母豬葡萄球菌子宮內膜炎的診治

岳建偉，王五臣，高學龍，朱青

（西平縣動物衛生監督所，河南西平 463900）

在規模化養殖場中，母豬的生產力對養豬場的經濟效益起著重要的作用，甚至直接影響整個養豬場的經濟效益。母豬子宮內膜炎是養豬業以及豬繁殖障礙病中的主要疾病之一，病因復雜，發病率有逐步上升的趨勢，已成為困擾現代規模化養殖戶的一個重要問題。目前許多集約化養豬場均存在本病，繁殖母豬發病率達20%以上，多發于配種(或發情)后14～20 d、妊娠末期2～3周的母豬和生產5 d后的哺乳母豬。該病除引起子宮內膜的炎癥和損傷外，還可以影響胎兒的受精及胚胎的生長發育和著床，甚至引起胎兒發生流產和死亡。臨床癥狀主要表現為母豬子宮復舊時間延長，產后發情時間推遲，屢配不孕或妊娠后流產等，給養豬業造成了嚴重的經濟損失。細菌感染被認為是本病的重要因素之一。據報道，發生母豬子宮內膜炎的懷孕母豬與正常懷孕母豬相比，產后初配的天數和產后受孕天數都有不同程度的增加，分別增加 14.81 d 和 31.67 d，而情期受胎率卻下降了21.36%,平均配種受胎次數增加0.51次。在防治本病的過程中，雖然許多養豬場投入了大量的人力物力，但是效果卻不甚明顯，發病率仍然不見減少，這可能是因為在本病的發病原因未調查清楚的情況下，采取的治療措施缺乏針對性，以及盲目使用抗菌藥物不能很好地防治本病的發生。

母豬子宮內膜炎是母豬子宮黏膜的粘液性或化膿性炎癥，多發于母豬產后幾天，甚至會導致流產。本實驗選擇河南某豬場的40頭患有子宮內膜炎的母豬中隨機抽取3頭，進行病原鑒定、藥敏實驗以及選擇敏感藥物和對照藥物進行治療，觀察其治療效果，并對其治愈母豬進行配種，觀察其受胎率和產仔數，為本病的治療積累臨床資料。

一、材料與方法

（一）材料

1.病料來源。河南某豬場患有子宮內膜炎的分泌物。母豬子宮內膜炎在臨床上主要表現為急性子宮內膜炎、慢性卡他性子宮內膜炎、慢性卡他性化膿性子宮內膜炎和慢性化膿性子宮內膜炎。下面就主要概括下其不同的臨床癥狀及其診斷要點。急性子宮內膜炎：母豬精神不振食欲下降或不食，鼻鏡干燥，體溫升高，拱背，頻頻排尿、努責，從陰門中不斷地排出白色或灰白色的含有絮狀物的腥臭膿性分泌物，當其臥倒時排出較多；慢性卡他性子宮內膜炎：較常見，母豬一般無明顯或輕度的全身癥狀發生，體溫略有升高，食欲下降或不食，產奶量下降，尿少赤黃，有時發情正常但是母豬屢配不孕，在沖洗子宮的過程中，會從子宮內流出液體并且其液體略微渾濁；慢性卡他性化膿性子宮內膜炎：母豬的全身反應較輕，逐漸消瘦，發情周期失常，從陰門中不斷地排出灰白色稀薄膿液，其中尾根、陰門等處上常粘有陰道排出物附著，并形成干痂；慢性化膿性子宮內膜炎：從陰門中常排出灰色黃褐色、灰白色分泌物，臥下時較多，粘著于陰門周圍皮膚及尾根。

2.試劑及其藥物。藥敏片根據藥物使用濃度自行制配，主要成分分別為特效米酰、環丙沙星、氟哌酸、土霉素、青霉素、制霉菌素、氟苯尼考、多粘菌素、氨芐青霉素和鏈霉素。葡萄球菌平板凝集抗原、葡萄球菌標準陽性血清和陰性血清。

3.培養基。普通瓊脂平板、血液瓊脂平板、肉湯培養基、五糖發酵管、葡萄糖蛋白胨水、V-P、M.R.試劑。

4.器械。生化培養箱，冰箱，冰柜，生化反應管，顯微鏡，油標卡尺，恒溫培養箱，接種環，平皿，試管，玻璃板、微量加樣器。

（二）方法

1.病料采集。采集3頭母豬子宮分泌物，對母豬外陰部用消毒液清洗，用滅菌輸精管插入子宮腔，注入生理鹽水20 ml，并立即回抽1.0～1.5 ml，然后將所得混合液移入滅菌試管內做好標記，保存在冰箱（4℃）內備用。

2.細菌分離。將采集的各樣品10 000RPM 離 心 1 min，棄 大 部 分上清，留取0.5 ml上清懸起沉淀，混勻后分別接種血瓊脂平板、巧克力平板，37℃培養24～48 h，再挑選出不同形態的單菌落進行純培養；純培養得到的菌落分別接種于S.S培養基、伊紅美藍培養基、麥康凱培養基上進行初步鑒定。

3.細菌鑒定。挑選純培養后的單菌落后，用革蘭氏染液對其染色，觀察其菌落的染色特征及形態。然后初步鑒定其類屬。將分離到的菌株接種到生化反應管對病原菌鑒別。

4.小鼠致病性試驗。將分離的純菌株培養液分別通腹腔途徑接種于小鼠，每只接種菌液0.5～1.0 ml，觀察其結果。

5.凝集試驗。用鉛筆在潔凈的玻板上方劃上方格并注明待檢血清號碼；取0.2 ml吸管按下列量加待檢血清方格內：第一格加0.08 ml，第 二 格 加 0.04 ml，第 三 格 加0.02 ml，第 四 格 加 0.01 ml，血 清用前需放室溫，使其溫度達到20℃左右；每格內加葡萄球菌平板凝集抗原0.03 ml，滴在血清附近同時又不要與血清接觸，用牙簽自血清量最小的一格起，將血清與抗原混勻，每份血清用一根牙簽同時輕輕搖動玻板使呈旋轉運動；混合完畢后靜置3～4 min然后拿起玻板輕輕轉動后將玻板置凝集反應箱上均勻加溫，使溫度達到30℃左右，3～5 min后記錄結果。為保持試驗的準確性，應平行測試3次。

6.分離致病菌的藥敏試驗。

（1） 受試藥物制備：特效米酰、環丙沙星、氟哌酸、土霉素、青霉素、制霉菌素、氟苯尼考、多粘菌素、氨芐青霉素和鏈霉素配成治療用濃度。

表1 病原菌發酵試驗結果

表2 3株細菌的藥敏實驗結果（mm）

表3 治療效果比較

表4 治愈后母豬的生產性能比較

（2）藥敏紙片的制作方法：選用質量較好的定性濾紙，用打孔器打成直徑為6 mm的圓片，每100片放入一個瓶中，高壓滅菌30 min，在60℃烘箱中烘干備用；將藥敏紙片放人配制好的抗菌藥物中，均勻吸取藥液，一般浸泡30 min即可，記錄藥物名稱，于37℃溫箱過夜，于冰箱中保存備用(可保持6個月的有效期 )。

（3）受試菌株：為子宮內膜炎的病豬分離菌株。

（4）抑菌試驗：按抑菌實驗室操作規程進行操作，將金黃色葡萄球菌接種于肉湯瓊脂培養基中，貼上藥敏試紙，37℃培養24 h，用游標卡尺測量抑菌圈直徑大小。做四次藥敏試驗然后求其平均抑菌值。抑菌圈20 mm以上為極敏感藥物；l5～20mm為高敏；10～14mm為中敏；10mm以下低敏。

7.治療試驗。

（1）試驗母豬的選擇與分組。將河南省某豬場40頭子宮內膜炎病豬進行分組治療試驗。將40頭母豬隨機分成2組，治療組A為30頭病豬，對照組B為10頭病豬。

（2）子宮內膜炎治療方案。

a.治療組A:對受試母豬先用l0～20 g/L的鹽水溶液沖洗子宮，然后分別按劑量3 mg/kg頭孢噻呋鈉注入子宮，每隔24 h用藥1次，連用3次為1個療程。

b.對照組B：對受試母豬先用10～20 g/L的鹽水溶液沖洗子宮，不注射任何藥物，按平常飼養方式正常飼養。

（3）子宮內膜炎療效判定。

治愈：全身癥狀消失，精神食欲恢復正常，分泌物透明清亮，陰道檢查陰道壁顏色呈粉紅色，子宮炎癥消失，外陰部腫脹消失，正常發情妊娠。

有效：用藥后全身癥狀基本消失，精神食欲好轉，外陰部腫脹不明顯，子宮炎癥緩解，子宮分泌物基本接近正常，陰道內有少量異物流出。

無效：用藥后全身癥狀未消失或加重，精神食欲無明顯改觀，子宮炎癥無變化或加重，子宮分泌物未見減少，甚至惡化，與用藥前沒有變化。

（4）對治愈后的母豬進行后期觀察。對治愈的母豬和對照組母豬在正常發情后采用人工授精的方法進行配種，精液密度為0.45億／ml，活力為0.9級，每頭每次輸入45 ml。母豬在第一次輸精后，間隔6～8 h再重復輸輸精。配種后分別統計各組母豬的受胎率及產仔數情況。

二、結果

（一）分離菌的形態特征顯微鏡下，菌落為革蘭氏陽性的呈單個，成對或排列成葡萄串狀、無芽胞、無鞭毛細菌。

（二）細菌在各培養基上形態待定在普通瓊脂平板培養基上表現為菌落呈圓形、濕潤、不透明、邊緣整齊、表面隆起的金黃色光滑菌落；在血液瓊脂平板菌落形成明顯的溶血；在肉湯培養基中菌落顯著渾濁并且形成沉淀，在管壁上形成菌環。

（三）生化試驗結果幾種菌落分別在葡萄糖、麥芽糖、甘露糖、山梨醇、棉子糖、木膠糖、蔗糖、乳糖中均為產酸不產氣。其基本符合葡萄球菌的生化試驗結果（見表1）。

（四）動物試驗結果小鼠于接種后24～72 h內死亡，剖檢、涂片染色、鏡檢，從小鼠體內分離到與接種菌株相同的細菌。

（五）凝集試驗結果被檢血清與標準陽性血清發生凝集反應，因此可以確定為該病原菌為葡萄球菌。

（六）藥敏試驗結果從表2中可以看出頭孢噻呋、林可霉素和特效米酰對3種細菌為高度敏感；氟哌酸各對其為高度敏感，慶大霉素、土霉素和青霉素為低敏感，青霉素對革蘭氏陽性菌及其某些革蘭氏陰性菌有很好的抗菌效果，例如葡萄球菌，肺炎球菌的球菌高度敏感，但本次試驗中青霉素對其為低敏感度。分析其原因可能為該豬場長年超量應用青霉素用于治療和預防，導致豬體對青霉素產生耐藥性。因此,希望有條件的豬場應根據藥敏試驗結果選擇敏感藥物,且應注意交替用藥,按療程投藥,這樣才能收到較好的治療效果。

（七）治療試驗結果從表3可以看出，A組使用頭孢噻呋治療，其有效頭數、有效率、治愈頭數和治愈率分別為29頭、96.7%、27頭和90%；B組為對照組未使用任何藥物治療，有效頭數、有效率、治愈頭數和治愈率分別為8頭、80%、2頭和20%；A組的有效率與治愈率和B組的相比差異顯著(P<0.05)。表明用頭孢噻呋的治療效果明顯好于對照組。

（八）治愈后母豬的后續生產力觀察由表4可以看出，經藥物治療后，2個試驗組共有28頭母豬治愈，正常發情配種后，A組的受胎頭數、受胎率和產仔率分別為26頭、93%和96.2%；健康對照組( B組)的受胎頭數、受胎率和產仔率分別為28頭、93.3%和96.4%。經兩個樣本百分數差異顯著性檢驗，A組和對照組（B組）兩組之間，母豬受胎率差異不顯著；經單因素方差分析進行差異顯著性檢驗，A組和對照組兩組之間，產仔率差異均亦不顯著。

三、討論

從3頭典型的母豬子宮內膜炎分泌物中分離出的致病菌株，經過一系列的病原分離，生化試驗，血清學試驗可以確診為葡萄球菌。

（一）母豬子宮內膜炎發生原因母豬子宮內膜炎病原微生物比較復雜，不同地區不同情況下分離到的細菌種類和比例也有差異。根據分離到的菌株數和病原菌的感染情況，可知葡萄球菌菌株數量多、感染率最高。葡萄球菌是常見的感染細菌，可引起急性和化膿性炎性感染，這兩種細菌通常在母豬抵抗力降低、配種、產后最易感染。細菌可經子宮頸進入子宮，引起子宮內膜炎，尤其是產后易并發子宮內膜炎。本研究中分離的主要細菌葡萄球菌表現為單獨致病，同時在許多情況下也可繼發感染與其他細菌共同導致該病的發生，這種結果也進一步驗證了母豬子宮內膜炎病原感染的復雜性。

引起該病的原因的種類很多，除上述提到的微生物感染外，還有其他幾種原因，主要為衛生環境不好，豬臥下時身體上沾有污染的糞尿，產房內長期不進行清掃，圈舍衛生條件差潮濕，產前沒有進行消毒；操作時的不規范也可導致該病發生，主要是在人工授精過程不規范的輸精，使輸精器械對子宮造成損傷，輸精次數頻繁等。分娩時的各種刺激因素如產后子宮遲緩、難產、陰道脫出、胎衣不下等均可誘發該病的發生。

（二）母豬子宮內膜炎治療原則在進行治療子宮內膜時，藥物選擇非常關鍵，本次試驗中，篩選的高敏藥物進行治療該病時，效果明顯比不敏感的藥物青鏈霉素效果好；母豬的使用年限一般為4～5年，由于青霉素使用非常頻繁，反復多次超量使用導致細菌的耐藥性產生，從而影響青霉素的治療療效。這點啟示我們在以后的疾病治療過程中，應該強調科學用藥，有條件的豬場可以自己進行敏感藥物的篩選，選擇高敏藥物治療；沒有條件的豬場應盡量與當地的獸醫衛生服務站合作，做好藥物篩選工作。在選擇合適的藥物后還要注意換藥，減少同一或同類藥物使用的頻率，減少或降低細菌耐藥性發生機率。隨著現代化養殖業的發展，各類疾病的病原在不斷變化，而且豬子宮內膜炎的發病原因十分復雜，因此，在治療前有必要做細菌學檢查，明確其病原菌，然后篩選敏感藥物來提高療效。

母豬子宮內膜炎要及時徹底治療，不要延誤有效治療時間，避免轉為慢性炎癥。對提高母豬的繁殖能力及養殖效益都非常重要。該病的發生又分急性子宮內膜炎和慢性子宮內膜炎，一般急性子宮內膜炎易治療，且治愈時間短，效果好。如果治療不及時或者治療不徹底，可轉為慢性子宮內膜炎。慢性子宮內膜炎治愈時間長且易反復發作，部分母豬治療效果不好，易造成屢配不孕，給豬場帶來較嚴重的經濟損失。因此在母豬子宮內膜炎的治療過程中，有效治療時間很關鍵。

（三）母豬子宮內膜炎的預防措施預防子宮內膜炎，必須加強懷孕母豬的飼養管理，豬欄應保持清潔衛生，特別是母豬上產床前，母豬及產床一定要清洗干凈，徹底消毒。夏季做到防暑降溫，冬季保暖，欄舍清潔、干燥、通風；防止一切不良因素的刺激，增強機體的抵抗力；注意營養，防止維生素缺乏，提供全價飼糧，并飼喂一些青飼料，對防止母豬子宮內膜炎的發生極為重要。配種前，陰戶、臀部用消毒液清洗，盡量做到無菌操作；接產時，嚴格消毒，避免接產時造成子宮內膜的損傷和細菌的感染；產房要進行嚴格消毒。

四、結論

通過提取患有典型的子宮內膜炎母豬的子宮分泌物后進行細菌的分離鑒定、生化試驗、凝集試驗后確定引起該病發生的主要感染菌為葡萄球菌。通過藥敏試驗之后，用高敏藥物頭孢噻呋對其治療后治愈率達到90%，對治愈后的母豬進行后期生產性能與正常母豬進行比較，受胎率、產仔數沒有明顯差異。