CIK細胞治療惡性實體瘤的臨床療效評價

羅利瓊 王繼紅 霍 丹 張小麗 張 高 胡 林 馬玉芳*

（武漢科技大學(xué)附屬天佑醫(yī)院腫瘤科，湖北 武漢 430064）

CIK細胞治療惡性實體瘤的臨床療效評價

羅利瓊 王繼紅 霍 丹 張小麗 張 高 胡 林 馬玉芳*

（武漢科技大學(xué)附屬天佑醫(yī)院腫瘤科，湖北 武漢 430064）

目的 評價 CIK 細胞治療惡性實體瘤的臨床療效及安全性。方法 選擇惡性實體瘤患者 48 例，分為單純化療組、CIK 細胞聯(lián)合化療治療組、CIK 細胞治療組。采用卡氏評分（Karnofsky）評價生活質(zhì)量及體力改善狀況；通過比較客觀有效率和疾病控制率評價近期療效；從治療開始至患者死亡或最后 /次隨訪時間止，觀察并記錄患者的生存時間；評價 CIK 細胞治療安全性。結(jié)果 CIK 治療組患者治療后一般情況有所改善，特別是在改善食欲和睡眠，增加體質(zhì)量和體力方面。這可能是 CIK 細胞治療的優(yōu)勢所在。但是三組患者在客觀有效率方面和疾病控制率方面，單純化療組和 CIK 細胞聯(lián)合化療治療組，與 CIK 治療組有顯著性差異（P＜ 0.05）。在生存時間方面 CIK 治療組患者的生存時間低于單純化療組和 CIK 細胞聯(lián)合化療治療組（P＜ 0.05）。在整個臨床觀察期間，除有 2 例患者出現(xiàn)低熱癥狀外，未出現(xiàn)其他不良反應(yīng)。結(jié)論 CIK細胞免疫治療能改善患者的一般狀況，安全性好，是惡性實體瘤的患者在進行化療治療之余的有效輔助治療手段。

細胞因子誘導(dǎo)的殺傷細胞；過繼免疫療法；惡性實體瘤

腫瘤的生物治療具有較強的針對性、特異性、有效性，對正常造血及免疫系統(tǒng)、主要器官無負面影響和明顯毒性，漸已成為腫瘤治療的第四種治療形式。腫瘤生物治療主要有5類：細胞因子治療、單克隆抗體及其耦聯(lián)物技術(shù)、基因治療、過繼細胞治療和腫瘤疫苗治療[1-6]。CIK細胞治療可以用于各種各期惡性實體腫瘤在手術(shù)、放化療等治療后的鞏固治療，以提高機體的免疫功能，抑制腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移；也可以用于不適宜做手術(shù)、放化療等治療的腫瘤患者，以提高機體免疫功能和延長生存期。目前，CIK細胞治療被認為是具有較好的應(yīng)用前景的過繼細胞治療[7-11]。惡性實體瘤疾病采取了各種治療措施，患者的預(yù)后仍然可能是不佳，生存期短，特別是晚期惡性實體瘤患者的一般情況則是每況愈下，機體消耗明顯。目前，越來越多的體內(nèi)體外實驗結(jié)果證實：CIK細胞治療具有毒不良反應(yīng)少和延長生存期等優(yōu)點，是一種相對低毒和有效的細胞治療。本研究比較單純化療、化療聯(lián)合CIK細胞序貫治療、CIK細胞治療的近期療效和生存期，并評價對惡性實體瘤患者一般情況的改善，為以后的廣泛應(yīng)用提供一定的臨床依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 CIK細胞的制備

CIK細胞由深圳市中美康士生物科技有限公司提供。在深圳市中美康士生物科技有限公司的生物細胞中心GMP實驗室進行誘導(dǎo)、培養(yǎng)，每次換液后及細胞回輸前進行無菌檢測，每次檢測結(jié)果均為陰性，方可給患者進行回輸。CIK細胞需要經(jīng)過12～14d培養(yǎng)，單次回輸細胞量約為（1～2.0）×109。

1.2 病例選擇

選擇2008年7月至2012年7月醫(yī)院腫瘤科惡性實體瘤的患者48例分組研究，主要為非小細胞肺癌。患者中位年齡68（44～79）歲；預(yù)計生存期≥3個月；KPS評分≥60；無嚴重心、肝、腎功能損害。

1.3 治療分組

將所有患者隨機分為三組：①單純化療組（A組）：采用方案化療，共2～4周期；②CIK細胞聯(lián)合化療治療組（B組）：采用化療治療（2～4周期）和CIK細胞聯(lián)合序貫治療（2～4周期），在化療結(jié)束后1個月開始將制備好的CIK細胞回輸入患者體內(nèi)。回輸前給予患者肌內(nèi)注射鹽酸異丙嗪和地塞米松預(yù)防過敏。每次回輸CIK細胞數(shù)為（1.0～2.0）×109左右，間隔4周治療/次，共回輸治療2～4次。③CIK細胞治療組（C組）：每次回輸CIK細胞數(shù)為（1.0～2.0）×109左右，間隔4周治療/次，共回輸治療2～4次。

表2 在2～4周期治療后三組患者客觀緩解率和疾病控制率比較（n=48，χ—±s）

1.4.1 生活質(zhì)量評估生活質(zhì)量及體力改善狀況

采用卡氏評分（Karnofsky）評價，提高超過10分者為改善，下降超過10分者為惡化，提高或下降少于10分者為穩(wěn)定。評分總提高率為改善+穩(wěn)定。

1.4.2 近期療效評價

按RECIST實體瘤的近期療效標準分為完全緩解（CR）、部分緩解（PR）、疾病穩(wěn)定（SD）、疾病進展（PD）4級。每兩周期治療后進行療效評價。客觀有效率（ORR）=（CR+PR）/總例數(shù)×l00%，疾病控制率（DCR）=（CR+PR+SD）/總例數(shù)×l00%。

1.4.3 生存時間分析

從治療開始至患者死亡或末次隨訪時間截至，觀察三組患者生存期，無瘤生存狀況，以定期進行的影像學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)病灶為止。

1.4.4 安全性評價

毒副反應(yīng)觀察在靜脈回輸過程后，密切觀察患者的不良反應(yīng)，特別注意觀察患者的發(fā)熱情況，及時予以處理。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理，數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差（χ—± s）表示，組間比較采用單因素方差分析法，近期療效比較采用卡方檢驗，Kaplan-Meier法描述生存時間（P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義）。

2 結(jié) 果

2.1 生活質(zhì)量評估及體力改善狀況

CIK治療組患者治療后一般情況有所改善，特別是在食欲、睡眠改善（90%），體質(zhì)量增加方面（85%），體力改善方面（95%），比較明顯。不難得出，CIK治療組患者在一定程度上可以改善腫瘤進展引起的食欲差和睡眠差等問題，而且可增強患者的食欲，增加體質(zhì)量。細胞治療前后Karnofsky評分結(jié)果比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05），見表1。

表1 CIK細胞治療前后Karnofsky評分（n=48，χ—±s）

2.2 近期療效評價

在2～4周期治療后三組患者在客觀有效率方面，單純化療組和CIK細胞聯(lián)合化療治療組，與CIK治療組有顯著性差異。但在疾病控制率方面，CIK細胞聯(lián)合化療治療組，優(yōu)于單純化療組和CIK治療組；單純化療組和CIK治療組無統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05），見表2。

2.3 生存時間分析

三組患者治療后全部進行隨訪，至2012年7月隨訪6～40個月，中位隨訪27個月。單純化療組總生存期為6～40月，中位生存期為18個月；CIK細胞聯(lián)合化療治療組患者總生存期為8～42個月，中位生存期為20個月；CIK治療組患者總生存期為4～20個月，中位生存期為6個月。三組比較有明顯差別，CIK治療組明顯低于單純化療組和CIK細胞聯(lián)合化療治療組（P＜0.05）。

2.4 安全性評價

僅有2例患者出現(xiàn)發(fā)熱癥狀，但體溫在37.8～38.5℃，持續(xù)1～2 d，經(jīng)對癥處理均好轉(zhuǎn)。未見其他的不良反應(yīng)。

3 討 論

細胞因子活化殺傷細胞輸注治療（CIK），又稱為細胞因子誘導(dǎo)的殺傷細胞。它是將人的外周血單個核細胞在體外用多種細胞因子（如IL-2，IL-1α，IFN-γ等）共同培養(yǎng)一段時間后獲得的一群異質(zhì)細胞，由于同時表達CD3和CD56兩種兩膜蛋白分子，兼具有T淋巴細胞的抗腫瘤活性和NK細胞的非MHC限制性殺瘤優(yōu)點，故具有殺瘤活性高、殺瘤譜廣等特點。因此，CIK細胞免疫治療因其低毒有效的特點，在臨床上越來越受到重視[12-15]。本實驗以本院治療的惡性實體瘤的患者（主要為晚期非小細胞肺癌的患者）為研究對象，在整個臨床觀察期間，除有2例患者出現(xiàn)低熱癥狀外，未出現(xiàn)其他不良反應(yīng)，表明CIK細胞聯(lián)合化療的治療方案是比較安全的。同時，CIK治療組患者治療后一般情況有所改善，特別是在改善食欲和睡眠，增加體質(zhì)量和體力方面。這可能是CIK細胞治療的優(yōu)勢所在。但是三組患者在客觀有效率方面和疾病控制率方面，單純化療組和CIK細胞聯(lián)合化療治療組，與CIK治療組有顯著性差異（P＜0.05）。在生存時間方面CIK治療組患者的生存時間低于單純化療組和CIK細胞聯(lián)合化療治療組。這可能與CIK細胞通過調(diào)動機體的免疫系統(tǒng)來抵抗腫瘤細胞的增殖和擴散能力及持續(xù)的時間有關(guān)。本實驗結(jié)果表明，CIK細胞免疫治療安全性好、不良反應(yīng)少，能改善患者的一般狀況，是惡性實體瘤的患者在進行化療治療之余的有效輔助治療手段。

[1]Blattman JN,Greenberg PD.Cancer immunotherapy: a treatment for the masses[J].Science,2004,305(5681):200-205.

[2]Hoffman DM,Gitlitz BJ,Belldegrun A,et al.Adoptive cellular therapy[J].Seminars in Oncology,2000,27(2):221- 233.

[3]Kim YJ,Lim J,Kang JS,et al.Adoptive immunotherapy of human gastric cancer with ex vivo expanded T cells[J].Arch Pharm Res, 2010,33(11):1789-1795.

[4]陳廣華,吳德沛.自然殺傷細胞過繼性免疫治療研究進展[J].中國實驗血液學(xué)雜志,2010,18(3):798-802.

[5]Schoenfeld J,Jinushi M,Nakazaki Y,et al.Active immunotherapy induces antibody responses that target tumor angiogenesis[J]. Cancer Res,2010,70(24):10150-10160.

[6]Gomes AQ,Martins DS,Silva-Santos B.Targeting gammadelta T lymphocytes for cancer immunotherapy:from novel mechanistic insight to clinical application[J].Cancer Res,2010,70(24):10024-10027.

[7]Linn YC,Hui KM.Cytokine-induced NK-like T cells:from bench to bedside[J].J Biomed Biotechnol,2010,2010(43):435745-435750.

[8]Shi M,Zhang B,Tang ZR,et al.Autologous cytokine-induced killer cell therapy in clinical trial phase I is safe in patients with primary hepatocellular carcinoma[J].World J Gastroenterol,2004,10(8): 1146-1151.

[9]Sa YL,Hua YK,Yan XM,et al.The preliminary clinical application of adoptive immunotherapy with auto-cytokine induced killer cells in the patients with malignant solid tumor [J].Pract J Cancer, 2006,21(1):11-14.

[10]Zhao M,Wu PH,Zeng YX,et al.Cytokine- induced killer cell fusion to lower recurrence of hepatocellular carcinoma after transcatheter arterial chemoembolization sequentially combined with radiofrequency ablation:a randomized trial [J].Zhonghua Yi Xue Za Zhi, 2006,86(26):1823-1828.

[11]Olioso P,Giancola R,Di Riti M,et al.Immunotherapy with cytokine induced killer cells in solid and hematopoietic tumours:a pilot clinical trial[J].Hematol Oncol,2009,27(3):130-139.

[12]Bonanno G,Iudicone P,Mariotti A,et al.Thymoglobulin,interferonγand interleukin-2 efficiently expand cytokine-induced killer (CIK) cells in clinical-grade cultures[J].J Transl Med,2010,8(1): 129-137.

[13]Helms MW,Prescher JA,Cao YA,et al.IL-12 enhances efficacy and shortens enrichment time in cytokine-induced killer cell immunotherapy[J].Cancer Immunol Immunother,2010,59(9):1325-1334.

[14]Wu C,Jiang J,Shi L,et al.Prospective study of chemotherapy in combination with cytokine-induced killer cells in patients suffering from advanced non-small cell lung cancer [J].Anticancer Res,2008, 28(6B):3997-4002.

[15]Kimura H,Iizasa T,Ishikawa A,et a l.Prospective phaseⅡstudy of post-surgical adjuvant chemo-immunotherapy using nautologous dendritic cells and activated killer cells from tissue culture of tumordraining lymph nodes in primary lung cancer patients[J].Anticancer Res,2008,28 (2B):1229-1238.

Evaluation of the Clinical Efficacy of CIK Cell for Malignant Solid Tumors

LUO Li-qiong, WANG Ji-hong, HUO Dan, ZHANG Xiao-li, ZHANG Gao, HU Lin, MA Yu-fang
(Department of Oncology, the Tianyou Hospital Affiliated to Wuhan University of Science and Technology, Wuhan 430064, China)

ObjectiveTo evaluate the clinical efficacy and secruity of CIK cell for malignant solid tumors.Methods48 patients who suffered from malignant solid tumors, were divide into the chemotherapy alone group, CIK cells combined with chemotherapy treatment group and CIK treatment group. Evaluation of the quality of life and physical strength to improve the situation with karnofsky score; to compare overall response rate and disease control rate among the three groups; death from the start of treatment to patients or follow-up time for the last / time to observe and record the patient's survival time; security evaluation CIK cell therapy.ResultsCIK treatment group particularly improved appetite and sleep, increased body weight and physical aspects. This may be the advantage of the CIK cell therapy. But the three groups of patients in overall response rate and disease control rate, the chemotherapy alone group and CIK cells combined with chemotherapy treatment group, a significant difference (P＜0.05) with CIK treatment group. CIK treatment group patients survival time is less than the chemotherapy alone group and CIK cells combined with chemotherapy treatment group (P＜0.05). Throughout the clinical observation period, except for two cases of patients with low-grade fever symptoms, not the other adverse reactions.ConclusionCIK cell immunotherapy can improve the patient's general condition, security is an effective means of adjuvant therapy in patients with malignant solid tumors during chemotherapy treatment.

Cytokine-induced killer cells (CIK); Adoptive immunotherapy; Malignant solid tumors

R730.58

：B

：1671-8194（2013）08-0034-03

*通訊作者