淺議藥品雜質(zhì)分析的方法驗證

北京市藥品審評中心（100061）陶林 田曉娟 佟利家

藥品在臨床使用中產(chǎn)生的不良反應(yīng)除了與藥品本身的藥理活性有關(guān)外，有時與藥品中存在的雜質(zhì)也有很大關(guān)系。藥品中的雜質(zhì)是否能得到合理、有效的控制，直接關(guān)系到藥品的質(zhì)量可控。為使雜質(zhì)測試結(jié)果準確、可靠，必須對所采用的分析方法的科學(xué)性、準確性和可行性進行驗證，以充分表明所采用的雜質(zhì)分析方法能夠滿足有效分離、檢出雜質(zhì)及對雜質(zhì)進行準確定量的目的要求。

有關(guān)物質(zhì)分析方法驗證是質(zhì)量研究和質(zhì)量控制的重要組成部分，申報資料中需要提交完整的方法學(xué)驗證內(nèi)容。國家食品藥品監(jiān)督管理局于2005年頒布了《化學(xué)藥物質(zhì)量控制方法驗證技術(shù)指導(dǎo)原則》（簡稱“指導(dǎo)原則”）[1]，并且在現(xiàn)行版中國藥典二部附錄中也收載了《藥品質(zhì)量標準分析方法驗證指導(dǎo)原則》（簡稱“指導(dǎo)原則”）[2]，這些指導(dǎo)原則均對分析方法驗證的內(nèi)容作了系統(tǒng)的規(guī)范要求。筆者在申報資料初步審查中，發(fā)現(xiàn)一些申請人進行雜質(zhì)研究的具體工作時，由于對雜質(zhì)控制分析方法驗證的目的和要求理解不夠準確透徹，沒有針對研發(fā)品種的具體情況，開展驗證工作，簡單地按照指導(dǎo)原則中要求的驗證內(nèi)容進行試驗，機械地照搬試驗方法，以完成指導(dǎo)原則中要求的試驗項目為目的，在驗證內(nèi)容的選擇、實驗操作、數(shù)據(jù)處理等方面與進行方法驗證的目的相去較遠。

總體來說，雜質(zhì)檢查方法驗證的內(nèi)容應(yīng)根據(jù)檢測目的，結(jié)合所采用分析方法的特點確定，可以包括專屬性、線性、范圍、準確度、精密度、檢測限、定量限、耐用性和系統(tǒng)適用性等。一般用于限度試驗的方法驗證側(cè)重專屬性和檢測限，用于定量試驗的方法驗證強調(diào)專屬性、準確度和定量限。

為了更好地理解雜質(zhì)分析方法驗證目的和要求，本文對雜質(zhì)分析各項驗證內(nèi)容做一初步解析。

1 專屬性

專屬性系指在其他成分可能共存的情況下，采用的方法能準確測定出被測雜質(zhì)的特性。根據(jù)雜質(zhì)的可獲得性，可以將雜質(zhì)分為可以獲得的雜質(zhì)（這類雜質(zhì)一般指有相應(yīng)的市售對照品或各步反應(yīng)的中間體，一般稱為已知雜質(zhì)）和無法獲得的雜質(zhì)（一般多為降解產(chǎn)物或副反應(yīng)產(chǎn)物，也稱未知雜質(zhì)），對二者檢測方法的驗證，采用的手段有所不同。

1.1 可獲得的雜質(zhì)（已知雜質(zhì)） 對于原料，在原料試樣中加入定量的已知雜質(zhì)，證明該雜質(zhì)與其他共存的物質(zhì)能得到分離和檢出，即該雜質(zhì)與其他各雜質(zhì)之間以及該雜質(zhì)與主成分之間的分離。

對于制劑，在按處方將原料和輔料混合配制的試樣中或者制劑產(chǎn)品中加入定量的已知雜質(zhì)，考察各雜質(zhì)之間、雜質(zhì)與輔料之間以及雜質(zhì)與主成分之間的分離。同時應(yīng)該進行溶劑空白和輔料空白試驗，以確定空白干擾情況。

1.2 不能獲得的雜質(zhì)（未知雜質(zhì)） 可以將生產(chǎn)工藝中獲得的原料粗品試樣或者工藝篩選所得制劑產(chǎn)品試樣進行分析，考察在無法獲得的副產(chǎn)物、中間體、降解物存在情況下各雜質(zhì)的分離及雜質(zhì)與主成分的分離情況。必要時，可進行供試品的強制降解試驗，即將供試品用強光照射、高溫、高濕、酸水解、堿水解以及氧化的方法進行破壞，以考察破壞前后雜質(zhì)的基本情況。

需要說明的是，申請人進行強制降解試驗的時候，應(yīng)該考察降解條件的適度性。原則上破壞出的雜質(zhì)水平不宜過高或者過低。同時，應(yīng)該特別關(guān)注質(zhì)量平衡，所謂質(zhì)量平衡是將主成分的含量和雜質(zhì)測定結(jié)果相加，考察其與未破壞的原始結(jié)果的接近程度。盡管該數(shù)據(jù)并不適用于所有情況，但對質(zhì)量平衡的考察在確保含量和雜質(zhì)測定的專屬性、研究降解途徑的完整性、測定方法的準確性上均有一定的科學(xué)意義。申請人應(yīng)結(jié)合強制降解試驗所得的質(zhì)量平衡結(jié)果和影響因素試驗、加速試驗、長期試驗等所得的質(zhì)量平衡結(jié)果，采用綜合評價含量測定和雜質(zhì)控制的分析方法。

（未完待續(xù)）