CyclinD1在皮膚鱗狀細胞癌中的表達及意義

肖 明 趙學堂

（壽光市皮膚病醫院，山東 壽光 262700）

CyclinD1在皮膚鱗狀細胞癌中的表達及意義

肖 明 趙學堂

（壽光市皮膚病醫院，山東 壽光 262700）

目的 探討 cyclinD1 在皮膚鱗狀細胞癌中的異常表達及與生物學行為的關系。方法 應用免疫組化 PV9000 法檢測 52 例皮膚鱗狀細胞癌中 p16 和 cyclinD1 的表達水平。結果 52 例皮膚鱗狀細胞癌中 cyclinD 的陽性表達率為 67.3%。結論 cyclinD1 的異常表達在皮膚鱗狀細胞癌的發生發展中起重要作用，可作為判斷惡性程度，評估預后的指標。

鱗狀細胞癌；免疫組織化學；cyclinD1

皮膚鱗狀細胞癌是皮膚科常見惡性腫瘤。腫瘤的發生發展是一個多步驟的過程，是多種癌基因的激活和抑癌基因的失活或缺失、細胞凋亡基因表達的紊亂導致的。CyclinD1是作為細胞周期重要的正調控因子，在腫瘤的發生發展過程中起著重要作用[1]本研究采用免疫組化技術，本研究采用免疫組化PV9000法檢測皮膚鱗狀細胞癌組織和正常皮膚組中CyclinD1表達情況，試圖探討其表達與臨床病理特征的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2006年～2011年壽光市皮膚病醫院病理科保存的活檢或手術石蠟標本，經2名病理醫師HE染色確定為皮膚鱗狀細胞癌。共46例，其中男20例，女26例；年齡41～70歲，平均60.3歲。按Broders 病理分級法將其分為：G1是13例、G2是24例、G3是15例。對照組是15例正常的皮膚組織，來自皮膚活檢術或者是外科手術中皮損皮膚的切除部分。

1.2 方法

1.21 使用的主要試劑有：鼠抗人單克隆CyclinD1抗體、PV9000免疫組化試劑盒、EAB顯色試劑盒、PBS緩沖液均購于北京中杉金橋生物試劑公司。

1.2.2 免疫組織化學方法：嚴格按照PV9000試劑盒的步驟順序進行。實驗時用已經明確知道的CyclinD1陽性的前列腺的組織切片作為實驗時的陽性對照，而用PBS作為實驗的陰性對照。

1.2.3 結果判斷的標準：觀察細胞的細胞核內如果出現綜褐色或者是棕黃色的顆粒就可以判斷為陽性。

1.2.4 判斷的標準主要有：隨機選擇顯微鏡下的5個獨立的高倍視野，觀察視野內陽性的細胞所占的比例進行判斷，其中①無表達，即全部細胞都沒有著色，用（-）表示；②低表達，即染色的陽性細胞所占的百分比N＜25%，用（+）表示；③中度表達，即染色的陽性細胞所占的百分數N，25%＜N＜50%，用（+ +）；④高表達，即染色的陽性細胞所占的百分數N＞50%，用（+++）表示。3對數據進行統計：采用SPSS17統計軟件進行統計，P值＜0.05差別具有統計學意義。結果CyclinD1在正常的細胞染色比較淺，陽性表達為17%；CyclinD1在鱗癌組織細胞中染成棕黃色，陽性表達為25%，陽性細胞散在的分布在組織中。可見，CyclinD1在正常細胞中的表達遠遠少于在鱗癌細胞中的表達，差異具有統計學的意義。CyclinD1在鱗癌組織中的表達與年齡無關，與不同病理分級有關，隨著病理分級的逐漸升高，著色強度增加，陽性表達率升高。見表1所示。

表1 CyclinD1在正常皮膚及皮膚鱗癌組織中的表達

3 討 論

cyclinD1 是一種細胞周期素D，它的作用是可以與CDK4相結合，活化CDK4。而被活化以后的CDK4能夠使Rb蛋白發生磷酸化，從而能夠進一步促使轉錄基因E2F發生解離，讓細胞由G1期進入S期[2]。本研究顯示CyclinD1主要在皮膚鱗癌組織的細胞核中表達，其陽性表達率較正常對照組高，差異有統計學意義，表明CyclinD1在皮膚鱗癌組織中有促進細胞增殖惡化作用，與皮膚鱗癌的發生相關。CyclinD1作為細胞周期中重要的調控因子，其基因多態性的不同對腫瘤的形成有不同的影響[3,4]。通過本次研究得出以下結果：cyclinD1在正常的組織細胞中是低表達，細胞著色比較淺；而在鱗癌組織中表達明顯增加，著色較深。這說明：cyclinD1對于鱗癌的形成具有一定的促進作用。在病理上cyclinD1表達的分級在G1、G2、G3間有顯著性差異（P＜0.05），低分化鱗癌（93.3%）明顯高于高分化鱗癌（46.2%）及中分化鱗癌（66.7%），研究與沈金翠等[5]研究結果一致。本研究提示cyclinD1異常表達可作為腫瘤分化程度和預后的評價指標之一。

[1]楊軍,LeeSeungHun,黃曉波,等.特應性皮炎炎動物模型表皮分化蛋白表達的改變[J].中國皮膚性病學雜志,2006,20(12):730-733.

[2]Marx J . New tumor suppressor may rival p53[J]. Science,1994, 264(15):344-345.

[3]Lu F, Gladden AB, Diehl JA. An alternatively spliced CyclinD1isoform, CyclinD1b, is a nuclear oncogene [J].Cancer Res,2003,63 (21):7056-7061.

[4]Dubus P,Young P,Beylot Barry M,et al. Value of interphase FISHfor the diagnosis of t(11: 14) ( q13;q32) on skin lesions of mantle celllymphoma[J]. Am J Clin Pathol,2002,118(6):832-841.

[5]沈金翠,李靈.PTEN,Ki-67和CyclinD1在皮膚鱗狀細胞癌中的表達及意義[J].中國皮膚性病學雜志,2012,26(8):674-678.

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：1671-8194（2013）04-0263-02