兩種方法檢測(cè)C－ 反應(yīng)蛋白的比對(duì)分析

祝丙華，孫 宇，王會(huì)中，高德祿（解放軍三〇五醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100017）

近年來C－反應(yīng)蛋白（CRP）作為一種敏感的急性時(shí)相蛋白，頗受臨床重視。CRP的檢測(cè)方法目前使用比較多的有膠乳凝集試驗(yàn)、免疫沉淀法、免疫濁度法和標(biāo)記免疫測(cè)定法等。本科室內(nèi)現(xiàn)有兩臺(tái)分析儀測(cè)定CRP，分別為美國(guó)Beckman－Coulter Immage特定蛋白分析儀和芬蘭Orion Diagnostica公司的QuickRead分析儀。本文對(duì)兩個(gè)分析系統(tǒng)進(jìn)行比較評(píng)價(jià)，探討其臨床應(yīng)用價(jià)值以及兩者的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 美國(guó)Beckman－Coulter Immage特定蛋白分析儀和原裝配套試劑及質(zhì)控品。芬蘭Orion Diagnostica QuickRead分析儀和原裝配套試劑及質(zhì)控品。兩種儀器檢測(cè)原理均為速率散射比濁法，后者為快速法檢測(cè)。

1.2 標(biāo)本收集 隨機(jī)收集門診和住院患者41例，取空腹靜脈血，分離血清，血清無(wú)溶血無(wú)脂血無(wú)黃疸。

1.3 方法

1.3.1 定標(biāo) 常規(guī)開機(jī)后用各自的配套定標(biāo)液對(duì)測(cè)定項(xiàng)目進(jìn)行定標(biāo)。

1.3.2 質(zhì)量控制 采用各自的質(zhì)控品在兩臺(tái)儀器上作室內(nèi)質(zhì)控，確保質(zhì)控結(jié)果在允許范圍內(nèi)。

1.3.3 樣本測(cè)定 每天最多測(cè)定8例樣本；將每例樣本分裝成兩份，分別在Immage和QuickRead上平行測(cè)定，必須在2h內(nèi)完成。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)

2 結(jié) 果

2.1 兩種方法檢測(cè)結(jié)果的比較 兩種方法檢測(cè)結(jié)果見表1，配對(duì)t檢驗(yàn)t＝3.313，P＜0.05，兩種儀器檢測(cè)結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 兩種方法檢測(cè)C反應(yīng)蛋白結(jié)果

圖1 Immage與QuikRead測(cè)定均值的散點(diǎn)圖

2.2 相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)分析得出r＝0.954，P＜0.05，提示兩種檢測(cè)方法相關(guān)性較好。

2.3 散點(diǎn)圖 兩種方法測(cè)定CRP的散點(diǎn)圖見圖1，有1個(gè)離群點(diǎn)，分析原因并刪除后繼續(xù)分析，可見兩方法相關(guān)性較好。

3 討 論

CRP是急性時(shí)相反應(yīng)蛋白之一，在健康者血清中含量甚微（0.068～8.2mg/L），但在感染、炎性疾病、組織損傷、惡性腫瘤、手術(shù)創(chuàng)傷及組織壞死等情況下，幾小時(shí)內(nèi)迅速升高，并繼續(xù)急劇上升，在24～72h可達(dá)高峰，超過正常水平的10倍到百倍，甚至千倍，稱為炎癥標(biāo)志物［1－2］。早期，由于方法學(xué)的局限性，在臨床中一直未能得到足夠的重視和應(yīng)用。20世紀(jì)80年代以來，隨著實(shí)驗(yàn)方法和儀器的進(jìn)步，CRP越來越受到臨床醫(yī)師的重視。

速率散射比濁法主要采用抗人CRP包被的微粒子增強(qiáng)免疫速率反應(yīng)，樣品中的CRP和干化學(xué)微粒子進(jìn)行速率反應(yīng)，反應(yīng)生成物改變了溶液的濁度，將各單位時(shí)間內(nèi)CRP與抗血清形成復(fù)合物的速率及復(fù)合物顆粒產(chǎn)生的散射信號(hào)連接在一起，即形成動(dòng)態(tài)動(dòng)力學(xué)的速率散射免疫比濁法［3］。

在本文中，兩種檢測(cè)系統(tǒng)的結(jié)果存在一定的差異。快速法為多點(diǎn)定標(biāo)檢測(cè)，手工操作過多，誤差大，精密度差。可檢測(cè)范圍為3～160mg/L，超過上限后需稀釋重新檢測(cè)，結(jié)果有偏差。在以全血為待測(cè)樣品時(shí)，默認(rèn)樣品的血清體積為全血的60%，這顯然與很多臨床樣品不符。尤其是中、重度貧血樣品，其測(cè)定值必將大大偏離真實(shí)值。快速法的優(yōu)點(diǎn)在于快速方便，較適于急診檢驗(yàn)及兒科患者選擇。Immage特定蛋白儀的檢測(cè)下限為0.1mg/L，靈敏度大大高于QuikRead，檢測(cè)上限儀器未進(jìn)行設(shè)置，可以避免QuikRead分析儀稀釋的誤差，更方便觀察CRP結(jié)果較高患者的臨床療效。相關(guān)分析顯示，兩系統(tǒng)的相關(guān)系數(shù)r為0.954，刪除1個(gè)離群點(diǎn)（＞160mg/L）后相關(guān)性較好。但是對(duì)于結(jié)果大于160mg/L時(shí)兩者的相關(guān)性，本文并沒有深入探討，有待收集更多病例進(jìn)行檢測(cè)。另外，同一患者在其整個(gè)疾病過程中，最好是第一次檢測(cè)用何種方法，在接下來的治療過程中也用該種方法進(jìn)行檢測(cè)以便連續(xù)觀察。

［1］ Clyne B，Olshaker JS.The C－reactive［J］.J Emerg Med，1999，17：1019－1025.

［2］ 陳新宇，李向陽(yáng)，魯勇，等.POCT儀器和Immage分析儀C反應(yīng)蛋白檢測(cè)結(jié)果的比對(duì)試驗(yàn)［J］.南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，28（10）：1877－1879.

［3］ 周惠玉，馬芳芳，張玲.兩種方法檢測(cè)C－反應(yīng)蛋白的結(jié)果分析［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2010，7（23）：2637－2638.