灰毛漿果楝提取物對(duì)菜青蟲拒食活性的初步研究

林啟權(quán)

（廣西衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院藥學(xué)系，廣西 南寧 530023）

灰毛漿果楝提取物對(duì)菜青蟲拒食活性的初步研究

林啟權(quán)

（廣西衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院藥學(xué)系，廣西 南寧 530023）

對(duì)灰毛漿果楝根的95%乙醇提取物分別用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等進(jìn)行萃取獲得各部分萃取物，分別對(duì)菜青蟲進(jìn)行拒食活性測試，結(jié)果顯示灰毛漿果楝根的95%乙醇提取物的石油醚和氯仿萃取部分對(duì)菜青蟲具有較好的拒食活性。

灰毛漿果楝；菜青蟲；拒食活性

防治害蟲一直是人類存在以來的課題，化學(xué)合成農(nóng)藥的問世，是人類同害蟲斗爭史上的一個(gè)里程碑。雖然化學(xué)農(nóng)藥的出現(xiàn)有它不可比擬的優(yōu)勢，但化學(xué)農(nóng)藥的大量應(yīng)用，也帶來了種種弊端，導(dǎo)致害蟲抗藥性的產(chǎn)生、環(huán)境的污染、人獸的中毒、生態(tài)平衡的破壞等等問題。隨著人們健康意識(shí)和環(huán)保意識(shí)的提高，人們越來越重視農(nóng)產(chǎn)品的安全性，努力開發(fā)新型植物源農(nóng)藥已經(jīng)成為趨勢。

在豐富的植物資源中，楝科植物中含有大量的活性成分,在藥用和殺蟲等方面都具有獨(dú)特的效果,是目前研究比較深入的植物種類之一。楝科（Meliaceae）在全球共有50屬550種以上，楝科植物中的次生物質(zhì)對(duì)許多重要農(nóng)業(yè)害蟲具有觸殺胃毒，拒食及抑制生長發(fā)育的作用，其中印楝屬的印楝和楝屬的苦楝，川楝都含有殺蟲活性成分,可作為植物源殺蟲劑的首選植物，楝科植物有很多種，必定有很多有待開發(fā)，灰毛漿果楝就是其中一種。灰毛漿果楝（Cipadessa cinerascens（Pell.） Hand.-Mazz.），又名亞洛輕、假茶辣等，為楝科漿果楝屬植物。分布廣西、四川、貴州、云南等地。其根和葉入藥，為常用傣藥，有祛風(fēng)化濕、行氣止痛的功效，主治傷風(fēng)感冒、風(fēng)濕麻痹、痢疾、腹痛、燙傷、及皮膚燒癢等癥[1]從灰毛漿果楝中報(bào)道的化學(xué)成分主要為黃酮苷[2-4]。從同屬植物中發(fā)現(xiàn)了二萜[5-6]，甾體，香豆素，脂肪醇[7]和四降三萜等多種成分。為了尋找得到更多具有植物源農(nóng)藥作用的物質(zhì)，本實(shí)驗(yàn)采用楝科的漿果屬植物灰毛漿果楝，對(duì)菜青蟲的拒食作用進(jìn)行初步研究，進(jìn)而為開發(fā)利用這一植物提供信息。

表2 灰毛漿果楝的氯仿提取液對(duì)菜青蟲的拒食活性

表3 灰毛漿果楝的石油醚萃取物對(duì)菜青蟲的拒食活性

1 材料與方法

1.1 供試材料

灰毛漿果楝根，（Cipadessa cinerasc（Pell.）Hand.-Mazz.）2005年10月采自四川省攀枝花市鹽邊縣菁河鄉(xiāng)，由中科院成都生物研究所趙佐成研究員鑒定，標(biāo)本（A-186）保存于中國科學(xué)院成都生物研究所天然產(chǎn)物中心。自然干燥后用植物粉碎機(jī)粉碎后備用。

1.2 實(shí)驗(yàn)對(duì)象

菜青蟲Piseris rapaeL.。采自廣西南寧市郊，沒有施用過任何農(nóng)藥的甘藍(lán)農(nóng)田。室內(nèi)飼養(yǎng)兩天以上，試驗(yàn)時(shí)挑選大小一致發(fā)育整齊的3齡幼蟲，實(shí)驗(yàn)前將試蟲饑餓6h。以甘藍(lán)葉為飼料。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 供試藥液制備

將灰毛漿果楝供試樣品用95%乙醇充分浸泡兩周后，浸泡液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀45℃減壓濃縮得總浸膏。將總浸膏溶于1 L 50℃的水中，依次用和水等體積的石油醚、氯仿、乙酸乙紙、正丁醇萃取得不同萃取部分，分別減壓濃縮后得萃取浸膏。以50%丙酮為溶劑配置成不同濃度備用。

1.3.2 拒食活性測定

樣品液按梯度稀釋后將30.00 g新鮮的甘藍(lán)葉的小葉片放入供試樣品的丙酮溶液中浸漬2～3 s，自然揮發(fā)后放入養(yǎng)蟲缸內(nèi)。對(duì)照用50%丙酮。給處理組中的菜青蟲飼喂樣品液處理過的葉片，對(duì)照組飼喂對(duì)照液丙酮處理過的葉片。挑選大小一致并饑餓6 h適齡試蟲幼蟲，每養(yǎng)蟲缸內(nèi)放置20頭，分別于處理后24 h 、48 h觀察，另外考慮到菜葉有水分的自由揮發(fā)，另取一養(yǎng)蟲缸放上等質(zhì)量的菜葉做水分揮發(fā)對(duì)照實(shí)驗(yàn)。最后用稱取重量的方法測出成蟲的拒食率。重復(fù)實(shí)驗(yàn)5次。拒食率%=（對(duì)照組-處理組）/對(duì)照組×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 拒食活性測定結(jié)果與分析（表1）

表1 灰毛漿果楝的不同萃取部分對(duì)菜青蟲的拒食活性

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明（表1），經(jīng)過比較可以看出在濃度較大而且相同濃度的情況下，四個(gè)不同萃取物對(duì)菜青蟲都顯示出一定拒食活性，而石油醚和氯仿部分相對(duì)乙酸乙酯和正丁醇部分具有較好的拒食活性，24h拒食率分別為42.73%和19.52%。因此選擇這兩部分作進(jìn)一步梯度分析。

2.2 氯仿部分的梯度拒食活性（表2）

應(yīng)用和上述同樣的測試方法對(duì)氯仿部分做進(jìn)一步分析，將氯仿樣品液稀釋成不同的濃度，測試氯仿不同濃度梯度都顯示出拒食活性，而且隨著濃度的增大拒食活性也出現(xiàn)遞增趨向。根據(jù)數(shù)據(jù)處理處理得到的拒食中濃度很大很大，沒有實(shí)際意義，因此表格沒有將這一數(shù)據(jù)列出。

2.3 石油醚部分的梯度拒食活性（表3）

應(yīng)用和上述同樣的測試方法對(duì)石油醚部分做進(jìn)一步分析，在和氯仿相同濃度梯度下，石油醚部分顯示出更強(qiáng)的拒食活性，同樣隨著濃度的增強(qiáng)拒食活性也出現(xiàn)遞增趨向。說明主要的拒食活性物質(zhì)存在于石油醚萃取部分中。

3 結(jié)論與討論

初步研究結(jié)果顯示，灰毛漿果楝根的95%乙醇提取物的石油醚部分和氯仿部分對(duì)菜青蟲3齡幼蟲具有較好的拒食活性，可作為進(jìn)一步開發(fā)利用的參考。從實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出石油醚部分的拒食活性要比氯仿部分強(qiáng)，這與植物活性成分的性質(zhì)有關(guān)，有文獻(xiàn)指出從楝科植物中提取的殺蟲活性物質(zhì)均為四環(huán)三萜類化合物，其他結(jié)構(gòu)的物質(zhì)均無殺蟲活性。因?yàn)槿祁愇镔|(zhì)極性比較小，用石油醚萃取的時(shí)候易溶于石油醚因此應(yīng)用以往的經(jīng)驗(yàn)來解析石油醚的萃取物拒食活性是可通的，因?yàn)樗慕等浦饕嬖谑兔巡糠掷铩５酝芯康降拈浦参镉行С煞志鶠樗沫h(huán)三萜類化合物，是不是所有這一科屬的都這樣，仍有待進(jìn)一步探索，具有殺蟲和拒食作用的植物源物質(zhì)有多種，直接用提取物在做活性測試而沒有純化出活性成分來做測試是本實(shí)驗(yàn)的一個(gè)很大不足。另外，實(shí)驗(yàn)測定拒食活性所采用的方法有別于常用的浸漬葉碟法，但作為初步探索，本實(shí)驗(yàn)提供的數(shù)據(jù)依然可以作為參考，植物殺蟲模型可以建立多種，我們可以通過不同實(shí)驗(yàn)加以驗(yàn)證。最后需要進(jìn)一步研究證實(shí)的是灰毛漿果楝除了對(duì)菜青蟲有拒食作用外，是否還具有胃毒、觸殺、生長抑制等作用，這些可作為深一步的探討。

[1] 江蘇新醫(yī)學(xué)院編.中藥大辭典.上海:上海人民出版社,1997:2183.

[2] 梁龍,鐘熾昌,蕭倬殷.傣藥“亞洛輕”化學(xué)成分的研究(Ⅰ)[J].中草藥,1990,21(11):2-4.

[3] 梁龍,鐘熾昌,蕭倬殷.傣藥“亞洛輕”化學(xué)成分的研究(Ⅱ)[J].中草藥,1991,22(1):6-8.

[4] 梁龍,鐘熾昌,蕭倬殷.傣藥“亞洛輕”化學(xué)成分的研究(Ⅲ)[J].中草藥,1994,25(5):236-237.

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R-332

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1671-8194（2013）19-0095-03