蛹蟲草菌粉對肝硬化患者T細胞免疫調節作用的研究

朱鐵英張英平* 王宵偉王銀環吳 嵐

（1 吉林省中醫中藥研究院，吉林 長春130021；2吉林大學中日聯誼醫院，吉林 長春130033）

蛹蟲草菌粉對肝硬化患者T細胞免疫調節作用的研究

朱鐵英1張英平2* 王宵偉2王銀環2吳 嵐2

（1 吉林省中醫中藥研究院，吉林 長春130021；2吉林大學中日聯誼醫院，吉林 長春130033）

應用蛹蟲草菌粉（PBG）口服3個月治療肝硬化（PHC）后的檢測外周T細胞免疫功能指標和肝功能。PHC患者外周血CD4+細胞比例、CD4/CD8值，自然殺傷細胞（NK）活性及經PHA-P誘導的外周血淋巴細胞（PBL），而血清sIL-2R水平則顯著升高，外周血CD4/CD8比值，NK活性及經PHA-P的PBL，MIL-2表達，IL-2和IFN-γ生成物較治療前顯著升高，而血清sIL-2R水平則顯著下降；同時，其肝功能亦有明顯改善。

蛹蟲草菌粉；T細胞免疫；肝硬化

蛹蟲草菌粉（PBG）是吉林省人工培養的北冬蟲夏草，主要成分蟲草素（31-脫氧腺苷）、多糖、腺苷類、環狀肽類、酶及生物活性物等。有免疫調節、護肝和抗病毒等作用[1]。在此基礎上研究應用PBG對慢性乙肝患者治療時的PBL、CD3、CD4、CD8、CD25（IL-2R）的表達，以及IL-2和IFN-γ生成，NK活性及血清中sIL-2R水平調節的機制為臨床應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 PBG由吉林省中天醫藥有限公司提供。

1.2 病例選擇及治療方法

①病例組：PHC26例。男18例，女8例，年齡為25-67歲，平均49.1歲?；颊呤中g或肝穿刺病理活檢證實為PHC，伴有肝功能異常。②正常對照組：健康獻血員22例。其中男10例，女12例，年齡為26～64歲，平均42.5歲。③治療方法：26例PHC志愿者口服PBG1.0，3次/d，連服3個月采血測定PBL、CD3、CD4、CD8、MIL-2R表達率，IL-2、IFN-γ誘生活性，NK活性及血清中SIL-2R水平，同步復查肝功能來評定療效。

1.3 觀測指標和檢測方法

①外周血IL-2、IFN-γ的誘生及MIL-2R的誘導：常見分離PBL，調細胞濃度為2×106mL，置24孔細胞培養板內，1mL/孔，加入1%，PHA-P（Sigma公司）lμL/孔，于5%CO2，37℃培養48h，離心取細胞測MIL-2R表達率，培養上清于-20℃保存待測IL-2、INF-γ活性。②IL-2活性檢測。③PBL、CD3、CD4、CD8及MIL-2R表達率測定：間接免疫熒光-流式細胞分析法[2]。④IFN-γ活性測定，sIL-2R檢測及NK活性測定。⑤常規肝功能監測：血清ALT、r-GT、白蛋白、膽紅素及血漿凝血酶原時間。

表1 PHC患者經CPL治療前后PBL、CD3、CD4、CD8表達及NK活性的變化

表2 PHC患者經CPL治療前后PBL MIL-2R表達，IL-2和IFN-2誘生活性及血清sIL-2R水平變化

表3 PHC患者經CPL治療前后肝功能指標的變化

2 結 果

2.1 PBG對PHC患者PBL、CD3、CD4、CD8的表達及NK活性的影響。見表1，PHC患者經PBG治療3個月后，其PBL的CD3／CD8比值顯著增加，CD4細胞略增，CD8細胞略降。

2.2 PBG對PHC患者PBL，NIL-2R表達，IL-2T和IFN-γ誘生活性及sIL-2R水平的影響。經PBG治療3個月后有所增高，而血清sIL-2R水平明顯下降，見表2。

2.3 PBG對PHC患者肝功能的影響，PHC患者經PBG治療后，肝功能有明顯改善，見表3。26例PHC患者治療3個月后，血清白蛋白、ALT膽紅素及血漿凝血酶原時間有顯著改善，血清r-GT升高亦有一定程度降低。

3 討 論

T細胞在機體細胞免疫中起著非常重要的作用，而T細胞功能的正常發揮有賴于亞群間相互協調及IL-2、IFN-γ等細胞因子及其受體功能的完整表達[3]。研究顯示，PHC患者外周CD4/CD8比值，NK活性低下，血清sIL-2R水平升高，表明患者存在一定程度的細胞免疫功能，尤其是T細胞功能的障礙或缺陷。

通過研究發現服用PBG 3個月后，可顯著提高外周CD4/CD8比值，NK活性，促進MIL-2R表達及IL-2和IFN-γ的生成、降低血清SIL-2R水平；同時其肝功能的異常亦有一定程度的改善。

PBG的免疫調節作用與護肝作用有一定關系，研究表明，肝細胞損傷時可釋放一種肝免疫抑制因子，抑制機體T細胞免疫[4]，PHC時肝功能的異常，對血中一些免疫抑制物質的清除減低，可促進機體免疫功能進一步紊亂或低下。PBG進入機體后以天然靶向性主要被肝細胞所攝取，有利于對肝細胞損傷的修復。同時肝免疫抑制因子釋放減少，對細胞免疫抑制作用減弱，機體的免疫功能如IL-2、IFN-γ的生成，MIL-2R的表達等得以增強。這進一步顯示PBG具有免疫調節與護肝作用相結合治療慢性肝病的優點。

[1] 李祥麟,黃檀溪.北冬蟲夏草的選育及其抗衰試驗研究[J].海峽科技與產業,2004(1):55.

[2] 沈敏,黃少暉,邱德凱,等.冬蟲夏草多糖及脂質體質包埋冬蟲夏草多糖對大鼠淋巴細胞表面分子的影響[J].上海免疫學雜志,1999,11(1):20.

[3] Andus T,Bauer J,Gerklw.Effects Lf Cytokines on The Liver[J]. Hepatology,1991,13(2):364.

[4] Su HL,Huamg WH,Yu CL,et al.The mechanisms of inhivtory effects of liver estract on lymphocyte proliferation[J].Immuol Invet,1987,16(2):281.

R657.3+1

B

1671-8194（2013）35-0202-02

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