能測定

當(dāng)經(jīng)過上述步驟而制備好的培養(yǎng)基均會出現(xiàn)不同的顏色及質(zhì)感。故對培養(yǎng)基的性能測定可根據(jù)其顏色、形態(tài)、質(zhì)感的觀察來進(jìn)行。完成培養(yǎng)基需顏色清晰、質(zhì)感明顯，無脫水、渾濁及沉淀現(xiàn)象。

5 加強從業(yè)人員水平及素質(zhì)

通過以上環(huán)節(jié)可以有效提高培養(yǎng)基的質(zhì)量，但人為因素也是影響其實驗室微生物檢驗的重要因素之一［4］。故無論是檢驗人員還是培養(yǎng)基的制備人員，都必須對其自身素質(zhì)及技術(shù)水平進(jìn)行認(rèn)真的認(rèn)識及學(xué)習(xí)，端正其工作態(tài)度，加強各方面業(yè)務(wù)知識、技術(shù)能力，進(jìn)一步提高實驗室檢驗人員的從業(yè)水平。

綜上所述，培養(yǎng)基是微生物檢驗過程中必不可少的關(guān)鍵因素，而我們則需通過嚴(yán)格產(chǎn)品的采購、規(guī)范其操作以及提高從業(yè)人員水平素質(zhì)等手段進(jìn)一步加強其培養(yǎng)基的質(zhì)量控制，從而有效提高其微生物檢驗的準(zhǔn)確性及質(zhì)量。

［1］顧文輝.微生物實驗室質(zhì)量控制.職業(yè)與健康，2010，26(16):1906-1908.

［2］周小明.微生物實驗室的質(zhì)量控制和質(zhì)量保證.職業(yè)與健康，2009，25(15):1667-1668.

［3］童小平，楊更發(fā).培養(yǎng)基有效保存期內(nèi)的質(zhì)量控制.浙江預(yù)防醫(yī)學(xué)，2009，(8):89-91.

［4］王綏家，黃宏星.微生物實驗室培養(yǎng)基的質(zhì)量控制.檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2011，(20):112-114.