張平 許彥 伍誠意
摘 要:豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)又稱豬藍耳病,由豬繁殖與呼吸綜合征病毒引起的一種繁殖障礙與呼吸道疫病的傳染病。其特征是發熱、食欲減退、懷孕母豬后期發生流產、產死胎和木乃伊胎,幼齡動物發生呼吸道障礙。同時,歐洲基因型新變異型的出現,加重了仔豬的死亡與妊娠母豬的流產,以及與其它高熱病混合感染并難以清除,對養豬業造成了重大經濟損失。該文闡述了豬藍耳病在我國的流行趨勢,提出了接種疫苗防控、藥物防控、綜合防控等防控對策。
關鍵詞:豬藍耳病;歐洲基因型;病毒重組株;防控措施
中圖分類號 S858.28 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731(2013)09-138-03
PRRS摧毀了養豬業,在世界各地造成了巨大的經濟損失,現在被認為是在養豬密集型國家的最重要的疫病。本文就PRRS在我國的流行趨勢及防控對策等方面進行論述,以期對規模化豬場的PRRS防控有一定的指導作用。
1 豬藍耳在我國的流行趨勢
1.1 發展歷程 1995年,我國北京和廣東地區從加拿大引進的種豬中首次分離出PRRSV。1996年,PRRS在北京及周邊地區大規模暴發,隨即在華北、華東地區養豬場發生類似PRRS的疾病。1996年,從發病豬場分離到該病病原并鑒定其為PRRSV,從而確定了我國存在PRRS。
2006年夏天,我國南方出現豬高熱病。田克恭等[1],證實HP-PRRS在江西首次爆發,波及了20個省份,疫情持續了12個月,200萬頭豬感染,40萬頭豬死亡,給我國養豬業造成了巨大的損失。
2009年,HP-PRRS在安徽再次爆發,波及了周邊的湖北、河南、山東和江蘇,給這些省份養豬業造成了巨大的損失。
1.2 臨診與病變升級 典型臨床癥狀包括:在豬的耳部、嘴巴、鼻部、背部及大腿內側出現發紅、出血點、瘀斑、皮膚紅腫熱燙和丘疹。其他常見的癥狀包括高熱(40~42℃),精神不振,厭食,咳嗽,哮喘,跛行,顫抖,呼吸障礙和腹瀉。
部分內臟器官出現多個病灶部位,在肺部出現肺出血點和肺水腫;脾梗死和膀胱擴張充滿了尿液呈紅褐色;腎有多處出血點;心肌壞死;肝臟出現黃白色壞死灶或出血點;腦髓軟化,腦膜表面出現出血點;淋巴結腫大,切面有明顯的出血點;關節腫脹,關節炎及腸潰瘍。
1.3 北美NSP2和GP5的基因出現新變異 PRRSV的基因組為一單股正鏈RNA分子,由大約15 000個核苷酸組成,含有8個開放性閱讀框架(ORFs),其線性排列順序為5'-NCR-ORF1a/1b-ORF2-GP3-GP4-GP5-M-N-NCR-3'[2],如圖1。
ORFs 1a和1b占整個基因組的80%,編碼病毒復制所必需RNA復制酶。翻譯產物均為單個的多蛋白,經過加工后成為更小的非結構蛋白(Nsps)。Nsps除了對PRRSV復制發生作用外,對診斷和宿主的免疫反應也有一定的作用。Nsp2含有大量的抗原決定簇,可以被感染宿主的免疫系統所識別。
ORF5編碼的GP5蛋白是所有結構蛋白中變異程度最大的,美洲型毒株和歐洲型毒株氨基酸同源性為52%~55%,同型毒株氨基酸同源性為88%~89%[3]。
了解NSP2和GP5的基因變異情況,為制定有針對性的防控策略提供參考。
1.3.1 新發歐洲基因型 從病毒分離株(肺組織和血清)中分離了中國1型PRRS的兩個完整的基因組序列。這兩株病毒分別是BJEU06-1和NMEU09-1,在豬的初級肺泡巨噬細胞產生細胞病變效應,Marc-145不產生。序列分析比較表明,他們與歐洲型(代表株LV)、北美型(NA,基因2型,代表株VR-2332)的同源性分別為87%~91.5%、58%~58.2%。值得注意的是,這些菌株NSP2和GP3高變區的共同缺失,從來沒有報道過。系統進化樹顯示,所有新發現的中國分離株屬于在歐洲占主導地位的泛歐亞型1。然而,他們來源于不同的祖先。這些新病毒預測為從歐洲引進的PRRSV祖先的進化衍生物。這是第一次在中國大陸報道的1型PRRSV野毒。我們的研究結果證實,起源于不同祖先的中國1型PRRSV毒株、2型PRRSV毒株,具有不同的生物學特性,在中國大陸同時存在幾年了[4]。
1.3.2 新發病毒重組株 2011年,廣東省收集可疑病豬的血清和組織樣品,受感染的豬大概10周齡,顯示出與PRRS類似的癥狀。臨床分離毒株(GM2),遺傳分析表明,與VR-2332的基因組有90.2%的相似性,但是與HP-PRRS(代表毒株JXA1)的同源性較低(87.7%)。與VR-2332毒株相比,臨床分離毒株(GM2)在NSP2存在36個氨基酸的插入和兩個連續氨基酸的缺失。臨床分離毒株(GM2)與SP株、日本EDR-1株的同源性較低,分別為68.8%、70.5%,但是他們在NSP2都存在相似的氨基酸插入。使用重組分析軟件分析表明,臨床分離毒株(GM2)是MLV Resp PRRS/瑞普疫苗株和最近新發的中國野毒株的重組[5]。
2 防控對策
2.1 接種疫苗進行預防
2.1.1 疫苗種類 目前預防本病的疫苗主要是滅活苗和弱毒苗。PRRS滅活疫苗是研制較早的疫苗,1997年Bayer公司就推出了滅活疫苗PRRomiSeTM。目前,國內外已有多種針對美洲型PRRSV株(CH-1a、ISU-P、JXAl、VA1)與歐洲型PRRSV株(LV、VD-E1、VD-E2)的商品化滅活疫苗,這些疫苗免疫動物都能很好地抵御來自疫苗同源強毒株的攻擊,代表產品有Intervet公司生產的PRRomiS4滅活疫苗、Boehringer Ingelheim公司生產的Ingelvac PRRS KV滅活疫苗和Merial公司生產的PROGRESSIS滅活疫苗。但Nielsen等應用一種滅活疫苗“Cyblue”免疫公豬未取得明顯的保護效果。
與滅活苗相比,弱毒疫苗具有抗體產生快、持續時間長、保護力強,改善臨床癥狀的效果等諸多優點。目前,國內外商品化PRRS弱毒疫苗所用病毒株主要來源于ATCC-VR2332、I-1387/8、1-1140、CH-1a、JA-142、5710等PRRSV強毒株。最早的商品化弱毒疫苗是由德國Boehringer Ingleheim公司NOBL實驗室于1995年研制生產。我國自主研制的PRRS活疫苗是以CH-la株為原始種毒,通過體外細胞傳代致弱所得,于2007年正式投放市場。2009年,南京農業大學與瑞普生物公司共同研發的PRRS活疫苗(R98株)也被批準為新獸藥。有文獻報道,將高致病性PRRSV HuN4毒株經Marc-145細胞傳112代致弱后,可有效預防仔豬患高致病性PRRSV。但是,弱毒苗的安全性和效力并不可靠,不能阻止病毒的再次感染。而且,用血清學檢測方法不能分區疫苗免疫豬和自然感染豬。丹麥Mortensen等試驗證明.用PRRS弱毒苗接種母豬后,會對母豬的繁殖性能造成不利影響,甚至可通過子宮感染胎豬。另外,接種公豬則通過精液排毒,并經人工授精散毒,引起PRRS的持續感染和病毒血癥的發生。另有人用該疫苗接種公豬隨后以強毒攻擊,也發現精液排毒和精液質量下降的現象[6]。
2.1.2 加強基礎免疫 控制豬藍耳病的首要任務是做好免疫工作。各地在抓好豬瘟、口蹄疫免疫質量的同時,要按照《高致病性豬藍耳病防治技術規范》、《豬病免疫推薦方案(試行)》中所規定的科學免疫程序,積極指導規模化豬場、養豬小區開展高致病性豬藍耳病、偽狂犬病、喘氣病等免疫,有條件的還應定期進行抗體監測,確保免疫效果。
2.2 藥物防控 當豬場發生PRRS時,常常會伴有母豬產后并發癥和保育豬繼發多種呼吸道傳染病。此時單純的疫苗免疫很難取得明顯的效果。必須在采用疫苗免疫的同時,控制其他疾病的繼發感染。
2.2.1 中藥單方 在中藥治療PRRSV的研究中,許多單味中藥都有較好的抗病毒作用。例如綠原酸對PRRSV具有顯著的體外抑制和阻斷作用。此外,黃芪、連翹、穿心蓮及板藍根等在抗PRRSV方面都有較好的療效。
2.2.2 中藥復方 在PRRS的防控過程中,一些傳統的中藥復方也發揮了重要作用。例如清瘟敗毒散、白虎湯對高致性豬藍耳病的療效明顯。此外,大量實例證實,加減清瘟敗毒散、白頭翁湯、黃連解毒湯等用于控制PRRS都能取得很好的療效。
2.2.3 中西醫結合 有研究表明,采用中西醫結合防治PRRS會有更佳的療效。比如使用中藥復方牡丹皮、赤芍、連翹各10g、生石膏50g、生地黃18g、銀花藤2g、黃芩、玄參、板藍根各15g,若患豬出現高熱再加麥冬15g、水牛角30g、丹參10g,與阿莫西林粉、強力霉素等共同治療PRRS,療效較好。
2.3 綜合防控
2.3.1 種源控制 嚴把種豬引進關,目前PRRS在我國流行之廣、危害之大與種豬頻繁交換有直接關系。嚴禁從疫區、疫場引進種豬;種豬引進之前必須進行PRRS的檢測,杜絕PRRSV攜帶豬的引入,引進的種豬在隔離觀察期間進行PRRS滅活疫苗的基礎免疫。
2.3.2 環境控制 冬季豬舍做到溫度、濕度、空氣清新度適當,保溫與通風統一;夏季避免高溫高濕,加強通風降溫。執行“全進全出”制度,盡量減少豬群轉欄和混群的次數,減少應激反應和疾病傳播的風險。
2.3.3 消毒措施 嚴格消毒,消除面源污染。對生豬飼養圈舍和周圍環境,集中進行一次全面徹底消毒,及時清除豬舍糞便等排泄物,保持環境清潔。對規模化豬場、種豬場、重點地區和受威脅地區的生豬圈舍、環境每周進行1次定期消毒;同時,加強外來人員及車輛的嚴格消毒,控制人員進出生產區;對交易市場、屠宰加工場所每天進行嚴格消毒;對運載生豬及其產品的運載工具,做好裝前卸后的消毒工作。
2.3.4 疫病防控宣傳 為加大高致病性豬藍耳病防控知識宣傳力度,應組織專家深入疫區和生豬主產區,積極開展防治技術咨詢、技術交流和培訓活動;各地應組織開展多種形式的宣傳活動,宣傳有關政策措施,普及疫病防控知識,提高廣大養殖者防疫意識。
對病死豬嚴格采取“四不準一處理”的處置措施,即不準宰殺、不準食用、不準出售、不準轉運,對死豬必須進行無害化處理[7]。
3 小結
由于PRRSV具有基因(NSP2和GP5)高度變異的特點,為疫苗研究和疾病防控帶來了挑戰。在絕大多數省份,存在疫情、規模飼養和散養長期并存的問題,另外,在牲畜流通頻繁及生物安全現狀不容樂觀的背景下,就我國PRRS流行現狀而言,應用疫苗接種免疫、生物安全及藥物保健措施,對控制PRRS應是最佳的選擇。
參考文獻
[1] Kegong Tian,Xiuling Yu,Tiezhu Zhao,Youjun Feng.Emergence of fatal PRRSV variants:unparalleled outbreaks of atypical PRRS in China and molecular dissection of the unique hallma [J].PLOS ONE,2007(6):1-10.
[2]劉光清,云濤,王根榮,等.豬生殖與呼吸綜合征病毒的基因組及致病的分子基礎[J].病毒學報,2007(1):79-83.
[3]郭川.PRRS病毒GP5的基因序列分析及其重組蛋白的應用研究[D].廈門:廈門大學,2006.
[4] Nanhua Chen,Zhen Cao,Xiuling Yu.Emergence of novel European genotype porcine reproductive and respiratory syndrome virus in mainland China [J].Journal of General Virology,2011(92):880–892.
[5] Lu Wenhui,Wei Zhongyan,Zhang Guanqun.Complete Genome Sequence of a Novel Variant Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus (PRRSV) Strain:Evidence for Recombination between Vaccine and Wild-Type PRRSV Strains [J].Journal of Virology,2012,86(17):9 543.
[6]沈武玲,喬自林,令世鑫.豬繁殖與呼吸綜合征疫苗研究現狀[J].動物醫學進展,2012,33(1):117-120.
[7]雒玉芬.高致病性豬藍耳病的防治體會[J].甘肅畜牧獸醫,2011(1):16-18.
(責編:陶學軍)