木蝴蝶種子化學成分研究

魏曉楠，林彬彬，謝國勇，李建文，秦民堅

[摘要] 目的：研究紫葳科Bignoniaceae植物木蝴蝶Oroxylum indicum種子的化學成分。方法：采用硅膠柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱色譜等手段進行分離純化，通過化合物的理化常數和波譜數據鑒定其結構。結果：從木蝴蝶種子的95%乙醇提取物中分離并鑒定了20個化合物，分別為木蝴蝶苷A（1）、木蝴蝶苷B（2）、白楊黃素（3）、黃芩苷元（4）、槲皮素（5）、芹菜素（6）、山柰酚（7）、槲皮素-3-O-阿拉伯吡喃糖苷（8）、羽扇豆醇（9）、2α，3β-二羥基羽扇豆醇（10）、赤松素（11）、二氫赤松素（12）、膽甾-5-烯-3，7-二醇（13）、連翹環己醇（14）、異連翹環己醇（15）、zarzissine（16）、（E）-銀松素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（17）、腺苷（18）、β-谷甾醇（19）、β-胡蘿卜苷（20）。結論：化合物11～13，15～18為首次從木蝴蝶植物中分離得到，其中除化合物18外，其余6個化合物均為首次從紫葳科植物中獲得。

[關鍵詞] 木蝴蝶屬；木蝴蝶；化學成分

木蝴蝶為紫薇科木蝴蝶屬植物木蝴蝶Oroxylum indicum（L.）Vent 的成熟種子，原名千張紙，少數民族地區稱之為“三百兩銀藥”，主要分布于四川、貴州、云南、廣西、海南、廣東及福建。木蝴蝶性味苦、甘、涼，入肺、肝、胃經。有清肺、利咽、止咳、疏肝、和胃之功效，主治肺熱咳嗽、喉痹、音啞、肝胃氣痛、瘡口不斂[1]。已有文獻報道指出，在木蝴蝶成熟種子中含有大量的具有生物活性的黃酮類化合物，如黃芩苷、黃芩苷元、白楊黃素、槲皮素等[2]。現代藥理研究表明，木蝴蝶藥材所含有的成分具有抗微生物活性和抗炎作用，對煙曲霉、黑曲霉、念珠菌、黃曲霉等真菌有良好的抑菌活性，同時對多種致病細菌有抑制活性[3]。到目前為止對木蝴蝶的化學成分研究報道較少，藥效物質基礎有待進一步明確。為了進一步合理利用該藥用資源，作者對木蝴蝶種子進行了化學成分的研究，從木蝴蝶種子的95%乙醇提取物中分離并鑒定了20個化合物，其中化合物11～13，15～18為首次從木蝴蝶植物中分離得到，其中除化合物18外，其余6個化合物均為首次從紫葳科植物中獲得。

1 材料

Bruker ACF-500型核磁共振光譜儀，用TMS作內標。柱色譜硅膠（青島海洋化工廠）；薄層硅膠板（煙臺江友硅膠開發有限公司）；凝膠Sephadex LH-20（Pharmacia product.）；所用試劑均為分析純。

木蝴蝶種子于2011年購于安徽亳州市，經中國藥科大學中藥資源教研室秦民堅教授鑒定為紫葳科植物木蝴蝶O. indicum，憑證標本（No.Wei-061203）保存于中國藥科大學中藥資源學教研室。

2 提取和分離

木蝴蝶藥材10 kg，粉碎并用95%乙醇加熱回流提取，提取3次，每次2 h，提取液回收乙醇后濃縮成浸膏（700 g），將浸膏加適量硅膠拌樣，進行硅膠柱色譜分離，以氯仿-甲醇系統（100∶1～1∶1）梯度洗脫，得到的20個流分（Fr.A～T）。Fr.E經硅膠（石油醚-乙酸乙酯40∶1～1∶1）柱色譜，Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱純化得化合物9（60 mg）；Fr.F經硅膠（石油醚-乙酸乙酯35∶1～1∶1）柱色譜、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱純化得化合物19（40 mg）；Fr.H經硅膠（石油醚-乙酸乙酯30∶1～1∶1）柱色譜、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱純化得化合物3（50 mg）；Fr.I經硅膠（石油醚-乙酸乙酯25∶1～1∶1）柱色譜、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱純化得化合物10（10 mg），11（12 mg），12（9 mg），13（10 mg）；Fr.G經硅膠（石油醚-乙酸乙酯20∶1～1∶1）柱色譜、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱純化得化合物4（50 mg），5（12 mg），6（15 mg）；Fr.H經硅膠（氯仿-甲醇25∶1～1∶1）柱色譜、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱純化得化合物20（19 mg），7（16 mg），8（10 mg），14（10 mg），15（8 mg）；Fr.I經硅膠（氯仿-甲醇20∶1～1∶1）柱色譜、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱純化得化合物1（20 mg），16（10 mg），17（12 mg），18（10 mg），Fr.Q經硅膠（氯仿-甲醇8∶1～1∶1）柱色譜、Sephadex LH-20（甲醇）柱純化得化合物2（18 mg）。

3 結構鑒定

化合物1 黃色粉末；ESI-MS m/z 433[M+H]⁺ ；¹H-NMR（DMSO-d₆，500 MHz）δ： 5.01（1H，d，J=7.0 Hz，H-1″），7.02（1H，s，H-3），7.06（1H，s，H-8），7.57～7.64（3H，m，H-3′～5′），8.03～8.11（2H，dd，J=1.5，12.0 Hz，H-2′，6′），12.61（1H，s，5-OH），8.58（1H，s，6-OH）；¹³C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ： 163.4（C-2），104.7（C-3），182.5（C-4），146.5（C-5），130.8（C-6），149.2（C-7），94.4（C-8），151.6（C-9），106.1（C-10），130.6（C-1′），126.3（C-2′，6′），129.1（C-3′，5′），131.9（C-4′），100.9（C-1″），73.1（C-2″），77.3（C-3″），69.7（C-4″），75.8（C-5″），60.6（C-6″）。以上數據與文獻[4]一致，鑒定為木蝴蝶苷A。

化合物2 黃色粉末；ESI-MS m/z 595[M+H]⁺；¹H-NMR（DMSO-d₆，500 MHz）δ： 4.22（1H，d，J=7.8 Hz， H-1），5.05（1H，d，J=7.5 Hz，H-1″），7.00（1H，s，H-3），7.14（1H，s，H-8），7.62（3H，m，H-3′～5′），8.10（2H，dd，J=1.9，8.1 Hz，H-2′，6′），8.51（1H，s，6-OH），12.58（1H，s，5-OH）；¹³C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ： 163.5（C-2），104.5（C-3），182.5（C-4），146.3（C-5），130.7（C-6），149.2（C-7），94.3（C-8），151.4（C-9），106.1（C-10），130.4（C-1′），126.3（C-2′，6′），129.1（C-3′，5′），131.8（C-4′），103.6（C-1″），73.5（C-2″），76.8（C-3″），69.6（C-4″），75.6（C-5″），69.1（C-6″），100.8（C-1），73.1（C-2），77.1（C-3），70.2（C-4），75.6（C-5），61.1（C-6）。以上數據與文獻[4]一致，鑒定為木蝴蝶苷B。

化合物3 淡黃色粉末；ESI-MS m/z 255[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d₆，300 MHz）δ： 12.82（1H，s，5-OH），10.89（1H，s，7-OH），8.07（2H，dd，J=1.3，7.5 Hz，H-2′，6′），7.65（1H，t，J=7.5 Hz，H-4′），7.57（2H，t，J=7.5 Hz，H-3′，5′），6.97（1H，s，H-3），6.22（ 1H，d，J=2.0 Hz，H-6），6.53（1H，d，J=2.0 Hz，H-8）. 以上數據與文獻[5]一致，鑒定為白楊黃素。

化合物4 淡黃色粉末；ESI-MS m/z 271[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ： 12.70（1H，s，5-OH），8.06（2H，d，J=7.0 Hz，H-2′，6′），7.58（3H，d，J=7.0 Hz，H-3′～5′），6.92（1H，s，H-3），6.63（1H，s，H-8）。以上數據與文獻[6]一致，鑒定為黃芩苷元。

化合物5 黃色粉末；ESI-MS m/z 303[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ： 12.47（1H，s，5-OH），7.67（1H，d，J=2.0 Hz，H-2′），6.88（1H，d，J=8.5 Hz，H-5′），7.54（1H，dd，J=8.5，2.0 Hz，H-6′），6.18（1H，d，J=1.7 Hz，H-6），6.40（1H，d，J=1.7 Hz，H-8）。以上數據與文獻[7]一致，鑒定為槲皮素。

化合物6 淡黃色粉末；ESI-MS m/z 271[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d₆，500 MHz）δ： 12.95（1H，s，5-OH），10.54（2H，br s，7，4′-OH），7.92（2H，d，J=8.7 Hz，H-2′，6′），6.93（2H，d，J=8.7 Hz，H-3′，5′），6.77（1H，s，H-3），6.19（1H，d，J=1.8 Hz，H-6），6.48（1H，d，J=1.8 Hz，H-8）。以上數據與文獻[8]一致，鑒定為芹菜素。

化合物7 黃色針晶（甲醇）；ESI-MS m/z 287[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d₆，300 MHz）δ： 12.79（1H，s，5-OH），10.27（3H，br s，3，7，4′-OH），7.92（2H，d，J=8.7 Hz，H-2′，6′），6.92（2H，d，J=8.7 Hz，H-3′，5′），6.58（1H，s，H-6），6.74（1H，s，H-8）。以上數據與文獻[9]一致，鑒定為山柰酚。

化合物8 棕黃色粉末；ESI-MS m/z 435[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（pry-d5，300 MHz）δ： 8.35（1H，d，J=2.1 Hz，H-2′），7.26（1H，d，J=8.4 Hz，H-5′），8.13（1H，dd，J=2.1，8.4 Hz，H-6′），6.70（1H，d，J=2.1 Hz，H-6），6.67（1H，d，J=2.1 Hz，H-8），6.06（1H，d，J=5.7 Hz，Ara-H-1）。以上數據與文獻[10]一致，鑒定為槲皮素-3-O-阿拉伯吡喃糖苷。

化合物9 白色無定形粉末；ESI-MS m/z 427[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ： 4.54（1H，s，H-29a），4.68（1H，s，H-29b）；¹³C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ： 150.1（C-20），109.5（C-29），18.9（C-30），39.2（C-1），28.0（C-2），76.7（C-3），39.5（C-4），54.8（C-5），17.9（C-6），35.0（C-7），42.3（C-8），49.8（C-9），37.5（C-10），20.4（C-11），24.6（C-12），38.2（C-13），42.5（C-14），27.1（C-15），36.6（C-16），43.0（C-17），47.7（C-18），47.3（C-19），29.1（C-21），40.1（C-22），28.0（C-23），15.6（C-24），15.8（C-25），15.7（C-26），14.3（C-27），17.7（C-28）。以上數據與文獻[11]一致，鑒定為羽扇豆醇。

化合物10 白色無定形粉末；ESI-MS m/z 443[M+H]⁺；¹H-NMR（CDCl3，500 MHz） δ： 4.57（1H，s，H-29a），4.69（1H，s，H-29b），3.67（1H，m，H-2），2.97（1H，d，J=9.5 Hz，H-3）。以上數據與文獻[4]一致，鑒定為2α，3β-二羥基羽扇豆醇。

化合物11 白色粉末；ESI-MS m/z 213[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（CDCl₃，300 MHz）δ： 7.49（2H，d，J=7.5 Hz，H-2′，6′），7.36（2H，t，J=7.5 Hz，H-3′，5′），7.25（1H，t，J=7.5 Hz，H-4′），7.02（2H，dd，J=16.3 Hz，H-α，β），6.58（2H，d，J=1.6 Hz，H-2，6），6.27（1H，s，H-4）；¹³C-NMR（CDCl₃，75 MHz）δ： 140.2（C-1），138.3（C-1′），129.6（C-α），128.7（C-β），156.9（C-3，5），127.9（C-3′，5′），106.2（C-2，6），126.6（C-2′，6′），102.3（C-4），127.8（C-4′）。以上數據與文獻[12]一致，鑒定為赤松素。

化合物12 白色粉末；ESI-MS m/z 215[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（CDCl₃，300 MHz）δ： 7.28（2H，d，J=7.1 Hz，H-2′，6′），7.18（3H，t，J=8.9，7.6 Hz，H-3′～5′），6.24（2H，s，H-2，6），6.19（1H，s，H-4），2.85（4H，m，H-α，β）。以上數據與文獻[13]一致，鑒定為二氫赤松素。

化合物13 白色粉末；ESI-MS m/z 403[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（CDCl₃，500 MHz）δ： 5.72（1H，s，H-6），3.62（1H，m，H-7），3.28（1H，m，H-3）。以上數據與文獻[14]一致，鑒定為膽甾-5-烯-3，7-二醇。

化合物14 白色粉末；ESI-MS m/z 161[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（C₅D₅N，500 MHz）δ： 4.20（1H，m，H-8），3.90（1H，m，H-4）；¹³C-NMR（C₅D₅N，125 MHz）δ： 70.0（C-1），36.1（C-2），31.7（C-3），69.8（C-4），31.8（C-5），36.1（C-6），45.1（C-7），58.8（C-8）。以上數據與文獻[15]一致，鑒定為連翹環己醇。

化合物15 白色粉末；ESI-MS m/z 161[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（C₅D₅N，500 MHz）δ： 3.90（1H，m，H-4），4.20（1H，m，H-8）；¹³C-NMR（C₅D₅N，125 MHz）δ： 71.2（C-1），34.4（C-2），31.1（C-3），67.4（C-4），31.1（C-5），34.4（C-6），43.0（C-7），58.7（C-8）。以上數據與文獻[15]一致，鑒定為異連翹環己醇。

化合物16 白色粉末；ESI-MS m/z 136[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d₆，500 MHz）δ： 12.75（1H，br s，NH），8.11（1H，s，H-3），8.09（1H，s，H-6），7.04（2H，s，NH₂）。以上數據與文獻[16]一致，鑒定為zarzissine。

化合物17 淡棕色粉末；ESI-MS m/z 375[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（CD₃OD，500 MHz）δ： 7.52（2H，d，J=7.5 Hz，H-2′，6′），7.33（2H，t，J=7.5 Hz，H-3′，5′），7.23（1H，t，J=7.5 Hz，H-4′），7.07（2H，dd，J=16.3 Hz，H-α，β），6.67（1H，s，H-2），6.49（1H，t，J=2.1 Hz，H-4），6.84（1H，s，H-6），4.90（1H，d，J=7.4 Hz，H-1″），3.93～3.44（2H，m，H-2″，6″）；¹³C-NMR（CD₃OD，125 MHz）δ： 138.7（C-1），104.7（C-2），159.7（C-3），107.4（C-4），160.5（C-5），108.8（C-6），128.6（C-7），129.7（C-8），130.1（C-1′），129.6（C-2′，6′），127.6（C-3′，5′），140.9（C-4′），102.5（C-1″），74.9（C-2″），78.1（C-3″），71.5（C-4″），78.3（C-5″），62.6（C-6″）。以上數據與文獻[17]一致，鑒定為（E）-銀松素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物18 白色粉末；ESI-MS m/z 268[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d₆，500 MHz）δ： 8.34（1H，s，H-2），8.14（1H，s，H-8），5.88（1H，d，J=6.2 Hz，H-1′），7.30（2H，s，NH₂），5.41（1H，d，J=6.2 Hz，2′-OH），5.14（1H，d，J=4.7 Hz，3′-OH），5.38（1H，dd，J=4.6，7.2 Hz，5′-OH），4.61（1H，dd，J=6.1，5.2 Hz，H-2′），4.15（1H，dd，J=4.7，3.5 Hz，H-3′），3.97（1H，dd，J=3.3，3.5 Hz，H-4′），3.68（1H，m，H-5′a），3.56（1H，m，H-5′b）；¹³C-NMR（DMSO-d₆，125 MHz）δ： 156.1（C-6），152.3（C-2），149.0（C-4），139.8（C-8），119.3（C-5），87.9（C-1′），85.8（C-4′），73.4（C-2′），70.6（C-3′），61.6（C-5′）。以上數據與文獻[18]一致，鑒定為腺苷。

化合物19 白色粉末，mp 142～143 ℃，與β-谷甾醇對照品的混合熔點不下降。且經TLC多種體系檢查，確定化合物19為β-谷甾醇（β-sitosterol）。

化合物20 白色粉末，mp 290～293 ℃，與β-胡蘿卜苷對照品的混合熔點不下降。且經TLC多種體系檢查，確定化合物20為β-胡蘿卜苷（β-daucosterol）。

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Chemical constitunents of seeds of Oroxylum indicum

WEI Xiao-nan， LIN Bin-bin， XIE Guo-yong， LI Jian-wen， QIN Min-jian*

（Department of Resources Science of Traditional Chinese Medicines， State Key Laboratory of Natural Medicines，

China Pharmaceutical University， Nanjing 211198， China）

[Abstract] Objective： To study the chemical constituents in the seeds of Oroxylum indicum. Method： Twenty compounds were isolated and purified by silica gel， and Sephadex LH-20 column chromatography， and their structures were determined by spectroscopic analysis including NMR and MS. Result： Twenty compounds were isolated and identified as oroxin A （1），oroxin B （2）， chrysin （3）， baicalein （4）， quercetin （5）， apigenin （6）， kaempferol （7）， quercetin-3-O-ara-binopyranoside （8）， lupeol （9）， lup-20（29）-ene-2α，3β-diol （10）， pinosylvin （11）， dihydropinosylvin （12）， cholest-5-ene-3，7-diol （13）， rengyol （14）， isorengyol （15）， zarzissine （16）， （E）-pinosylvin-3-O-β-D-glucopyranoside （17）， adenosine（18）， sitosterol （19） and daucosterol （20）. Conclusion： Compounds 11-13 and 15-18 were obtained from the genus Oroxylum for the first time， and except compound 18， the remaining 6 compounds were obtained from the family Bignoniaceae for the first time.

[Key words] Oroxylum； Oroxylum indicum； chemical constitunents

doi：10.4268/cjcmm20130212

[責任編輯 孔晶晶]