天曼一號膠囊抗驚厥抗癲癇及鎮靜催眠作用研究

王 微，許 新，徐 婷，王冰梅

(長春中醫藥大學基礎醫學院，長春 130117)

目前市場上治療癲癇的中藥較少，使許多癲癇患者不能得到很好的治療。為此，筆者開發了以洋金花(曼陀羅)、天麻等中藥為主要成分的天曼一號膠囊，該制劑以平肝熄風、開竅定癇為主要功效，用于癲癇大發作、小發作及精神運動性發作。為證實天曼一號膠囊的藥效，筆者應用戊四唑(PTZ)、最大電休克(MES)急性驚厥模型、PTZ慢性點燃模型,進行了相關實驗研究工作。

1 材料與方法

1.1 動物 昆明種小鼠，體質量18～22 g，雌雄各半；Wastar大鼠，雄性，體質量(200±20)g，均購自長春高新醫學實驗動物研究中心。

1.2 藥品與試劑 天曼一號膠囊：由長春中醫藥大學中藥化學研究室提供，批號:20100608，用時配成20%的水溶液，口服灌胃；治癇靈：由吉林省中醫中藥研究院藥廠生產，批號:100510，用時配成40%的水溶液；戊四唑(PTZ)購自Sigma公司；戊巴比妥鈉：北京化學試劑廠進口分裝，用時配成濃度為4 mg/mL的溶液，按40 mg/kg(0.1 mL/10 g)劑量腹腔注射給藥。

1.3 儀器 YSD-4C型藥理生理實驗多用儀。

1.4 實驗方法

1.4.1 天曼一號膠囊對PTZ驚厥潛伏期的影響[1]昆明種小鼠60只，雌雄各半,隨機分為5組，每組12只，分別口服生理鹽水、20%天曼一號膠囊水溶液20、10、5 mL/kg,治癇靈10 mL/kg。1次/d，連續給藥5 d后，于末次給藥后1 h，腹腔注射PTZ 100 mg/kg，以出現持續性驚闕為指標，記錄驚闕潛伏期(min)和死亡率。

1.4.2 天曼一號膠囊對MES驚闕發生率的影響[2]采用YSD-4C藥理生理試驗多用儀，用飽和KCl溶液涂小鼠雙耳皮膚，以鱷魚夾夾住小鼠雙耳尖部,給予刺激參數為75 V、1 mA的電流,以動物出現后肢強直性伸直為驚闕指標，不發生驚闕者棄之不用。于實驗前1 d篩選出符合標準的昆明種小鼠60只，雌雄各半，隨機分為5組，每組12只,分別口服生理鹽水、20%天曼一號膠囊水溶液20、10、5 mL/kg，治癇靈10 mL/kg。1次/d，連續給藥5 d，于末次給藥后1 h，給予電刺激，記錄動物驚闕的發生率。

1.4.3 天曼一號膠囊對PTZ慢性點燃模型的影響[3]SD雄性大鼠,隔日腹腔注射PTZ 35 mg/kg，持續28 d，停藥1周后，用相同劑量PTZ測試，凡顯示連續5次2級以上驚厥的大鼠為大鼠。大鼠驚厥行為評分標準：0級，沒有行為上的發作；1級，節律性點頭或頭部顫搐；2級，陣攣性咀嚼；3級，頭部顫搐加前肢陣攣性抽搐；4級，袋鼠姿勢(上身直立)；5級，跌倒；6級，強直性驚闕。將點燃大鼠隨機分為3組，每組8只，先記錄點燃時的發作級別,再分別每日口服生理鹽水、20%天曼一號膠囊水溶液7.5 mL/kg、治癇靈水溶液7.5 mL/kg,連續口服4周，最后1次給藥1 h后，再進行相同劑量的PTZ測試，記錄發作級別，與給藥前比較。

1.4.4 天曼一號膠囊對戊巴比妥鈉引起的小鼠睡眠時間的影響[4]取昆明種小鼠，雌雄各半，體質量(20±2) g，飼養觀察1 d無異常后，根據體質量、性別將動物隨機均分5組，每組10只，即：生理鹽水組、天曼一號膠囊高、中、低劑量組、治癇靈組。

在空調控制下，環境溫度在24～25 ℃，保持實驗室安靜，給各組動物按表1劑量口服給藥，于藥后1 h后再腹腔注射閾下催眠劑量(30 mg/kg)的戊巴比妥鈉，立即計時，觀察15 min內各組動物翻正反射消失達1 min以上的動物數，計算動物的入睡率；如動物出現睡眠，則再觀察記錄動物的睡眠潛伏期及睡眠的持續時間。

1.5 統計學方法 率的比較用卡方檢驗，其他比較用t檢驗。

2 結果

2.1 天曼一號膠囊對士的寧誘發的小鼠驚厥潛伏期的影響 見表1。

表1 天曼一號膠囊對小鼠PTZ驚厥潛伏期的影響(±s,n=12)

2.2 天曼一號膠囊對小鼠MES驚闕發生率的影響 見表2。

表2 天曼一號膠囊對小鼠MES驚厥率的影響(n=12)

2.3 天曼一號膠囊對大鼠PTZ慢性點燃模型的影響 見表3。

表3 天曼一號膠囊對大鼠PTZ慢性點燃模型的影響(±s,n=12)

2.4 天曼一號膠囊對戊巴比妥鈉引起的小鼠睡眠時間的影響 見表4。

表4 天曼一號膠囊對閾下劑量戊巴比妥鈉所致小鼠睡眠時間的影響(±s,n=12)

3 討論

癲癇是臨床上的常見病、多發病，據資料統計，我國人群癲癇的終生患病率為7‰,其中近5年內仍有發作的活動性癲癇患病率5.4‰。同時該病也是疑難病，其病因是由于腦細胞異常放電所引起的反復發作的突然而短暫的腦功能失調，表現為運動、感覺、意識、植物神經、精神等不同障礙，或可兼而有之[5]。該病治療復雜且療程長，目前臨床上抗癲癇多使用西藥，可控制約80%的發作，仍有20%因耐藥或西藥的毒副作用而未能有效控制。目前臨床上應用的抗癲癇的中藥新藥較少，有明確療效的中藥亦不多[6]，故而筆者開發研究了以癲癇為功能主治的中藥新藥——天曼一號膠囊。

天曼一號膠囊的主要成分天麻具有明顯的鎮靜、抗驚厥作用；一定量的洋金花則具有明顯的中樞抑制作用。應用現代中藥制備技術，提取多味中藥的有效成分，制成天曼一號膠囊，根據上述的藥效學實驗研究結果表明，天曼一號膠囊具有明顯的對抗動物驚厥、癲癇的作用，并在連續治療PTZ點燃大鼠過程中,可能觀察到致癇大鼠的驚厥激惹狀態逐漸得到緩和，變溫順，目光及行動變靈活，從而提示其能改善癲癇動物的驚厥行為，降低其興奮性，減少癲癇發作及其程度，具有良好的抗驚厥抗癲癇作用；該制劑還具有一定的鎮靜安神作用，能明顯提高戊巴比妥鈉閾下劑量小鼠的睡眠率，與戊巴比妥鈉具有協同作用。

[1]魏偉,吳希美,李元建.藥理實驗方法學[M].4版.北京:人民衛生出版社,2010:676-678.

[2]楊蓉,王明正,成銀霞.半夏超臨界CO2乙醇萃取物抗驚厥作用的實驗研究[J].中華中醫藥雜志,2011(11)27.

[3]張文風,楊焱.大黃水提液防治小鼠癲癇的實驗研究[J].長春中醫藥大學學報,2012,28(5):780.

[4]項顆,韓大慶,周丹.睡安膠囊鎮靜催眠及抗驚厥作用的研究[J].吉林中醫藥,2011,31(2):171.

[5]解學孔.癲癇病學[M].北京:人民衛生出版社,1995:2-10.

[6]鄭香春,劉金民,江濤.中醫藥治療癲癇的幾點思考與對策[J].吉林中醫藥,2008,28(2):92.