李 敬 尹曉東 簡國艷 樊雨翔
(天津市人民醫院,天津 300121)
樹突狀細胞(Dendritic cells,DC)是體內最強的抗原提呈細胞[1]。正常狀況下體內DC數量很少,低于外周血單核細胞的1%,主要以不成熟狀態分布在外周組織中。不成熟DC可對外來異物進行攝取、處理、加工。同時,在存在炎性刺激等情況下,DC分化成熟并遷移至外周淋巴結。將抗原信息以主要組織相容性抗原復合物 (Major histocompatibility complex,MHC)的方式提呈給初始T細胞,使其致敏為抗原特異性T細胞。我院在進行腫瘤患者DC疫苗治療時,采用國內外普遍認可的雙側腹股溝24點皮內注射技術,將107/4 mL的DC疫苗回輸患者體內,取得了較為滿意的結果?,F總結如下。
1.1 一般資料 2012年3月我院生物治療中心接受DC疫苗治療的惡性腫瘤患者共58例,男32例,女26例,年齡47~82歲,平均62歲。DC疫苗107/4 mL,每周1次,連續3周雙側腹股溝處皮內注射,共174例次。
1.2 方法 DC疫苗分別放入兩支2 mL一次性注射器中,每支含DC疫苗的細胞數量為0.5×107,體積為2 mL;為減少注射時對活細胞可能造成的損傷,選擇8號針頭以替代常規皮內注射使用的4.5或5號針頭。做皮內注射前,詳細詢問患者有無過敏史,用2 mL一次性注射器及8號針頭,抽取DC疫苗藥液2 mL,2支,排盡空氣。選擇大腿內側靠近腹股溝處,按皮內注射消毒法常規消毒皮膚。左手繃緊皮膚,右手持注射器,使針頭斜面向上,與皮膚呈5~15°刺入皮內,待針頭斜面進入皮內后,放平注射器,注入藥液0.1~0.2 mL,使局部形成一圓形隆起的皮丘,皮膚變白,毛孔變大。 注射完畢,迅速拔出針頭,切勿按揉。重復操作,單側12點;雙側同時共24點,表盤式注射,直徑10 cm,通常各點注射不是嚴格等量的;注射結束后,清理用物,按時觀察反應,囑患者臥床休息1~2 h。
1.3 結果 在多點皮內注射的174例次中,3例次因穿破皮膚導致失敗,15例次因操作不熟練導致分布不均勻未成表盤式排列,2例因患者中途拒絕改為靜脈回輸,其余均順利完成治療。
2.1 注射前 皮內注射前訪視患者,告知本科室已熟練掌握此項技術,經上千例臨床病例實際操作積累了豐富的經驗,解釋皮內注射的具體操作方法和臨床意義及其與靜脈注射的區別,如實介紹在既往治療患者中出現的常見副作用以及應對處理方法,消除患者的懷疑及恐懼心理,并告知患者在皮內注射過程中如實在不能忍受皮內注射的疼痛,可以隨時放棄并選擇靜脈注射途徑,取得患者最大程度的配合。對有心臟等合并癥等患者,進行心電監護,注意血壓、心率、呼吸頻率及體溫的變化,必要時可給予吸氧及遵囑給予藥物治療。如本文病例之一的82歲老年患者,注射前為其詳細解釋皮內注射方式下DC細胞直接進入免疫系統發揮作用,與傳統的靜脈注射需流經血液系統有所區別,經過細心教導,患者表示理解并愿意接受治療。注射時,向患者展示麻藥,由于患者皮膚薄且明顯緊張,采取淺進針方式并同時進行撫慰,患者自述痛感不明顯。患者于第五次回輸后晚間發熱,體溫38-38.5℃,采取物理降溫后緩解,未使用其他藥物,無其他過敏反應,自述食欲好轉,甲床(指甲)由凹陷變為飽滿。
2.2 注射中 皮內注射過程中戴好口罩、帽子,戴無菌手套嚴格無菌操作;按照輸血常規方法對所注射的DC疫苗與患者身份核對無誤后行皮內注射,先與患者做簡單語言交流安撫,講明皮內注射的重要性,減輕患者對皮內注射疼痛的恐懼,待患者心情平靜后再進行皮內注射,操作中觀察患者有無不適,詢問患者的感受,并鼓勵患者堅持;注射結束后,棉簽按壓止血,再次消毒穿刺點,外貼無菌輸液貼。如患者不能進行正常皮內注射,可改為靜脈注射。
2.3 注射后 注射結束后,留患者觀察1 h,患者無不適主訴則治療結束。再次強調可能會出現的全身發熱,局部紅腫,過敏性皮疹以及簡單的處理方法,囑下次注射時間,并留相關醫生和護士的電話,備用。皮內注射后3天內,每天1次電話隨訪。
3.1 DC疫苗注射途徑對誘導全身性免疫應答意義重大。長期以來靜脈途徑一直是DC疫苗回輸的主要途徑,但由于靜脈回輸的DC可能在肝、脾等處被破壞,極少數能接觸二級淋巴組織的初始T細胞,使得免疫治療效果下降。因此在DC疫苗臨床應用中,患者體內僅表達出低水平的腫瘤抗原特異性免疫反應,因而總的臨床效果不滿意。
3.2 皮內注射法是將小量藥液注入表皮與真皮之間的方法。注射量小,一般不超過0.2 mL。主要用于藥物過敏試驗,預防注射等。采用雙側腹股溝24點皮內注射技術是國內外公認的DC疫苗皮內注射方法,可以使DC疫苗發揮最大的療效。疼痛問題沒有針對性的解決方法。DC疫苗多點皮內注射副作用可出現在操作過程中或者在72 h內,常見發熱,體溫在38℃左右,一般發生在注射后 5~6 h,無需特殊處理,8~12 h可自行緩解。
雙側腹股溝24點皮內注射技術將107/4 mL的DC疫苗回輸患者體內,操作中觀察患者有無不適,并鼓勵患者堅持;注射結束后,棉簽按壓止血,再次消毒穿刺點,外貼無菌輸液貼。如不能進行正常皮內注射,可改為靜脈注射。
〔1〕Kim BR,Yang EK,Kim DY,et al.Generation of anti-tumour immune response using dendritic cells pulsed with carbonic anhydrase IX-Acinetobacter baumannii outer membrane protein A fusion proteins against renal cell carcinoma[J].Clin Exp Immunol,2012,167(1):73-83.