Sysmex XE-2100D血細胞分析儀白細胞分類和手工分類的比較

簡正偉，石淙，張長林，江梅，萬臘根

(南昌大學第一附屬醫院檢驗科，江西南昌330006)

·實驗研究·

Sysmex XE-2100D血細胞分析儀白細胞分類和手工分類的比較

簡正偉，石淙，張長林，江梅，萬臘根

(南昌大學第一附屬醫院檢驗科，江西南昌330006)

目的探討Sysmex XE-2100D血細胞分析儀白細胞分類和手工分類結果的差異，以驗證該儀器白細胞分類結果的準確性。方法取Sysmex XE-2100D血細胞分析儀檢測后未觸犯推片規則的20份病人標本，重復檢測2次。對每份標本分別制作2張血涂片，由兩位有經驗的檢驗人員進行人工分類，每張涂片分類200個細胞。比較儀器分類的平均值是否在手工分類結果99%可信區間內，在可信區間內為合格。結果Sysmex XE-2100D進行中性粒細胞(N%)、淋巴細胞(L%)、單核細胞(M%)分類時合格率均為90%；進行嗜酸性粒細胞(E%)和嗜堿性粒細胞(B%)分類時其合格率分別為95%和75%。結論Sysmex XE-2100D血細胞分析儀進行白細胞分類準確性較高，對于未觸犯推片規則的分類結果可以直接發報告。

Sysmex XE-2100D血細胞分析儀；白細胞分類；手工法；比較

隨著檢驗技術的飛速發展，越來越多的檢驗儀器運用于臨床，新的儀器設備極大地提高了臨床標本的檢測速度，減輕了檢驗人員的工作量，提高了工作效率。測定結果的準確性對臨床的輔助診斷以及對病情的連續監測起著至關重要的作用。為了驗證本科室在用的Sysmex XE-2100D血細胞分析儀白細胞分類的結果準確性，我們對Sysmex XE-2100D血細胞分析儀白細胞分類與手工分類進行比較，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 主要儀器與試劑

1.1.1 日本希森美康公司生產的Sysmex XE-2100D血細胞分析儀及其配套校正品、質控品和試劑。

1.1.2 瑞氏-吉姆薩染色液為珠海貝索生物科技有限公司生產。

1.1.3 日本奧林帕斯公司生產的OLYMPUS CH-21光學顯微鏡。

1.2 樣本隨機抽取Sysmex XE-2100D血細胞分析儀檢測后未觸犯推片規則的20份病人標本。

1.3 方法

1.3.1 血細胞分析儀分類嚴格按照Sysmex XE-2100D血細胞分析儀作業指導書操作，對隨機抽取的20份病人標本重復檢測2次，分別記錄兩次分

類的檢測結果，取二者平均值用于后續分析，樣本檢測在1h之內完成。

1.3.2 手工分類法儀器分類結束后，立即由兩位經驗豐富的檢驗人員，按照《全國臨床檢驗操作規程》[1]的要求，充分混勻樣品管，各取10μl血制成頭、體、尾分明的血片2張用瑞氏-吉姆薩染色液進行染色。采用雙盲法，每個檢驗人員各分類一張涂片，每張涂片分類200個細胞。

1.3.3 判斷合格標準參考CLSI的H20-A的標準計算手工分類結果百分率的標準誤S(x)p，再計算出某一參數百分率的99%的可信限[2]。手工分類結果百分率的標準誤：S(x)p=[p×q/n]1/2。某一參數百分率的99%的可信限：p±2.56[p×q/n]1/2。

將Sysmex XE-2100D分類結果平均值與手工分類結果99%的可信限進行比較，小于99%可信范圍上限而大于99%可信范圍下限的判定為合格，超出此范圍的判定為不合格。合格率=合格數÷總的標本數。

1.4 統計學方法運用EXECL軟件進行數據分析。

2 結果

2.1 Sysmex XE-2100D血細胞分析儀中性粒細胞分類和手工分類的結果比較見表1。

2.2 其他分類結果合格率依照上述方法，Sysmex XE-2100D血細胞分析儀淋巴細胞(L%)、單核細胞(M%)分類結果合格率均為90%；嗜酸性粒細胞(E%)分類結果合格率為95%；嗜堿性粒細胞(B%)分類結果合格率為75%。

表1 中性粒細胞分類和手工分類的結果比較

3 討論

隨著檢驗醫學的不斷發展，大量的新技術新設備應用于檢驗科，自動化程度不斷提高，越來越多的醫院過分的依賴于儀器的檢測結果，而忽視了手工形態學檢查[3，4]。Sysmex XE-2100D血細胞分析儀采用半導體激光的流式細胞技術結合細胞化學染色熒光技術進行WBC分類。根據由半導體激光處理過的細胞所產生的前向散射光、側向散射光和側向熒光信號的不同，把白細胞分為中性粒細胞(N)、淋巴細胞(L)、單核細胞(M)、嗜酸性粒細胞(E)和嗜堿性粒細胞(B)等5類。前向散射光反映細胞的體積；側向散射光反映細胞的內容物，如核和顆粒等；側向熒光反映細胞脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的含量。并將X軸表示側向散射光強度和Y軸側向熒光強度繪制L、M、E、N+B的散射圖，便于直觀分析。

手工顯微鏡白細胞分類是根據血細胞的大小、細胞漿和細胞核的染色情況以及有無核仁和

顆粒等特征進行分類計數，是實驗室白細胞分類的參考方法。通過上述比較，我們可以得出結論，Sysmex XE-2100D血細胞分析儀對未觸犯推片規則的患者樣本中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞分類結果和手工顯微鏡檢有很好的符合性。但是對于嗜堿性粒細胞分類結果有一定誤差，可能是因為嗜堿性粒細胞出現在外周血中的數量少，或者是其在血片中分布不均勻。我們手工鏡檢只分類200個細胞，而儀器分類數量大(大約10000個)，從而使儀器嗜堿性粒細胞分類結果比手工分類結果偏高[5]。對于2例中性粒細胞和淋巴細胞不合格的樣本，我們查閱了患者病歷，發現兩名患者均為呼吸科老年男性患者，分別為惡病質、肺腺癌的病人和慢性呼吸衰竭、慢性阻塞性肺氣腫(急性加重)的病人，儀器分類結果和手工鏡檢結果相比較其中性粒細胞結果偏低，淋巴偏高。可能是因為慢性呼吸病患者組織換氣長期處于失代償狀態，引起細胞的形態有所改變，儀器計數把部分變形的中性粒細胞計算成淋巴細胞，造成中性粒細胞結果的偏低和淋巴細胞結果的偏高。另外，2例單核細胞不合格的患者均為深度燒傷、低血容量休克的病人，儀器分類結果比手工鏡檢結果偏高。可能是由于燒傷病人容易繼發感染，引起部分中性粒細胞出現中毒顆粒，形態發生改變，把部分形態異常的中性粒細胞誤計數為單核細胞。所以，對于燒傷科的病人，如果有單核細胞結果偏高的樣本，最好也要進行手工分類，以提高結果的準確性。

綜上所述，Sysmex XE-2100D血細胞分析儀對于未觸犯推片規則的樣本分類結果有較高的準確性，可以用儀器代替手工鏡檢，直接發報告。但對于分類結果嗜堿性粒細胞偏高較多的樣本，建議手工鏡檢，以提高樣本分類結果的可靠性。

[1]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].第3版.南京:東南大學出版社,2006:123.

[2]劉成玉,羅春麗.臨床檢驗基礎[M].第5版.人民衛生出版社,2012: 47.

[3]王志東,王亞,李顥.全血涂片染色鏡檢在臨床中的價值及體會[J].國際檢驗醫學雜志,2011,32(15)：1780-1781,1786.

[4]伍柏青,傅新文.當代五分類血細胞分析儀技術原理分析[J].實驗與檢驗醫學,2011,29(4):391-394.

[5]Barnes PW,McFadden SL,Machin SJ,et al.The international consensus group for hematology review:suggested criteria for action following automated CBC and WBC differential analysis[J].Lab Hematol,2005,11(2):83-90.

Comparison research on leukocyte differential count between Sysmex XE-2100D hematology analyzer and manual oper-ation

JIAN Zhengwei,SHI Cong,ZHANG Zhanglin,et al.Department of Clinical Laboratory,the First Affiliated Hospital of Nanchang University,Nanchang 330006,China

Abstrac:ObjectiveTo investigate the difference of leukocyte differential count between Sysmex XE-2100D hematology analyzer and manual operation.Methods Blood samples from patients were detected by Sysmex XE-2100D hematology analyzer and 20 samples that did not violate the smear rules were selected.These 20 samples were detected duplicatedly by Sysmex XE-2100D hematology analyzer and 2 blood smears were made for each sample.Two hundred leukocyte cells were differentiated in each smear by 2 professional technicians with manual operation.The leukocyte differential count results were compared between Sysmex XE-2100D hematology analyzer and manual operation by setting the 99%confidence interval as satisfaction standard.Results By using manual operation as reference,the passing rate of Sysmex XE-2100D hematology analyzer on neutrophil,lymphocyte,monocyte,acidophilic granulocyte and basophile granulocyte differential count was 90%,90%,90%,95%and 75%respectively.Conclusion Sysmex XE-2100D hematology analyzer has fine accuracy on leukocyte differential count.The results of leukocyte differential count detected with Sysmex XE-2100D hematology analyzer without violating the smear rules can be reported directly.

Sysmex XE-2100D hematology analyzer;Leukocyte differential count;Manual operation;Comparison

R446.11+1

A

1674-1129(2013)01-0018-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.01.007

江西省科技支撐計劃項目，編號：20121BBG70049

簡正偉，主管技師，主要研究方向分子診斷學和臨床血液學檢驗。

萬臘根，主任醫師、教授，研究生導師。