糞便抗原檢測診斷幽門螺桿菌感染的檢驗學研究

劉甲辰 劉曉華 金 哲 鮑連勇

（中國醫科大學遼陽中心醫院檢驗科，遼寧 遼陽 111000）

糞便抗原檢測診斷幽門螺桿菌感染的檢驗學研究

劉甲辰 劉曉華 金 哲 鮑連勇

（中國醫科大學遼陽中心醫院檢驗科，遼寧 遼陽 111000）

目的 評價幽門螺桿菌糞便抗原（幽門螺桿菌 SA）檢測診斷幽門螺桿（幽門螺桿菌）感染的可靠性。方法 采用 ELISA 法檢測 116例因上消化道癥狀接受胃鏡檢查患者的幽門螺桿菌 SA，以快速尿素酶試驗、14C-尿素呼氣試驗聯合檢測作為診斷幽門螺桿菌感染的“金標準”。結果 “金標準”診斷幽門螺桿菌感染：陽性 78 例，陰性 38 例，“金標準”陽性 78 例中，幽門螺桿菌 SA 檢測陽性為 74 例，陰性為 4 例；“金標準”陰性 38 例中，幽門螺桿菌 SA 檢測陰性為 36 例，陽性為 2 例。幽門螺桿菌 SA 檢測診斷幽門螺桿菌感染的敏感性94.9%（74/78），特異性 94.7（36/38），準確性 94.8%（110/176），陽性預測值 97.4%（74/76），陰性預測值 90.0%（36/40）。結論 幽門螺桿菌SA檢測有較高的敏感性和特異性，是一種簡便可靠、非侵入性的診斷幽門螺桿菌感染的方法。

糞便抗原；螺桿菌；幽門；診斷

幽門螺桿菌（Helicobacter Pylori，HP）感染是慢性胃炎和消化性潰瘍的主要原因，也是胃腫瘤發生的高危因素[1-3]。現階段，檢測幽門螺桿菌的方式包括侵入性及非侵入性兩種，侵入式要采用胃鏡進行檢查，獲得胃粘膜活檢標本后開展包括尿素酶試驗、組織染色及培養檢查等檢驗，非侵入式則包括13C、14C-尿素呼氣試驗（14C-UBT）、15N尿素排泄試驗、血清學試驗學。然而，上述方式 都 存 在 其 優 劣 勢[4-5]。 最近幾年，西方有研究顯示，有一種新型的非侵入性檢查方式，即檢測幽門螺桿菌糞便抗原（幽門螺桿菌 stool antigen，幽門螺桿菌SA）[6-7]，本研究以快速尿素酶試驗、14C-尿素呼氣試驗作為診斷幽門螺桿菌感染的“金標準”，旨在評價該方法診斷幽門螺桿菌 感染的可靠性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取116例患者，其皆為由于出現各類上消化系癥狀，并接受胃鏡檢查者。其中60例為男性，56例為女性，年齡為17～66歲，平均年齡（42.8±4.1）歲。排除以下情況者：30d內服用過抗生素者，采用質子泵抑制劑，使用過H2受體阻滯劑及鉍劑等對幽門螺桿菌造成影響者，胃部分切除術患者。

1.2 方法

上述患者都在空腹狀態下，在使用胃鏡檢查中，選擇胃竇部活檢1塊胃粘膜作快速尿素酶試驗，同時行14C-UBT 和 幽門螺桿菌SA檢查。

1.2.1 幽門螺桿菌診斷標準

快速尿素酶試驗及14C-尿素呼氣試驗，上述兩種檢查都為陽性是診斷幽門螺桿菌感染的“金標準”，若兩種試驗結果都是陰性則可診斷為幽門螺桿菌陰性。

1.2.2 幽門螺桿菌糞便抗原檢查

用無菌瓶采集樣本，對患者當天早晨的糞便樣本進行內鏡檢驗，放在零下20℃的冰箱內備用。檢測試劑盒為上海鑫樂生物有限公司生產，使用ELISA（酶聯免疫吸附測定）雙抗體夾心法進行檢測，根據試劑盒操作步驟進行操作。具體操作流程為：挑取約100mg糞便置入0.4mL稀釋液中進行稀釋，重合混合后震蕩30s，制成稀釋標本。取0.1mL稀釋液、陽性/陰性對照物放在板孔內，向孔內加入0.1mL酶標抗體，在室溫環境中防止1h，將板沖洗干凈，再向每孔內滴入0.1mL底物溶液，在室溫環境內防止10min，直至陽性對照孔變為藍色，滴入2滴終止液，并在15min內，采用酶聯免疫儀，讀取波長450mm處待測樣本的吸光度（OD）。結果評判：若OD高于0.120則為陽性，若OD超過0.10單不足≤0.120則是可疑，若OD不足0.10則為陰性。

1.2.3 14C-UBT

在胃鏡檢查后，立即口服一粒含37Kpq （ lu-Ci）14C-尿素膠囊（解放軍第二醫藥大學），患者靜坐0.5h后采用導管吹氣進含二氧化碳吸收劑的液閃瓶，直至吸收劑顏色從紅色變成無色，停止吹氣，往閃瓶例加進4.5mL的稀釋閃爍液，在液體閃爍計數儀（貝克曼庫爾特商貿（中國）有限公司）上檢測，獲取DPM（每分鐘的衰變數），DPM≥200為陽性，100≤DPM≤199為可疑陽性，DPM＜100為陰性。

1.2.4 快速尿素酶試驗（RUT）

在胃鏡檢查過程中，在胃竇離幽門40mm左右處取一塊活檢組織，置入一分鐘尿素酶檢測試劑（東樂自然基因生命科學公司）瓶內，經5min，若組織塊周邊的液體呈紅色則是陽性，否則是陰性。

1.3 數據統計處理

檢驗“金標準”是快速尿素酶試驗及14C-尿素呼氣試驗結果，根據診斷試驗的相關評價方式，使用四格表進行分析，得出特異性、敏感性、準確性、陽性/陰性預測值。

2 結 果

在116例患者中，參考診斷“金標準”對幽門螺桿菌感染進行分析。結果為：78例患者為陽性，38例患者為陰性。“金標準”顯示的78例為陽性患者內，有74例患者的幽門螺桿菌SA檢測結果為陽性，另4例為陰性；“金標準”顯示的38例陰性患者內，36例為幽門螺桿菌SA檢測結果為陰性，另2例為陽性。詳見表1。和“金標準”檢測結果相比，幽門螺桿菌SA診斷幽門螺桿菌感染的敏感性為94.87%（74/78），特異性為94.74%（18/19），準確性為94.83%（110/116），陽性預測值為97.37%（74/76），陰性檢驗的預測值為90.00%（36/40）。

表1 幽門螺桿菌SA檢測與金標準檢查結果比較（例）

3 討 論

隨著幽門螺桿菌感染與胃腸道疾病之間的研究的不斷深入，檢測幽門螺桿菌感染的方法在臨床上應用也日益普遍。RUT法目前作為單獨的臨床診斷方法，具有較高的準確性，然而，活檢標本內的細菌密度決定了該反應的結果，而“灶性”分布也對取材有著重要的影響；若患者最近使用國抗幽門螺桿菌藥物，則其陽性率會顯著降低，其假陰性率明顯提高[8]。由于該方法需通過胃鏡檢查，因此有一定創傷性，且操作較繁瑣，患者的依從性差，且極易導致交叉感染，從而大大增加了對幽門螺桿菌根治及隨訪的難度。作為一種重要的非侵入性檢測方式，有研究已證實尿素呼氣試驗的敏感性及特異性較高，并可以反映幽門螺桿菌的活動性感染，在判斷根治幽門螺桿菌的效果中具有積極的價值。然而，14C-尿素呼氣試驗有著一定的放射性，從而受限其應用范圍；13C-尿素呼氣試驗沒有放射性，然而價格較高，且另需的紅外能譜儀和氣體質譜儀，其價格也相當高，從而大大限制了其基層醫療單位的應用。近年來，一種新的非侵入性檢查方法——幽門螺桿菌SA，就是采用純化免抗人多克隆抗體、酶標抗體雙抗體夾心酶免疫對幽門螺桿菌SA進行測定的方式，該法的檢測原理是，當胃粘膜的上皮細胞更新脫落時，在其表面定植的幽門螺桿菌也會隨糞便被排出，采用ELISA法對糞便內的幽門螺桿菌SA進行檢測。筆者應用此方法檢測了116例患者幽門螺桿菌SA，與“金標準”比較，初步發現此法具有較高的敏感性（94.9%）、特異性（94.7%）、準確性（94.8%），與國外報道基本一致[9-10]。所以，若只是了確定當前胃內是否存在幽門螺桿菌感染，對抗幽門螺桿菌藥物的效果和抗幽門螺桿菌治療后復發、再感染情況進行觀察，對幽門螺桿菌SA進行檢測是一種較為理想的方法。另外，幽門螺桿菌SA檢測與其他幽門螺桿菌檢測方法相比，還有著簡便、價廉、可靠、安全等優點；同時標本來源方便，特別適合于兒童、孕婦、老人及其他不宜做胃鏡檢查的患者；且其試劑抗干擾能力強，不受糞便中其他細菌、病毒的干擾，故該方法適合在基層醫院推廣使用。

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：1671-8194（2013）10-0092-02