薺菜中黃酮類成分的積累變化研究

王榮榮宋 寧劉曉秋

1.武警廣西總隊醫院藥劑科，廣西 南寧 530003；2.沈陽藥科大學中藥學院，遼寧 沈陽 110016

薺菜中黃酮類成分的積累變化研究

王榮榮1宋 寧2劉曉秋2

1.武警廣西總隊醫院藥劑科，廣西 南寧 530003；2.沈陽藥科大學中藥學院，遼寧 沈陽 110016

目的：測定薺菜不同生長期及不同藥用部位中主要黃酮類成分2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷的含量，確定該成分在生長過程中的變化規律及其在不同藥用部位中的分布規律。方法：采用HPLC法，以2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷為對照，在270 nm測定2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷的含量。色譜柱Diamonsil C18（5μm，200×4.6 mm），流動相乙腈－0.05%磷酸溶液（20∶80）；流速（0.8mL·min－1）；結果：2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷在21.0～210.0μg·ml－1線性關系良好；平均回收率99.8%，RSD 2.0%（n＝9）。結論：該方法簡單、靈敏、準確、可靠。可用于薺菜中主要黃酮成分2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷的含量測定，為薺菜的進一步開發利用提供依據。

薺菜；黃酮；2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷；含量；分布規律

薺菜為十字花科（Cruciferae）植物薺菜Capsella bursapastoris（L.）Medic.的干燥全草，具有平肝明目、和胃消滯的功效。民間用于治療目赤腫痛、腎炎水腫、乳糜尿等多種疾病。國內外學者對其進行了化學成分及藥理作用研究，分離得到了黃酮類［1］、有機酸類［2－3］、生物堿類［4］、氨基酸類及糖類［5］等成分，藥理研究表明薺菜具有降壓［6］、舒張血管、止血、收縮子宮［7］等作用，薺菜中的黃酮類成分具有抗炎［8］、抗氧化［9］等作用。薺菜在江蘇、上海等地方標準及中國藥品標準藏藥版均有收載，蒙醫藥醫籍中也有收載，但這些標準中僅對其進行性狀與顯微鑒別。近年來本研究組對薺菜中的化學成分進行了研究，從中分離得到了近10個黃酮類化合物［10－11］，其中2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷在薺菜中的含量較高，推測其為主要活性成分。試驗中收集了不同生長期薺菜藥材，并建立了HPLC法，測定了不同生長期薺菜藥材以及不同藥用部位中2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷的含量，為薺菜的進一步開發利用奠定基礎。

1 儀器與試藥

Shimadzu HPLC色譜儀（LC－10 Atvp泵，DAD檢測器，Class－vp工作站，日本島津公司）；乙腈（色譜純，江蘇漢邦科技有限公司）；純凈水 （杭州娃哈哈集團有限公司），其余均為分析純。

2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷對照品由本實驗室自制，結構經譜學分析鑒定［11］，HPLC歸一化法檢測其純度為99.3%。薺菜藥材采自沈陽市萬柳塘公園，經沈陽藥科大學袁久志副教授鑒定為十字花科植物薺菜Capsella bursa－pastoris（L.）Medic的全草，存放于沈陽藥科大學中藥分析室。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱：Diamonsil C18（5μm，200×4.6 mm）；流動相：乙腈－0.05%磷酸溶液（20∶80）；流速：0.8 ml·min－1；檢測波長：270nm。在此條件下，樣品中2″－O－α－L－阿拉伯糖異草苷峰與其它色譜峰能達到基線分離，保留時間在29 min左右，對照品與供試品的色譜圖見圖1。

2.2 對照品儲備液的制備 精密稱取2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷對照品2.1mg，置10ml量瓶中，加甲醇超聲15min使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品儲備液。

2.3 供試品溶液的制備 稱取薺菜粉末2.0g，置具塞

錐形瓶中，加入體積分數為75%的乙醇100m l，密塞，浸泡1h后，回流提取，加熱至微沸，并保持微沸1h，放冷，濾過，濾液60℃下減壓蒸干，用體積分數為75%的乙醇定容至25m l量瓶中，經0.45μm微孔濾膜濾過，即得。

2.4 線性關系考察 精密吸取對照品儲備液，稀釋得到質量濃度分別為21.0、42.0、84.0、126.0、168.0、210.0μg ·ml－1的對照品溶液，各進樣10μl，以峰面積為縱坐標（Y），濃度（X）為橫坐標，得回歸方程Y＝4.2290×104X＋1.5043×102，r＝0.9998），表明在21.0～210.0μg· m l－1線性關系良好。

2.5 精密度試驗 取質量濃度為42.0μg·ml－1的對照品溶液，按照2.1項下色譜條件，重復進樣6次，測定峰面積，RSD為1.3%，表明精密度良好。

2.6 穩定性試驗 取同一樣品溶液，按2.1項下色譜條件，于0、4、8、12、24h分別進樣，峰面積RSD為1.7%。表明供試品溶液在24h內穩定性良好。

2.7 重復性試驗 稱取同批樣品6份，按2.3項下方法制備供試品溶液，并按2.1項下色譜條件進樣，測定峰面積，計算含量，平均值為0.11%，RSD為1.6%，表明重復性良好。

2.8 回收率試驗 稱取同批樣品9份，約1.0g（含量1.100mg），精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別加入一定量的對照品溶液，按2.3操作制備加樣回收供試品溶液，在2.1項下色譜條件下進行測定，計算平均回收率，結果見表1。

表1 加樣回收率試驗結果

2.9 不同生長期藥材及不同藥用部位中含量測定結果 稱取不同生長期的薺菜全草粉末各2.0g，按2.2與2.3項下方法制備對照品溶液和供試品溶液，并按2.1項下色譜條件操作，采用外標法計算2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷的含量，結果見表2。稱取果期薺菜的不同部位 （根、莖、葉、花、果實和全草）粉末各2.0g，測定2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷的含量，結果見表3。

表2 不同生長期薺菜中2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷含量測定結果

表3 薺菜不同藥用部位中2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷含量測定結果

由表2可以看出，果期的薺菜中含量最高，初生期嫩葉中含量最低，說明薺菜在生長過程中黃酮類成分的含量呈逐漸增加的趨勢。表3結果顯示，薺菜的不同藥用部位中，果實中2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷的含量最高，其次為花，根中含量最低。

3 結論與討論

本試驗建立了HPLC法，測定了薺菜不同生長期以及不同藥用部位中主要黃酮成分2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷的含量，試驗結果表明該方法簡便、快速、可靠，可作為薺菜藥材的質量控制方法。

異葒草苷類黃酮具有抗心肌缺血的作用［12］，2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷是在異葒草苷上連接一個阿拉伯糖，推測其也具有抗心肌缺血的作用，并且其在薺菜中的含量較高，因此選擇2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷作為含量測定成分。

二極管陣列檢測器得到的2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷紫外光譜圖中在270nm和350nm處有最大吸收，在270nm處，供試品中其它色譜峰對2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷色譜峰的干擾較小，因此選擇270nm作為測定波長。

不同藥用部位中，2″－O－α－L－阿拉伯糖異葒草苷在果實和花中的含量最高，但二者在全草中的生物量較小，其在全草中的含量僅次于果實和花，因此今后對薺菜全草的開發利用將具有更為廣闊的前景。

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R282.71

A

1007－8517（2013）09－0014－02

2013.03.12）

王榮榮 （1985.7－），女，碩士研究生，藥師，武警廣西總隊醫院藥劑科，主要從事中藥質量控制方面的工作。E－Mail：zhizihuakai722＠163.com。

劉曉秋，女，教授，博士生導師，主要從事中藥質量標準規范化研究及中藥新藥的研究。