Hb＜3g/L溶血的標本對常規生化檢驗結果的影響

王輝莉

（和龍市人民醫院，吉林 和龍 133500）

Hb＜3g/L溶血的標本對常規生化檢驗結果的影響

王輝莉

（和龍市人民醫院，吉林 和龍 133500）

目的 探討 Hb 濃度低于 3.0g/L 的溶血血清標本中常規生化檢驗指標的變化。方法 選取我院進行健康體檢的受檢者 40 例，檢測溶血與不溶血兩種血清后，將兩者以不同比例混合，制備成 Hb 濃度為 Hb 低于 1.0g/L 和 1.0～3.0g/L 的兩種溶血血清，再進行檢測。結果 Hb 低于 1.0g/L 的溶血血清相比非溶血血清，生化檢測中 AST、ALT、ALP、LDH、CK、HBDH 濃度均顯著升高（P ＜ 0.05），CK-MB濃度有所降低但不具有統計學意義（P ＞ 0.05）。Hb 濃度在 1.0g/L 與 3.0g/L 之間的溶血血清相比非溶血血清，AST、ALT、ALP、LDH、CK、CK-MB、HBDH 濃度均顯著升高（P＜ 0.01）。結論 輕中度溶血標本都會使常規生化檢驗中大部分檢測結果失真，溶血程度越高檢測結果越不可信。

Hb ＜ 3g/L；溶血標本；常規；生化檢驗

在生化檢驗中，溶血、乳糜血及黃疸是影響檢驗結果準確性3個常見的主要因素，其中尤以溶血影響最為常見[1]。溶血除常見的紅細胞破壞外，血小板、白細胞等血細胞破壞所釋放的某些胞內成分也可干擾或影響臨床生化項目測定。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院進行健康體檢的受檢者40例，均早晨空腹采血6mL，分別注入兩支真空采血管。去其中一支真空采血管將管帽打開使管內外氣壓平衡，拔掉空針頭，將血液鍵入管中，以每分鐘3000轉的速度離心處理，時間為6min，分離血清后即為不溶血的血清。另外一支采血管將空針頭直接插入真空管帽上，將血液壓入管內，利用管內的氣壓負壓與擠壓力產生溶血，以每分鐘3000轉的速度離心處理，時間為6min，分離血清后即為溶血的血清。血清中不存在肉眼可見的脂血與黃疸。

1.2 儀器與試劑

生化檢測儀器為日立7020型全自動生化分析儀，生化檢測試劑為四川邁克，質控品為上海科華東菱試劑提供。

1.3 檢測方法

檢測內容包括血清中AST、ALT、ALP、LDH、CK、CK-MB、HBDH，操作方法均根據試劑盒說明書的內容嚴格進行。檢測溶血與不溶血兩種血清后，將兩者以不同比例混合，制備成Hb濃度為Hb低于1.0g/L和1.0～3.0g/L的兩種溶血血清，再進行檢測。

1.4 統計學方法

檢驗指標資料的數據采用SPSS13.0統計學軟件分析，計量單位以表示，組間以t檢驗，以P＜0.05為具有統計學意義。

2 結 果

不同Hb濃度血清溶血標本與非溶血標本的生化檢測結果，見表1。Hb低于1.0g/L的溶血血清相比非溶血血清，生化檢測中AST、ALT、ALP、LDH、CK、HBDH濃度均顯著升高（P＜0.05），CKMB濃度有所降低但不具有統計學意義（P＞0.05）。Hb濃度在1.0g/L與3.0g/L之間的溶血血清相比非溶血血清，AST、ALT、ALP、LDH、CK、CK-MB、HBDH濃度均顯著升高（P＜0.01）。

3 討 論

溶血對臨床生化檢驗的干擾主要有以下3種類型：①血細胞高濃度組分逸出，使血漿分析物濃度增加。如果血細胞中某一分析物濃度大大高于血漿，則溶血無疑會導致血漿中泛成分濃度增高，多種生化成分紅細胞中的濃度比血漿中的濃度有不同程度的增高，其中精氨酸酶活性比血漿高1500倍以上[2]。乳酸脫氫酶增高180倍，這是因為紅細胞中含豐富的乳酸脫氫酶；某些因素引起血小板破壞（如某些商品乳酸脫氫酶試劑中含有表面活性劑或測定前用蒸餾水稀釋）也可使乳酸脫氫酶測定增高，其增高程度與血小板數量多少有關。在血漿制備、儲存和測定的諸環節上都有可能發生不同程度的血小板破壞，影響乳酸脫氫酶測定，而使用血清測定乳酸脫氫酶只要不發生溶血，結果較穩定，故有人推薦用血清測定乳酸脫氫酶。在人紅細胞中門冬氨酸氨基轉移酶和谷氨酸氨基轉移酶的活性分別是血漿中的38倍和約7倍[3]。在血紅蛋白（Hb）1.14g/L±0.27g/L的溶血條件下，血清門冬氨酸氨基轉移酶和谷氨酸氨基轉移酶活性輕微增高。當Hb＞1.5g/L的溶血可使血清門冬氨酸氨基轉移酶的活性明顯增高。當Hh＞3.0 g/L的溶血血清谷氨酸氨基轉移酶明顯升高。②血紅蛋白對分光光度測定中吸光度的干擾。溶血能引起可見光譜的短波長段（300-～500nm）的吸光度明顯增高。不同類型的分析方法受血紅蛋白吸光度干擾的程度不同，動力學法受血紅蛋白吸光度的干擾最小，而經典的終點比色法則最易受血紅蛋白干擾，導致樣品分析物測定濃度高于實際濃度。③某些血細胞組分對化學反應的干擾。Hb是各種重氮試劑法測定血清總膽紅素的重要干擾因素，但是不同方法受干擾的程度可不同。其中J-G法受溶血干擾小，Hb2.5g/L的溶血引起的負干擾一般＜15%[4]。SDS加速劑法和二氯苯胺法受溶血干擾較大，Hbl.0g/L的溶血即可使總膽紅素測定值下降17%[5]。血紅蛋白對重氮劑法測定總膽紅素的干擾機制可能是：血紅蛋白與膽紅素或膽紅素重氮反應的中間產物羥基吡咯亞甲基甲醇結合，形成血紅素膽紅素或血紅素一羥基吡咯亞甲醇復合物，從而阻止第二個偶氮膽紅素分子的形成，使測定結果低于真值。用動力學法測定血清肌酸激酶時，溶血干擾CK測定，主要是由于紅細胞腺苷酸激酶（AK）參與CK檢測反應所致。盡管在CK測定中加人了競爭性AK抑制劑——磷酸腺苷，但由于后者在較高濃度時對CK也有非特異性抑制作用，其終濃度一般限制在5mmol/L，在此條件下AK活性只能抑制88%，因此AK干擾不能完全消除。此外，溶血血清CK測定還受紅細胞CK的影響，紅細胞CK活性比血漿高14倍。當Hb＞2.5g/L的溶血時即可干擾CK的測定，使測定結果高于真值；當Hb＞3.4g/L的溶血時，血清CK增高22%；當Hb＞2.8g/L的溶血時血清CK的活性由無溶血時的57U/L增至77U/L。溶血對動力學法測定血請rGT呈負干擾，Hb3.4g/L的溶血血清rGT測定值降低22%。其抑制機制尚不清楚，推測可能與白細胞和血小板釋放的甘氨酸有關。已知甘氨酸是該酶的抑制劑，血小板中甘氨酸含量是血漿的10～15倍。

表1 不同Hb濃度血清溶血標本與非溶血標本的生化檢測結果（χ—±s，n=60）

[1]陰斌霞,王香玲,趙麗華,等.溶血對生化檢驗準確性的影響及糾正[J].現代檢驗醫學雜志,2007,22(6):25-29.

[2]朱正林,李玉華,張寶成,等.溶血對部分生化檢驗項目結果的影響[J].武警醫學,2010,21(1):73-74.

[3]楊振東,姚文思.標本溶血對臨床常規生化檢驗結果的影響及對策[J].中國實用醫藥,2011,6(26):4-5.

[4]苗青蘭.標本溶血對常規生化檢驗項目的影響[J].醫學信息(上旬刊),2011,24(2):996-997.

[5]黃四爽,熊娟.溶血標本對部分常規生化檢驗結果的影響及處理方法[J].檢驗醫學與臨床,2012,9(12):1496-1497.

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