大棗對呼吸道黏膜免疫分子sIgA調節作用的實驗研究

徐艷琴

（南陽醫專第一附屬醫院，河南 南陽 473000）

大棗對呼吸道黏膜免疫分子sIgA調節作用的實驗研究

徐艷琴

（南陽醫專第一附屬醫院，河南 南陽 473000）

目的觀察大棗對呼吸道黏膜免疫分子sIgA的調節作用，進一步探討大棗補氣的機理，為研發增強呼吸道黏膜免疫功能，防治呼吸道感染的中藥制劑提供依據。方法通過灌胃給予小鼠不同劑量的大棗10d后，檢測小鼠支氣管肺泡灌洗液（BALF)中免疫分子sIgA的含量。結果大棗對小鼠呼吸道黏膜免疫分子sIgA的分泌有一定促進作用，大棗低劑量組對sIgA的調節作用優于中、高劑量組。結論大棗補氣的機制之一是促進呼吸道黏膜免疫分子sIgA分泌，可作為臨床對易感人群防治呼吸道感染的中藥免疫增強劑。

大棗；呼吸道；黏膜免疫分子sIgA；實驗研究

呼吸道感染是臨床的常見、多發疾病，臨床治療以抗生素為主，抗生素治療后引起菌群失調、二重感染、致病菌的耐藥性逐漸提高及產生對抗生素不敏感的耐藥菌已成為當今醫療界關注的重大問題之一。目前治療呼吸道感染已從單純的抑菌、殺菌轉換到促進人體黏膜免疫系統功能，通過激活或刺激各種免疫活性細胞的功能，產生免疫分子，達到局部防治感染的目的。研究發現呼吸道感染的發生與黏膜免疫主要效應分子sIgA分泌量減少密切相關[1，2]。黏膜免疫主要效應分子sIgA能夠阻止病原性微生物在局部粘附，溶解細菌，調理吞噬，抗毒素，抗病毒，又稱局部抗體。因此，尋找促進sIgA分泌的藥物，提高局部黏膜系統的免疫功能，為臨床防治呼吸道感染提供新的思路和有效的防治方法。

大棗又稱紅棗，甘溫歸脾胃經，具有補中益氣、養血安神、緩和藥性的作用，用于治療中氣不足血虛等癥。大棗中主要含有糖類、維生素類、氨基酸、礦質元素、環核苷酸、蘆丁多糖等。動物實驗研究發現大棗多糖對機體非特異免疫、細胞免疫和體液免疫均有顯著的興奮作用，可以提高免疫抑制小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬功能，促進溶血素溶血空斑的形成，提高淋巴細胞轉化率和外周T淋巴細胞的百分率[3]。大棗多糖能促進免疫低下小鼠腹腔巨噬細胞分泌產生IL-1、提高IL-1的活性，促進體外ConA及LPS誘導的脾細胞增殖，促進機體的免疫功能[4]。張慶等[5]實驗證明大棗粗多糖亦具有促進小鼠淋巴細胞增殖作用，但作用方式略有不同，一般多糖的作用在體外均隨濃度增大而增強，而大棗多糖為10μg/mL時便可觀察到明顯促增殖作用，在100μg/mL達最高水平，之后隨濃度增大而作用減弱。大棗還具有抗炎、抗癌、抗過敏等作用。因此本研究選用大棗作為研究對象。

1 材料與方法

1.1 材料

①實驗動物：昆明種小鼠（SPF級），雌雄各半，體質量：18～22g。②藥液制備：大棗購自本院中藥房，且為 《中國藥典》所載品種，由中藥鑒定教研室鑒定其品種和質量，采用水煎法進行煎煮并滅菌，冷卻后將所得藥液密封放入4℃冰箱保存。③試劑及儀器：0.9%生理鹽水、泛福舒 、ELISA小鼠用sIgA定量試劑盒、SpectraMax 340PC型酶標儀、離心小管、微量移液器、眼科剪、眼科鑷、穿刺針或4號半頭等。

1.2 方法

1.2.1 實驗動物分組

將50只昆明種小鼠隨機分組，陽性對照組10只，陰性對照組10只，大棗低、中、高組每組10只，均雌雄各半。

1.2.2 給藥方法

①陽性對照組：實驗選取臨床常用于防治呼吸道感染的生物制劑細菌溶解產物為陽性對照藥物，給予臨床給藥劑量的細菌溶解產物水溶液灌胃，連續10d。②陰性對照組：給予0.9%生理鹽水灌胃，連續10d。③大棗低、中、高劑量組：分別給予各組小鼠低、中、高濃度的大棗水煎劑灌胃，連續10d（甘草中組為臨床等效劑量，三組給藥濃度的比例為1∶5∶25）。

1.2.3 測定sIgA的含量

給藥10d后，處死小鼠，行頸部解剖，用穿刺針插入氣管上端，0.8mL生理鹽水反復沖洗3遍，回收灌洗液，應用酶聯免疫法（雙抗體夾心法）檢測支氣管肺泡灌洗液（BALF）中sIgA的含量。

1.3 統計學處理

正態分布的計量資料進行levene方差齊性檢驗，滿足方差齊性的用單因素的方差分析，兩兩比較采用最小顯著差異t檢驗（least significant difference，LSD）。所有實驗數據均采用SPSS16.0統計軟件和2003 Excel進行統計分析處理。

2 結 果

大棗不同劑量組對小鼠呼吸道黏膜免疫分子sIgA的分泌均有一定的促進作用，低、中、高劑量組sIgA的含量明顯高于與陰性對照組，且P＜0.05差異均有統計學意義；與陽性對照組比較，大棗對sIgA的調節作用低于陽性對照組（P＜0.05）；大棗低中高劑量組比較，低劑量組sIgA的含量高于中、高劑量組，表明大棗低劑量組對呼吸道黏膜免疫分子sIgA的調節作用優于中高劑量組。見表1。

表1 大棗不同劑量對小鼠呼吸道黏膜免疫中sIgA的調節作用（μg/mL，χ—±s）

3 討 論

目前臨床用于防治反復發作的呼吸道感染已從單純的抑菌、殺菌，轉換為換到促進人體黏膜免疫系統功能，通過激活或刺激各種免疫活性細胞的功能，產生免疫分子，達到局部防治感染的目的。臨床常用的有瑞士歐姆制藥廠生產的泛福舒（bacterial lysates，細菌溶解產物）、白葡奈氏菌片等。泛福舒是由8種常見細菌溶解物（流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、卡他奈瑟氏菌、草綠色鏈球菌、化膿性鏈球菌、肺炎克雷白菌、臭鼻克雷白菌）組成，白葡奈氏菌片是由白色葡萄球菌、奈瑟卡他球菌、枯草芽孢桿菌以20:20:1的比例構成。它們以抗原的形式經口服進入腸道，刺激腸道黏膜免疫系統發生免疫反應，腸道黏膜免疫系統前體IgA B細胞和Th細胞傳播到遠端效應部位上呼吸道，產生免疫分子，達到局部防治感染的目的。國外學者對泛福舒治療呼吸道感染性疾病進行了研究，Lusuardi等[6]的雙盲對照實驗顯示，支氣管肺泡灌洗液中IgA的水平較治療前明顯升高，Zielnik-Jurkiewicz等[7]的研究也提示，泛福舒可以使血清內細胞活素向有益于機體的方向發生變化，從而預防反復呼吸道感染。Steurer-Stey等[8]的研究提示，使用泛福舒治療反復呼吸道感染可以減少感染發作次數，減輕再次發作程度，同時減少抗菌素的反復使用。綜上研究表明泛福舒作為抗原刺激黏膜免疫系統，激活免疫細胞的活性，促進sIgA的分泌，達到防治上呼吸道感染的目的。

泛福舒雖由八種滅活的細菌溶解產物構成，但在臨床使用的過程中仍有不良反應的報道[9]，且對于免疫系統發育不完善的6個月以內嬰兒禁用。大棗為臨床中常用的中藥，本實驗研究表明大棗能夠促進黏膜免疫分子sIgA的分泌，增強黏膜免疫的功能。中藥作為我國特有的資源，對免疫功能具有雙向調節的作用，與生物免疫制劑比較具有安全性較高、生產、來源容易的優勢。因此從中藥中選取增強黏膜免疫功能、促進黏膜免疫效應分子sIgA的分泌，是今后研發防治感染性疾病免疫制劑的一個方向。

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R-332；R56

B

1671-8194（2013）15-0096-02