HPLC法測(cè)定清感穿心蓮軟膠囊中脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量

宋志釗 劉 元文志云

1.廣西中醫(yī)藥研究院，廣西 南寧 530022；2.廣西中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 530022

HPLC法測(cè)定清感穿心蓮軟膠囊中脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量

宋志釗 劉 元*文志云

1.廣西中醫(yī)藥研究院，廣西 南寧 530022；2.廣西中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 530022

目的：建立清感穿心蓮軟膠囊中脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量測(cè)定方法。方法：采用高效液相色譜法，以Appollo C18色譜柱為分離柱，以甲醇－水（62∶38）為流動(dòng)相，254nm為檢測(cè)波長(zhǎng)，柱溫為室溫。結(jié)果：脫水穿心蓮內(nèi)酯在10.2～163.2μg/ml范圍內(nèi)，峰面積與其濃度呈良好線性關(guān)系（r＝0.9999），平均回收率為98.1%，RSD為0.73%（n＝6）。結(jié)論：該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可作為控制本品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)。

清感穿心蓮軟膠囊；脫水穿心蓮內(nèi)酯；HPLC

清感穿心蓮軟膠囊由穿心蓮、買麻藤藥材組成，是由《衛(wèi)生部頒藥品標(biāo)準(zhǔn)》（中藥成方制劑）第十九冊(cè)——清感穿心蓮片改劑型而來(lái)，具有清熱利咽，止咳化痰之功效。用于風(fēng)熱感冒、咽喉腫痛、支氣管炎、扁桃腺炎。為了控制其質(zhì)量，筆者增加了清感穿心蓮軟膠囊中穿心蓮指標(biāo)成分脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量測(cè)定方法，結(jié)果令人滿意。

1 儀器與試藥

日本島津LC－10ATVP高效液相色譜儀，SPD－10AVP紫外檢測(cè)儀；威瑪龍色譜工作站；Appollo C18柱（4.6mm ×250mm，5μm）；KQ－100VDB雙頻數(shù)控超聲清洗儀。甲醇為色譜純，水為超純水，其余所用試劑均為分析純。脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，供含量測(cè)定用，批號(hào)110854－200305；清感穿心蓮軟膠囊3批，批號(hào)為：111010、111011、111012，由廣西邦琪藥業(yè)集團(tuán)有限公司提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱為appollo－C18（4.6×250mm，5μm）；流動(dòng)相為甲醇－水（62：38），流速為1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，進(jìn)樣量為10μl；柱溫為室溫；理論塔板數(shù)按脫水穿心蓮內(nèi)酯峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品10.2mg，置25ml量瓶中用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成408μg/ml對(duì)照品溶液，備用。精密吸取上述對(duì)照品溶液1.0mL，置10mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，即得（40.8μg·mL－1）。

2.3 供試品溶液的制備 取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物20粒，混勻，取約0.2g，精密稱定，置25ml量瓶中，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液過(guò)0.45μm濾膜，即得。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性范圍考察 精密稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品10.2mg，置25ml量瓶中用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成408μg/m l對(duì)照品溶液，備用。分別精密吸取上述對(duì)照品溶液0.25、0.5、0.75、1.0、2.0、4.0ml，分別置10m l量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，進(jìn)樣10ul，測(cè)定，計(jì)算，得回歸方程為：Y＝15440X＋13658，r＝0.9999。結(jié)果表明：脫水穿心蓮內(nèi)酯進(jìn)樣濃度在10.2～163.2μg/ml之間與峰面積積分值呈線性關(guān)系。

2.5 精密度試驗(yàn) 分別吸取同一供試品溶液（111010），進(jìn)樣6次，依次測(cè)定，即得。測(cè)得供試品RSD為0.76%。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批號(hào)（111010）樣品，按供試品溶液制備方法制備6份，分別進(jìn)樣，測(cè)定，即得。結(jié)果測(cè)得脫水穿心蓮內(nèi)酯為1.44mg/粒，RSD＝1.72%（n＝6）。表明該方法重復(fù)性良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一供試品溶液分別于0，4，8，12，16h進(jìn)行測(cè)定，即得。結(jié)果供試品中脫水穿心蓮內(nèi)酯含量的RSD為0.91%，表明供試品溶液在16h內(nèi)保持穩(wěn)定。

2.8 加樣回收試驗(yàn) 取已測(cè)知含量（1.44mg/粒，批號(hào)111010）的供試品0.1g，精密稱定，精密加入408μg/ml脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品溶液1.2ml，按供試液制備項(xiàng)下的方法制備。結(jié)果脫水穿心蓮內(nèi)酯平均回收率為98.2%，RSD為1.25%（n＝6），結(jié)果見表1。

R284.1

A

1007－8517（2013）06－0018－02

廣西科技廳項(xiàng)目（桂科攻0537018－6）。

宋志釗，男，助理研究員，藥材及制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究，Tel：0771－5888554，E－mail：songzhizhao1978＠yahoo.com.cn。

劉元，女，高級(jí)實(shí)驗(yàn)師，新藥開發(fā)，Tel：0771－5888554，E－mail：liuyuan0821＠vip.163.com。