電針對大鼠不同狀態(tài)下空腸運(yùn)動的雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)研究

張 娜余 芝 徐 斌

(南京中醫(yī)藥大學(xué)針?biāo)幗Y(jié)合省部共建重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，南京，210029)

便秘和腹瀉一直都是針灸的優(yōu)勢病種，且《內(nèi)經(jīng)·靈樞·五邪》有記載“邪在脾胃，則病肌肉痛，陽氣有余，陰氣不足，則熱中善饑，陽氣不足，陰氣有余，則寒中腸鳴腹痛，陰陽俱有余，若俱不足，則有寒有熱，皆調(diào)于三里”，最早描述了單穴對機(jī)體不同狀態(tài)的雙向調(diào)節(jié)作用。從臨床療效角度看，針灸對胃腸運(yùn)動具有雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)。但其具體效應(yīng)規(guī)律及機(jī)制尚不明確，尤其是電針對小腸動力的作用觀察更少［1］。本文試圖觀察電針對空腸內(nèi)壓的影響，以探討針灸的雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)規(guī)律。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物 成年SPF 級雄性Sprague－Dawley 大鼠，體重180～230g，上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動物有限責(zé)任公司提供［許可證號:SCXK(滬)2009－0010］。飼養(yǎng)于南京中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心。實(shí)驗(yàn)過程中對動物的處置符合江蘇省實(shí)驗(yàn)動物管理辦法中有關(guān)善待實(shí)驗(yàn)動物的指導(dǎo)性意見要求。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為正常組、心得安組和克倫特羅組，每組各15只。實(shí)驗(yàn)前禁食12 h，自由飲水。

1.2 主要藥品和儀器 心得安(普萘諾爾，)克倫特羅，多道生理信號采集系統(tǒng)(MR6240 成都儀器廠)、壓力換能器(YP201 成都儀器廠)、韓氏電針儀(LH402A)、針灸針(華成牌無菌針灸針Ф 0.35mm×25mm 蘇州東邦醫(yī)療器械有限公司)

1.3 選取的腧穴 腧穴選為位于四肢的曲池和上巨虛，位于腹部的天樞和背部的大腸俞。穴位定位方法采用擬人比照法。

1.4 試驗(yàn)方法 大鼠25%氨基甲酸乙酯(烏拉坦)0.8 g/kg 腹腔注射麻醉后，仰臥位固定，行右頸外靜脈插管及面罩吸氧。正常組不行頸外靜脈插管。將大鼠上腹部毛剃除，于劍突下腹正中矢狀線下1 橫指處一字切口切開腹腔，暴露空腸上段。將避孕套套在塑料導(dǎo)管一端，導(dǎo)管前端與避孕套之間留有一定空隙，在距離避孕套前端1 mm 處用外科線結(jié)扎將兩者固定，制成直徑為15 mm的小腸內(nèi)留置水囊。囊內(nèi)及導(dǎo)管內(nèi)充滿雙蒸水，排除氣泡。在距十二指腸懸韌帶5cm 處的空腸，避開腸壁上可見的血管，在腸系膜的對側(cè)做一個2～3 mm 左右的一字切口，將水囊放入切口部，切口處荷包縫合固定。插管另一端通過三通裝置與注射器和壓力傳感器相連。記錄儀器為RM6240型四道生理記錄儀，描計(jì)空腸運(yùn)動，記錄參數(shù)為800 Hz 血壓kPa 5.0 s/div 1.2 kPa 0.3 Hz。測空腸內(nèi)壓時，手術(shù)后連續(xù)記錄30 min，待大鼠空腸蠕動波穩(wěn)定后開始實(shí)驗(yàn)。先連續(xù)記錄30 min 小腸內(nèi)壓為基線(對照值)，然后電針上巨虛穴2 min，刺激量為3 mA，2/15Hz，針刺入0.3 cm，刺入皮下肌肉，開始記錄。起針后再記錄10 min，待其恢復(fù)至基線或接近基線水平后再給予下一個處理，依照電針上巨虛方法分別針刺天樞、曲池和大腸俞，并記錄空腸內(nèi)壓變化。給藥組分別靜脈推注0.2%克倫特羅0.02 mL/min、0.4%心得安(首推0.2 mL 1min，后0.01 mL/min 持續(xù)給藥)，待藥物引起的小腸內(nèi)壓保持平穩(wěn)后，重復(fù)上述針刺程序，繼續(xù)記錄空腸內(nèi)壓變化。

1.5 觀察指標(biāo) 取基線值/給藥前、針刺前/給藥后、針刺時2 min的平均空腸內(nèi)壓值。針刺效應(yīng)變化率的計(jì)算公式為:(針刺值－針刺前值)/針刺前值×100;并規(guī)定當(dāng)針刺效應(yīng)變化率≥5%時為興奮效應(yīng)，當(dāng)針刺效應(yīng)變化率≤－5%時為抑制效應(yīng)，－5%≤針刺效應(yīng)變化率≤5%時則為無明顯效應(yīng)［2］。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS18.0 統(tǒng)計(jì)軟件，干預(yù)前后進(jìn)行配對t 檢驗(yàn)。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 各腧穴在空腸不同狀態(tài)下效應(yīng)方向 從效應(yīng)方向看，天樞在空腸正常狀態(tài)、心得安狀態(tài)(運(yùn)動亢進(jìn))及克倫特羅狀態(tài)(運(yùn)動抑制)下均表現(xiàn)為抑制效應(yīng)，且抑制效應(yīng)依次減弱;曲池在空腸正常狀態(tài)、心得安狀態(tài)均表現(xiàn)為興奮效應(yīng)，在克倫特羅狀態(tài)效應(yīng)不明顯;上巨虛在空腸三種狀態(tài)下效應(yīng)均不是很明顯;大腸俞在空腸正常狀態(tài)下表現(xiàn)為抑制效應(yīng)，在心得安狀態(tài)及克倫特羅狀態(tài)下均表現(xiàn)為興奮狀態(tài)。見圖1。

圖1 各腧穴在空腸不同狀態(tài)下效應(yīng)方向

2.2 天樞穴在空腸不同狀態(tài)下的針刺效應(yīng)特征天樞在正常狀態(tài)下表現(xiàn)出明顯的抑制效應(yīng)，在心得安狀態(tài)下及克倫特羅狀態(tài)下表現(xiàn)出抑制趨勢，但抑制效應(yīng)量較正常組明顯降低。詳見圖2 和圖3。

圖2 天樞穴在空腸不同狀態(tài)下的針刺效應(yīng)

圖3 天樞穴在空腸不同狀態(tài)下針刺變化率平均值

圖4 曲池在空腸不同狀態(tài)下的針刺效應(yīng)

2.3 曲池在空腸不同狀態(tài)下的針刺效應(yīng)特征 曲池穴在空腸正常狀態(tài)下表現(xiàn)出明顯興奮效應(yīng)，在心得安狀態(tài)下有興奮趨勢，但效應(yīng)量減少，在克倫特羅狀態(tài)下效應(yīng)不明顯。詳見圖4 和圖5。

2.4 上巨虛穴在空腸不同狀態(tài)下的針刺效應(yīng)特征上巨虛在三種狀態(tài)下無明顯效應(yīng);但都略有興奮效應(yīng)趨勢，并且在正常狀態(tài)及克倫特羅(抑制小腸運(yùn)動)狀態(tài)下效應(yīng)量更大。詳見圖6 和圖7。

圖5 曲池穴在空腸不同狀態(tài)下針刺變化率平均值

圖6 上巨虛在空腸不同狀態(tài)下的針刺效應(yīng)

圖7 上巨虛在空腸不同狀態(tài)下的針刺變化率平均值

圖8 大腸俞穴在空腸不同狀態(tài)下的針刺效應(yīng)

2.5 大腸俞穴在空腸不同狀態(tài)下的針刺效應(yīng)特征大腸俞穴在正常狀態(tài)下表現(xiàn)為抑制效應(yīng)，在心得安和克倫特羅狀態(tài)下效應(yīng)不明顯，且在克倫特羅狀態(tài)下表現(xiàn)出的效應(yīng)特征與在正常狀態(tài)下的效應(yīng)特征相反。詳見圖8 和圖9。

圖9 大腸俞在空腸不同狀態(tài)下的針刺變化率平均值

3 討論

本實(shí)驗(yàn)選用的觀察指標(biāo)是空腸內(nèi)壓。胃腸壓力是胃腸緊張性收縮、分節(jié)運(yùn)動和蠕動的指標(biāo)，相當(dāng)于胃腸動力活動的慢波［3］。胃腸腔內(nèi)壓力的測定能準(zhǔn)確地評估收縮，具有準(zhǔn)確度高，假陰性率低的優(yōu)勢［4］。從目前有關(guān)針灸對小腸運(yùn)動的調(diào)節(jié)效應(yīng)的文獻(xiàn)來看，有兩種觀點(diǎn):一種認(rèn)為針刺單穴具有雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)，即對運(yùn)動亢進(jìn)的小腸產(chǎn)生抑制效應(yīng)，對運(yùn)動低下的小腸運(yùn)動產(chǎn)生興奮效應(yīng)［5－6］;另一種觀點(diǎn)在基于針刺對胃運(yùn)動的調(diào)節(jié)效應(yīng)得出結(jié)論，認(rèn)為不同部位的腧穴對小腸運(yùn)動表現(xiàn)出單向的效應(yīng)趨勢，如腹部的天樞穴能抑制小腸運(yùn)動，而四肢部位對小腸運(yùn)動則是興奮效應(yīng)［7］。從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果看來看來，這兩種觀點(diǎn)在本研究中均有體現(xiàn)。

3.1 腧穴因位置的不同表現(xiàn)出不同的調(diào)節(jié)效應(yīng)天樞在正常狀態(tài)下表現(xiàn)出明顯的抑制效應(yīng)，在心得安狀態(tài)下及克倫特羅狀態(tài)下表現(xiàn)出抑制趨勢，但抑制效應(yīng)量較正常組明顯降低;曲池穴在空腸正常狀態(tài)下表現(xiàn)出明顯興奮效應(yīng)，在心得安狀態(tài)下有興奮趨勢，但效應(yīng)量減少，在克倫特羅狀態(tài)下效應(yīng)不明顯;上巨虛在三種狀態(tài)下均無明顯效應(yīng)特征，但都表現(xiàn)為興奮趨勢;大腸俞在正常情況下表現(xiàn)為抑制效應(yīng)，在心得安狀態(tài)下效應(yīng)不明顯，在克倫特羅狀態(tài)下表現(xiàn)為興奮效應(yīng)。

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看，天樞和上巨虛針刺效應(yīng)在三種狀態(tài)下均表現(xiàn)為定向趨勢，該結(jié)果與前面學(xué)者［7］的“針刺腹部穴位通過興奮交感神經(jīng)來抑制胃動力，針刺四肢穴位通過興奮迷走神經(jīng)來增強(qiáng)胃動力，而且此規(guī)律對腸動力的影響同樣適用”的結(jié)論吻合。有學(xué)者［8］研究結(jié)果認(rèn)為，電針大鼠的后肢(足三里和三陰交)能顯著增強(qiáng)小腸轉(zhuǎn)運(yùn)，說明電針后肢腧穴對小腸具有興奮作用。而本實(shí)驗(yàn)電針上巨虛在三種狀態(tài)下均表現(xiàn)為無明顯效應(yīng)，與前面的研究結(jié)果不相符。分析其原因，可能是由電針的刺激量所造成的。本實(shí)驗(yàn)采用電針干預(yù)方法［華成牌無菌針灸針(Ф 0.35mm×25mm)3 mA，疏密波2/15 Hz，韓氏電針儀(LH402A)刺入皮下3 mm］，有研究［9］表明當(dāng)電針的刺激強(qiáng)度位于2.0～5.0 mA 時，電針大鼠的后肢對空腸動力只能產(chǎn)生輕微地增強(qiáng)作用，這也就解釋了為什么上巨虛在三種狀態(tài)下均無明顯效應(yīng)。曲池在正常狀態(tài)下表現(xiàn)為興奮效應(yīng)，在心得安狀態(tài)無明顯效應(yīng)，但有興奮趨勢，似乎體現(xiàn)了單向效應(yīng)趨勢，但在小腸抑制狀態(tài)下，卻沒有表現(xiàn)為明顯的興奮效應(yīng)，可能是克倫特羅加強(qiáng)了交感神經(jīng)的功能，從而抑制了曲池穴的興奮作用。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)電針能增強(qiáng)小腸收縮，但是興奮作用可以被阿托品阻斷［6］，而克倫特羅和阿托品都屬于擬交感神經(jīng)藥。大腸俞在正常狀態(tài)下表現(xiàn)為抑制作用，因?yàn)榇竽c俞與天樞位于相同的神經(jīng)節(jié)段，因此同天樞一樣同時對小腸表現(xiàn)出抑制效應(yīng)。這與針刺下背部腧穴能興奮胃運(yùn)動的結(jié)論［3］相違背，可能是因?yàn)檠芯康陌衅鞴俨煌斐傻摹?/p>

3.2 自主神經(jīng)激動劑及拮抗劑可以影響電針效應(yīng)及效應(yīng)量 小腸受交感和副交感神經(jīng)的雙重支配。其交感神經(jīng)節(jié)前纖維源于脊髓下胸段(T5－9)的中間外側(cè)核，副交感神經(jīng)纖維來自頸部的迷走神經(jīng)，其迷走神經(jīng)核主要集中在迷走神經(jīng)運(yùn)動背核的中上部和尾側(cè)。根據(jù)自主神經(jīng)傳出神經(jīng)釋放的遞質(zhì)不同，可將傳出神經(jīng)分為膽堿能神經(jīng)和去甲腎上腺素能神經(jīng)。交感和副交感神經(jīng)節(jié)前纖維的神經(jīng)遞質(zhì)都是乙酰膽堿，支配小腸的副交感神經(jīng)節(jié)后纖維的遞質(zhì)也是乙酰膽堿，但交感神經(jīng)節(jié)后纖維的遞質(zhì)是去甲腎上腺素。膽堿能神經(jīng)M受體和腎上腺素能神經(jīng)β2 受體在胃腸道平滑肌上均有分布，均參與了小腸運(yùn)動的調(diào)節(jié)。

可利用藥物影響神經(jīng)遞質(zhì)和受體結(jié)合，模擬自主神經(jīng)效應(yīng)。比如加強(qiáng)去甲腎上腺素作用的藥物是擬交感神經(jīng)藥(比克倫特羅)，這些藥物的效應(yīng)模擬了交感神經(jīng)興奮的效應(yīng)。因?yàn)樗鼈冏钄嗔烁苯桓猩窠?jīng)活動，從而使交感神經(jīng)活動相對增強(qiáng)。相反，抑制去甲腎上腺素作用的藥物是擬副交感神經(jīng)藥，這些藥物的效應(yīng)模擬了副交感神經(jīng)興奮的效應(yīng)(心得安)。交感神經(jīng)興奮時對小腸其抑制作用，可減慢腸蠕動，腸液分泌減少，消化減慢;副交感神經(jīng)興奮時可興奮小腸，加快腸蠕動，增加腸液分泌，促進(jìn)消化。

在本實(shí)驗(yàn)中，天樞、曲池和大腸俞只在正常狀態(tài)下，表現(xiàn)出明確的調(diào)節(jié)效應(yīng)特征，三者在給藥狀態(tài)下均未表現(xiàn)出明顯效應(yīng)。天樞在給藥情況下表現(xiàn)為效應(yīng)量的減少;曲池在給藥情況下表現(xiàn)為效應(yīng)量的減少甚至效應(yīng)方向的逆轉(zhuǎn);大腸俞在給藥情況下表現(xiàn)為效應(yīng)方向的完全逆轉(zhuǎn)。說明藥物可能影響針刺效應(yīng)方向及效應(yīng)量。不少實(shí)驗(yàn)資料表明［10］，只有當(dāng)外周神經(jīng)傳入功能健全，中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能正常，針灸才能發(fā)揮其某些調(diào)節(jié)作用。給藥會影響神經(jīng)遞質(zhì)和受體的結(jié)合，進(jìn)而影響到自主神經(jīng)傳出神經(jīng)的功能，進(jìn)而影響到針刺的效應(yīng)方向及效應(yīng)量。

綜上所述，電針不同單穴對小腸運(yùn)動具有不同的調(diào)節(jié)效應(yīng)，可以通過效應(yīng)方向改變或者效應(yīng)量的改變表現(xiàn)出來。

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