毛細管氣相色譜法測定武打將軍酒中薄荷腦的含量

陳錫琨

廣西壯族自治區南寧市食品藥品檢驗所，廣西 南寧 530001

毛細管氣相色譜法測定武打將軍酒中薄荷腦的含量

陳錫琨

廣西壯族自治區南寧市食品藥品檢驗所，廣西 南寧 530001

目的：建立武打將軍酒中薄荷腦含量測定方法。方法：采用毛細管氣相色譜法，色譜柱為stabiwax－DA石英毛細管柱（30m×0.53 mm×0.25μm），載氣為氮氣，水楊酸甲酯為內標物，FID檢測器，檢測器溫度為250℃，進樣口的溫度為250℃，柱溫160℃，分流進樣，分流比（10∶1）。結果：薄荷腦和水楊酸甲酯能達到良好分離；薄荷腦的線性范圍0.20～1.20mg·ml－1（r＝0.9996）；薄荷腦的回收率98.28%。結論：方法簡便、準確、重復性好，可用于武打將軍酒的質量控制。

武打將軍酒；薄荷腦；氣相色譜法

武打將軍酒為民族藥，該藥為虎杖、芒硝、龍血竭、莪術、徐長卿、川芎、骨碎補、蓽茇、乳香、三七、飛龍掌血、豆豉姜、薄荷腦等中藥加工而成的純中藥復方制劑，具有活血祛瘀、舒筋活絡、消腫止痛等功效。用于跌打損傷，筋骨扭傷，風濕骨痛，類風濕關節痛，骨質增生性刺痛，神經痹痛，肌肉疼痛，牙痛，凍瘡等癥狀。方中的薄荷腦具有清熱疏風，消腫止痛。其能選擇性地刺激皮膚或黏膜的冷覺感受器，引起皮膚黏膜血管收縮從而產生消炎、止痛、止癢等作用。薄荷腦為揮發類物質，沸點較低，對其含量測定方法多采用氣相色譜法測定［1～3］。按目前標準［4］只對薄荷腦進行薄層鑒別，未對其含量進行控制。為了更好地控制該制劑質量，本文采用毛細管氣相色譜法對武打將軍酒中薄荷腦的含量測定。方法簡便、準確、重復性好，可用于標準中薄荷腦的質量控制。

1 儀器和試藥

2010氣相色譜儀（日本島津）；BP211D電子天平（瑞士梅特勒公司）。

薄荷腦對照品 （中國藥品生物制品檢驗所，批號：110728－201008含量測定用）；水楊酸甲酯、無水乙醇均為分析純；武打將軍酒（批號：20120306 20120408 20120525 20121023 20121103）及陰性樣品（缺薄荷腦）均由廣西壯族自治區壯醫醫院制劑室提供。

2 實驗方法和結果

2.1 內標溶液的制備 取水楊酸甲酯適量，精密稱定，加無水乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為內標溶液。

2.2 對照品溶液的制備

2.2.1 取薄荷腦對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品儲備溶液。

2.2.2 精密量取內標溶液、對照品儲備溶液各2m l，置同一10ml量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備 取本品3瓶，混勻，精密量取1ml，置10m l量瓶中，精密加入內標溶液2ml，加無水乙醇至刻度，搖勻，即得。

2.4 陰性樣品溶液制備 按處方比例制成不含薄荷腦的陰性樣品溶液。精密量取陰性樣品溶液1ml，置10m l量瓶中，精密加入內標溶液2ml，加無水乙醇至刻度，搖勻，即得。2.5 色譜條件 采用2010GC氣相色譜儀，色譜柱為stabiwax－DA石英毛細管柱（30 m×0.53 mm×0.25μm）；載氣為氮氣；水楊酸甲酯為內標物；FID檢測器；檢測器和進樣口的溫度均為250℃；柱溫160℃；分流進樣，分流比（10∶1）。N2流速3ml·min－1；H2流速30ml·min－1；空氣流速400ml·min－1；尾吹氣N2流速30m l·min－1；進樣量為1μL，結果見圖1。

2.6 工作曲線的繪制 分別精密吸取對照品溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0ml置10mL量瓶中，分別加入內標溶液2.0ml，加無水乙醇稀釋并至刻度，搖勻。依次進樣1μl，測定峰面積，以對照品與內標物峰面積的比作為縱坐標，對照品濃度為橫坐標，進行線性回歸，得到回歸方程：Y＝0.0443X＋0.0198，r：0.9996。

2.7 精密度試驗 取同一對照品溶液，連續進樣6次，按“2.5”項下的色譜條件進行測定，求出薄荷腦的峰面積和

內標物的峰面積的比值，結果RSD為0.56%。實驗表明其精密度良好。

2.8 重復性試驗 取同一批號供試品，按“2.3”項下的方法分別配制9份，按 “2.5“項下的色譜條件進行測定，求出薄荷腦的含量，結果RSD為0.41%。實驗表明其重復性良好。

2.9 穩定性試驗 取同一批號的供試品溶液，在室溫下放置，分別在0、2、6、8、12、18、24小時按“2.5“項下的色譜條件進行測定，結果薄荷腦含量的RSD為0.78%。表明供試品溶液在24小時內穩定。

2.10 加樣回收試驗 在已知含量的供試品溶液中加入一定量的對照品溶液和內標物溶液，按 “2.5”項下的色譜條件進行測定。結果回收率為98.28%，見表1。

表1 加樣回收率試驗結果（n＝9）

2.11 供試品中薄荷腦的含量測定 按“2.5”項下的方法，分別對5個批號的武打將軍灑中薄荷腦含量分別進行測定，結果見表2。

表2 樣品測定結果（n＝5）

3 討論

本方法曾參照文獻［5～7］方法制備樣品溶液試驗，結果采用直接取樣定溶測出的含量和回收率均較為理想。故此，采用直按取樣法，方法快速、簡單。

本方法在實驗過程中，曾選用萘、水楊酸甲酯和環已酮作內標物試驗，均能獲得較好的實驗效果。通過實驗結果相比較，選用水楊酸甲酯作為內標物效果更為理想。

本實驗曾考察了3根不同商品規格的色譜柱（stabiwax－DA石英毛細管柱，phenomenex ZB－Wax石英毛細管柱及Agilent DB－17石英毛細管柱）并探索不同的進樣口溫度和不同檢測器的溫度；色譜柱溫為程序升溫和色譜柱為恒溫等條件作實驗比較。實驗結果表明3根不同商品規格的色譜柱均能達到實驗目的，而stabiwax－DA石英毛細管柱在檢測器溫度為250℃；進樣口的溫度為250℃；柱溫160℃；分流進樣，分流比（10∶1）的條件下能使實驗中的薄荷腦和內標物質水楊酸甲酯在短時間（10min）內完全分離（峰分離度均大于1.5）；理論塔板數不低于10000；色譜基線平穩，符合 《中國藥典》要求，故選用之。

樣品中薄荷腦的含量在3.6023mg·m l－1～3.9831 mg· ml－1之間；但處方中薄荷腦是揮發性物質，在生產、包裝、儲存過程中，如果操作方法不當或高溫存放，很容易造成薄荷腦含量偏低，從而影響藥品的處方比例組成，進而影響藥品的療效。因此，筆者認為，制定武打將軍酒測定薄荷腦含量標準時，產品在有效期內薄荷腦含量應得不少于3.60 mg·ml－1，這樣才能保證藥品的療效。

［1］李彥超，李宜鮮，宋漢敏等.GC法同時測定安陽精制膏中薄荷腦、冰片和水楊酯甲酯的含量［J］.中醫研究，2011，24（2）：25～26.

［2］蔡冰，李堅.氣相色譜法對正骨水中樟腦、薄荷腦的含量測定 ［J］.河北醫藥，2008，30（6）：879.

［3］張曉霞，陳安家，張一鳴，等.毛細管氣相色譜測定消腫止痛酊中樟腦與薄荷腦的含量［J］.時珍國醫國藥，2009，20（7）：1645～1646.

［4］廣西壯族自治區壯醫醫院標準［S］.2002：29.

［5］楊宗輝，惠濤.GC法測定川貝枇杷露中薄荷腦的含量 ［J］.西北藥學雜志，2008，23（5）：262～263.

［6］鄧祖磊，張青云.氣相色譜測定復方桑菊感冒沖劑中薄荷腦的含量［J］.海峽藥學，2010，22（10）：46～47.

［7］中國藥典［S］.2010年版.一部.528.

Capillary gas chromatography determination of menthol in Wudajianjun liquor

Chen Xi kun
Nanning Institute for Food and Drug Control，Nanning，guangxi530001，China

Objective：To establish a method for the determination of menthol in Wudajianjun lquor.Methods：Using capillary gas chromatography，column was stabiwax－DA fused silica capillary column（30 m×0.53 mm×0.25μm），contained gas was nitrogen，methyl salicylate as an internal standard and FID detector，the detector temperature 250℃，inlet temperature of250℃，column temperature 160°C，split injection，split ratio（10：1）.Results：Menthol and methyl salicylate can achieve good separation；the menthol linear range 0.20～1.20mg.ml－1（r＝0.9996）；menthol recovery was98.28%.Conclusion：The method is simple，accurate，reproducible and can be used for Wudajianjun liquor quality control.

capillary gas chromatography；Wudajianjun liquor；menthol

R284

A

1007－8517（2013）09－0020－02

2013.03.07）