蘆筍中硒元素的測定方法探究

于 輝， 呂瑞芳， 秦博文， 陳 超

(承德護理職業學院， 河北 承德 067000)

蘆筍(Asparagus officinalis Linn)學名石刁柏，百合科，天門冬屬，多年生草本植物，藥食兩用蔬菜。“味甘、性寒，入肺腎二經”。現代營養學分析，蘆筍含有特別豐富的組織蛋白、葉酸、核酸和較多的硒、鉬、鎂、錳、銅、鐵等微量元素，能有效地控制細胞異常生長，促使細胞生長正常化，具有防止細胞癌變的作用，列30種抗癌植物之首，是世人公認的抗癌藥物。硒能抑制致癌物的活力，提高機體的免疫力，適量補充硒可提高人體免疫力，預防腫瘤和心血管等疾病的發生［1］。硒的安全和適宜攝入量為50－400μg/d［2］。本文利用氫化物發生原子熒光法測定蘆筍中硒，旨在為蘆筍的研究開發提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料:AFS－230型雙道原子熒光光度計;斷續流動氫化物發生器進樣系統;SFG－01B.500黃石市恒豐醫療器械有限公司電熱恒溫鼓風干燥箱SFG－01B.500;WX－4000溫壓雙控微波消解系統。本法所用試劑均為優級純;實驗用水為超純水(電阻率為18.3M ·cm)。鐵氰化鉀溶液(100 g/L):取10.0g鐵氰化鉀，溶于100 mL超純水中。載流:10%鹽酸溶液，取100mL濃鹽酸稀釋至1000mL。硼氫化鉀溶液(20g·L－1):稱取10.0g硼氫化鉀溶于500mL 2g·L－1的氫氧化鈉溶液中，臨用前配制。鹽酸(6mol/L):將濃鹽酸和水按體積1:1的混合。硒標準溶液:100μg/mL購自國家標準物質研究中心。蘆筍:產地，河南。

1.2 方法:取新鮮20.00g蘆筍自然風干粉碎經微波消解后冷卻，將消解液洗入干凈的50 mL小燒杯中，低溫蒸發至2.0 mL時，加入6.0 mol/L 的鹽酸5.0 mL，繼續加熱至微沸5min，使六價硒還原為四價硒。冷卻后完全轉移至25mL容量瓶中，加入5.0mL 10%鐵氰化鉀，用10%鹽酸溶液定容到刻度，搖勻待測。測量條件設定為燈電流:60mA，負高壓:300V，原子化器高度8 mm，原子化器溫度:200℃，載氣流量:500mL/min，屏蔽氣流量:1000ml/min，讀數方式:峰面積，讀數延遲時間2s，讀數時間10s，測量方法:標準曲線法。

1.3 樣品分析:開機，按1.2設定儀器工作條件，輸入樣品重量、定容體積等有關參數，原子化器點火，預熱30 min。采用斷續流動自動進樣［3］，依次測定空白、標準溶液、樣品的熒光強度，儀器自動計算樣品測量結果。

2 結果

2.1 標準曲線的繪制:分別取 0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，0.8mL硒標準溶液，按1.2方法步驟進行處理，冷卻后完全轉移至100mL容量瓶中，加入5.0mL 10%鐵氰化鉀，用10%鹽酸溶液定容到刻度，制作的標準系列濃度為:0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，0.8μg/mL。

2.2 方法的精密度和準確度:用0.6 μg/mL標準溶液在上述條件下，平行測定11次，經統計測量法計算其相對標準偏差RSD=1.28%。進行加標回收試驗，試驗結果表明，硒的加標回收率為99.43%。

2.3 樣品含量:按1.2設定儀器工作條件，對蘆筍樣品溶液進行三次平行測定，得到樣品溶液硒的濃度為0.456μg/mL，經計算樣品含量 0.57μg/g。

3 討論

微波消解的特點是化學反應快;試劑用量少，空白值較低;樣品交叉污染機會少，可避免硒的揮發，回收率高;效率高，操作簡單，不污染工作環境;節能，降耗［4］。試驗考察了濃硝酸、濃硝酸與過氧化氫、濃硝酸與濃高氯酸不同消解體系以及比例和用量。結果表明，濃硝酸與濃高氯酸(8+2)mL的消化效果最好。在消解過程中，為了避免反應過于激烈，防止壓力驟升，采用功率400W，壓力400kPa，時間設定為10min。原子化器高度是影響熒光信號的一個重要參數。通過作原子化器的高度與熒光強度的關系試驗，表明原子化器的高度為8mm時，熒光強度最好;信噪比最佳，原子化效率最好。對于光電倍增管，負高壓越高，測定的靈敏度越好，但負高壓過高使信號噪音偏高。通過作 210、240、260、270、280、290、300、310V 條件下，測定 1.0μg/mL硒標準溶液的熒光強度，計算信噪比。負高壓在300V時信噪比最大，故負高壓為300V。作1.0μg/mL硒標準溶液的燈電流與熒光強度曲線，計算信噪比。燈電流在60－70mA信噪比最好。因此，選擇燈電流60mA。硼氫化鉀濃度最關鍵，影響氫化物生成速度，試驗表明，當硼氫化鉀濃度在20g/L左右變化時，熒光強度趨于恒定，所以用20g/L硼氫化鉀進行測定。

在最佳測量條件下，方法的線性范圍為0－0.8μg/L，線性方程為:I=57.429C －2.919，線性相關系數 r=0.9998，檢出限(3S/N)為0.024μg/mL。可見氫化物發生原子熒光法測定藥用植物中的硒是可行的。測定結果表明，鮮蘆筍的含硒量達0.57μg/g，比一般蔬菜(0.006－0.237)的含量高幾倍甚至幾十倍，具有一定保健功能，所含的天門冬酰胺、香豆素、蘆丁等有抑制癌細胞、擴張血管、利尿解毒的多種作用，對預防癌癥、心腦血管病、高血壓、糖尿病、腎病、脂肪肝、皮膚病、支氣管病等有一定療效。營養學家和素食界人士均認為它是健康食品和全面的抗癌中草藥。

［1］李冬華，袁瑞榮，孫燕，等.中藥蘆筍的實驗和臨床研究 Ⅰ、蘆筍抗腫瘤作用和免疫調節功能的初步實驗研究［J］.中國臨床藥理學雜志，1988，4(1):32 －39.

［2］趙向東.硒的飲食推薦量［J］.國外醫學地理學分冊，1998，19(1):9－11.

［3］卑占宇，楊木華.氫化物發生原子熒光光譜法測定荊芥中汞和砷［J］.理化檢驗 － 化學分冊，2010，46(8):971 －972.

［4］徐桂杰，可成友，邊薔，等.有機樣品中硒消解方法的研究進展［J］.山西中藥，2009，25(11):49－51.