正交實驗分析三聯(lián)退熱藥與黃芩苷對內(nèi)毒素性發(fā)熱家兔退熱作用及最佳退熱組方

段北野,鐘 民,芮家亮,謝海棠,孫瑞元,王冰梅

(1.吉林省腫瘤防治研究所，長春 130012；2.安徽省藥物臨床評價中心，安徽 蕪湖 241001；3.長春中醫(yī)藥大學(xué)，長春 130117)

對乙酰氨基酚、咖啡因、馬來酸氯苯那敏三者是經(jīng)典的退熱復(fù)方三聯(lián)組合，其比例及藥效已有大量資料支持，且已在臨床上廣泛應(yīng)用[1-2]。黃芩有效成分為黃芩苷(baiealin)[3]，屬黃酮類，黃芩苷在整體動物實驗方面表現(xiàn)出顯著的解熱作用，且在一定劑量下其作用強度可高于以臨床劑量折算的阿司匹林[4]。目前尚無退熱復(fù)方三聯(lián)組合聯(lián)合黃芩苷應(yīng)用的相關(guān)報道，本實驗應(yīng)用正交實驗法探討該聯(lián)合制劑對發(fā)熱家兔的解熱作用及最佳退熱組方。

1 材料與方法

1.1 材料 實驗家兔，由南京青龍山動物養(yǎng)殖中心提供，動物合格證號:SCXK(蘇)2007-0008;內(nèi)毒素,由廈門螯制劑廠生產(chǎn)，規(guī)格為10 u/支，生產(chǎn)批號070201；對乙酰氨基酚、咖啡因、馬來酸氯苯那敏、黃芩苷(吉林敖東延邊藥業(yè)股份有限公司提供)。溫度計由東阿阿膠阿華醫(yī)療器械有限公司提供，規(guī)格：1000，批準文號：魯藥管械(準)字99第220062號。

1.2 方法

1.2.1 實驗設(shè)計與分組 乙酰氨基酚50 mg、咖啡因3.25 mg/kg、馬來酸氯苯那敏0.2 mg/kg，將3藥作為一個單元用“A”表示,按3個劑量進行配比(即1.0、0.84、0.7單元)得出：A1：對乙酰氨基酚50 mg/kg，咖啡因3.25 mg/kg，馬來酸氯苯那敏0.2 mg/kg；A2:對乙酰氨基酚42 mg/kg，咖啡因2.73 mg/kg，馬來酸氯苯那敏0.168 mg/kg；A3:對乙酰氨基酚35 mg/kg，咖啡因2.275 mg/kg，馬來酸氯苯那敏0.14 mg/kg。

將“黃芩苷”作為另一單元，用“B”表示，初始設(shè)定人用劑量為36 mg/片，按3個劑量進行配比(即1.9、1.4、1.0單元)得出：B1：黃芩苷6.84 mg/kg，B2:黃芩苷5.04 mg/kg，B3：黃芩苷3.6 mg/kg。

以Al、A2、A3、A0(A0表示組方中沒有A單元)和B1、B2、B3、B0(B0表示組方中沒有B單元)為基礎(chǔ)相互交叉得出16個組方，結(jié)果見表1。

表1 各組方詳細情況

1.2.2 實驗?zāi)Ｐ?本實驗以家兔為致發(fā)熱模型對象，以內(nèi)毒素為造模藥物，按20 u/kg行家兔耳緣靜脈注射，造家兔發(fā)熱模型[5]。

1.2.3 實驗步驟 160只家兔，體質(zhì)量1.8～2.2 kg，雌、雄各半，隨機分16組,每組家兔10只。實驗開始前，用家兔固定架固定后靜置30 min,每隔10 min測量體溫1次，計算每只家兔3次體溫均數(shù)即為基礎(chǔ)體溫。從家兔耳緣靜脈按20 u/kg注射內(nèi)毒素，然后迅速按各組方設(shè)置的用藥劑量進行灌胃給藥，給藥后測量并記錄每只家兔用藥后0、0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、6、8 h肛溫。以溫度計插入家兔肛門6～8 cm處測量3 min為準。

按以上步驟共進行10次實驗，完成本次實驗所有內(nèi)容，測量各組家兔在不同時間點的肛溫數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果

2.1 各實驗組家兔用藥后體溫與基礎(chǔ)體溫差值的AUC變化[6]見表2。

表2 各實驗組家兔用藥后各個時間點體溫與基礎(chǔ)體溫的差值A(chǔ)UC變化(n=10)

2.2 實驗各組家兔用藥后最高點體溫與基礎(chǔ)體溫的差值均數(shù)的大小比較[7]見表3。

3 結(jié)論

本實驗中，A1B0、A2B0、A3B0 3組即單用對乙酰氨基酚、咖啡因、馬來酸氯苯那敏三聯(lián)組合的退熱藥效，結(jié)果呈現(xiàn)量效關(guān)系，說明三聯(lián)組合的劑量設(shè)計是合適的。同時顯示黃芩苷對三聯(lián)組合已有協(xié)同效應(yīng)，說明黃芩苷的劑量設(shè)計也是有效的。

在實驗各組家兔用藥后各個時間點體溫與基礎(chǔ)體溫的差值變化AUC的比較中，A1B1組和A2B1組用藥后各個時間點體溫與基礎(chǔ)體溫的差值變化AUC明顯小于其他各組，而2組之間比較無統(tǒng)計學(xué)意義，但A2B1組的藥物組方的總量小于A1B1組藥物組方；在實驗各組家兔用藥后最高點體溫與基礎(chǔ)體溫的差值均數(shù)大小比較中,A1B1、A2Bl、A1B3 3個組溫差變化最小，與其他幾組比較有統(tǒng)計學(xué)意義。

表3 實驗各組家兔用藥后最高點體溫與基礎(chǔ)體溫的差值Emax(最大效應(yīng))比較(n=10) ℃

綜上所述，在本次以家兔體溫變化為檢測指標的實驗中，A2B1(A2:對乙酰氨基酚42 mg/kg，咖啡因2.73 mg/kg，馬來酸氯苯那敏0.168 mg/kg；B1:黃芩苷6.84 mg/kg)組為最佳組方。

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