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魔芋膠對高脂小鼠血脂和抗氧化能力的影響*

2013-08-06 00:31:24邵鄰相高海濤吳依妮顧曉斌
關鍵詞:小鼠劑量模型

邵鄰相,高海濤,吳依妮,顧曉斌,袁 勇

(浙江師范大學化學與生命科學學院,浙江金華 321004)

魔芋膠(konjac glucomannan,簡稱KGM)是從天南星科(Araceae)魔芋屬(Amorphophallus)的多年生植物魔芋(Amorphophalms konjac)塊莖中分離提純得到的一種魔芋葡甘聚糖,其質量優于魔芋精粉,廣泛應用于食品、醫藥等行業[1-2].研究表明:魔芋膠可以預防過敏性皮炎中的自身免疫反應[3]、促進排便[4]、減小尿液中的毒性[5],還可以作為結腸定位給藥系統體外釋放介質的載體[6];魔芋膠能降低鵪鶉血脂及肝臟中總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)的含量[7],對由過量谷氨酸誘導的肥胖小鼠有減肥作用[8].本實驗以小鼠為實驗動物建立了高脂模型,研究了魔芋膠對高脂小鼠血脂和抗氧化能力的影響.

1 材料與方法

1.1 實驗動物及其他

ICR 小鼠,清潔級,體質量為(20.3 ±3.5)g,購于金華市食品藥品檢驗所,合格證號:SCXK(浙)2010-0151.

魔芋膠購于湖北強森魔芋食品有限公司,批號:10051114;膽固醇、鄰苯二甲醛購于上海展云化工有限公司;肝素鈉、磷鎢酸、磷鎢酸鈉購于國藥集團化學試劑有限公司;甘油三酯試劑盒購于南京建成生物工程研究所.

Ultrospec 4000分光光度計為英國Biochrom公司產品;3K18冷凍離心機為德國SigMa公司產品.

高脂飼料:面粉44%,淀粉11.75%,玉米粉9%,麩皮7%,酵母粉4%,魚粉4%,豆粕4%,骨粉1%,魚肝油1%,食鹽1%,膽固醇1%,膽酸鈉0.25%,豬油 12%.

1.2 高脂小鼠模型的建立及分組

60只ICR小鼠隨機分成2組,普通組(正常對照組,NC)12只,高脂組48只,飼喂30 d后,測定普通組和高脂組小鼠血清中總膽固醇(TC)含量分別為(1.88 ±0.44)和(3.51 ±1.12)mg/mL,二者差異顯著(P<0.01),即判定已建立高脂小鼠模型.

將高脂組48只小鼠隨機分成模型對照組(MC)及魔芋膠低、中、高劑量組(LKC,MKC和HKC),每組12只.模型對照組小鼠生理鹽水0.5 mL/d灌胃,魔芋膠低、中、高劑量組小鼠分別灌胃0.25,0.50 和0.75 g·kg-1·d-1魔芋膠,正常對照組常規飼喂.

1.3 血脂各項指標的測定

實驗小鼠連續灌胃30 d,每天記錄飲食飲水量.第30天,各組小鼠禁食12 h,不禁水,尾部取血,3 000 r/min離心15 min,取上清液,分別用鄰苯二甲醛-硫酸比色法測定總膽固醇(TC)含量、磷鎢酸-鎂沉淀法測定高密度脂蛋白(HDL)含量、肝素-檸檬酸鹽法測定低密度脂蛋白(LDL)含量、甘油三酯試劑盒測定甘油三酯(TG)含量.

1.4 組織中抗氧化酶活性和丙二醛含量的測定

將小鼠引頸處死,取心、肝、腦組織,心、腦組織與生理鹽水1∶10、肝組織與生理鹽水1∶20勻漿,10 360 r/min離心10 min,取上清液,鄰苯三酚自氧化法[9]測定超氧化物歧化酶(SOD)活性、比色法[10]測定過氧化氫酶(CAT)活性,MDATBA比色法[11]測定丙二醛(MDA)含量.

1.5 統計方法

2 結果與分析

2.1 魔芋膠對高脂小鼠飲食飲水量的影響

各組小鼠平均飲食飲水量如圖1所示.模型對照組及魔芋膠低、中、高劑量組小鼠的飲食飲水量均顯著低于正常對照組(P<0.01);模型對照組及魔芋膠低、中、高劑量組小鼠的飲食量均高于飲水量,而正常對照組小鼠的飲食量低于飲水量.

2.2 魔芋膠對高脂小鼠血脂各指標的影響

圖1 魔芋膠對高脂小鼠飲食飲水量的影響

如表1所示:魔芋膠灌胃30 d后,各組小鼠血清中,正常對照組和魔芋膠中劑量組TC含量顯著低于模型對照組(P<0.05);魔芋膠低、中、高劑量組TG含量均低于模型對照組和正常對照組,且魔芋膠低、中劑量組顯著低于正常對照組(P<0.05);正常對照組LDL含量均顯著低于其他各組(P<0.05);各組間HDL含量無顯著差異(P <0.05)(見表1).

2.3 魔芋膠對高脂小鼠組織中抗氧化酶活性的影響

與模型對照組相比,正常對照組和魔芋膠中劑量組小鼠肝臟中SOD活性顯著高于模型對照組(P<0.05);各組高脂小鼠心、腦中SOD活性均無顯著差異(P>0.05);各組高脂小鼠心、肝中CAT活性均無顯著差異(P>0.05);模型對照組小鼠腦中CAT活性最低,顯著低于正常對照組和魔芋膠高劑量組(P<0.05);肝臟中SOD和CAT活性均顯著高于心、腦中(P<0.01)(見表2).

2.4 魔芋膠對高脂小鼠組織中丙二醛含量的影響

如表3所示:模型對照組小鼠腦組織中MDA含量最高,顯著高于正常對照組和魔芋膠低、中劑量組(P<0.05);各組小鼠心、肝組織中MDA含量均無顯著差異(P>0.05).

3 討 論

本實驗通過對小鼠飲食飲水量的測定,發現模型對照組和魔芋膠低、中、高劑量組的飲食飲水量均低于正常對照組.其原因可能是魔芋膠具有強大的吸水性和膨脹力,溶于水后會形成十分粘稠的溶膠,食用后不易在胃中消化,能有效地吸附膽固醇和膽汁酸,并能抑制腸道對膽固醇和膽汁酸的吸收,同時填充胃腸,消除饑餓感,從而導致飲食飲水量減少[12-13].高脂飼料所含熱量高于普通飼料,攝入相對較少的高脂飼料就可滿足小鼠熱量的需求,也可能是模型對照組和魔芋膠低、中、高劑量組小鼠飲食飲水量均低于正常對照組的原因.

表1 魔芋膠對高脂小鼠血清中TC,TG,HDL和LDL含量的影響( ± s,n=12) mg/mL

表1 魔芋膠對高脂小鼠血清中TC,TG,HDL和LDL含量的影響( ± s,n=12) mg/mL

注:與模型對照組相比,a表示 P <0.05,A 表示 P <0.01;與正常對照組相比,b表示 P <0.05,B 表示 P <0.01.

組別 ρ(TC) ρ(TG) ρ(HDL) ρ(LDL)NC 5.26 ±0.99 a 0.81 ±0.08 2.67 ±0.35 2.47 ±0.34A MC 6.53 ±1.49 b 0.74 ±0.17 2.67 ±0.69 4.22 ±0.28 B LKC 6.56 ±1.26 b 0.61 ±0.16 b 2.88 ±0.35 4.34 ±0.56 B MKC 5.21 ±1.26 a 0.66 ±0.19 b 2.55 ±0.28 3.81 ±0.34 B HKC 5.90 ±1.34 0.67 ±0.02 2.49 ±0.42 3.61 ±1.08B

表2 魔芋膠對高脂小鼠心、肝、腦中SOD和CAT活性的影響( ± s,n=12) 103U/g

表2 魔芋膠對高脂小鼠心、肝、腦中SOD和CAT活性的影響( ± s,n=12) 103U/g

注:與模型對照組相比,a表示P<0.05.

組別SOD 活性心肝腦CAT 活性心肝腦NC 1.70 ±0.46 7.73 ±1.96 a 1.27 ±0.19 5.20 ±2.4652.92 ±15.67 2.03 ±0.84 MC 1.85 ±0.59 6.62 ±1.98 1.39 ±0.23 5.23 ±2.41 56.53 ±22.02 1.65 ±0.57 LKC 1.90 ±0.60 7.48 ±1.93 1.16 ±0.25 5.28 ±1.42 53.13 ±24.97 2.79 ±1.51 a MKC 1.84 ±0.66 8.28 ±2.44 a 1.24 ±0.27 4.48 ±2.27 50.07 ±23.80 2.09 ±0.56 HKC 1.56 ±0.45 7.05 ±1.88 1.25 ±0.27 5.13 ±0.8352.82 ±14.39 2.53 ±0.70 a

表3 魔芋膠對高脂小鼠心、肝、腦中MDA含量的影響(± s,n=12) μg/g

表3 魔芋膠對高脂小鼠心、肝、腦中MDA含量的影響(± s,n=12) μg/g

注:與模型對照組相比,a表示P<0.05.

組別 心 肝 腦NC 1.17 ±0.21 1.75 ±0.22 0.87 ±0.11 a MC 1.50 ±0.55 1.78 ±0.26 1.09 ±0.22 LKC 1.51 ±0.49 1.73 ±0.22 0.87 ±0.22 a MKC 1.27 ±0.42 2.03 ±0.31 0.87 ±0.13 a HKC 1.77 ±0.83 1.96 ±0.36 0.91 ±0.16

高脂血癥是由于脂肪代謝或運轉異常使血漿一種或多種脂質高于正常時的病癥.劉紅[7]研究表明,魔芋膠能降低鵪鶉血液及其肝臟中TC和TG的含量;Vasques等[14]研究表明,藤黃酸和魔芋葡聚糖復合物能夠降低肥胖小鼠血清中TC和LDL含量;黃訓端等[15]研究表明,銀杏黃酮和魔芋精粉的復合物能降低大鼠的血脂水平.本研究表明,魔芋膠中、高劑量組小鼠血清中TC含量低于模型對照組,魔芋膠低、中劑量組小鼠血清中TG含量低于模型對照組,與Vasques等[14]和黃訓端等[15]的研究結果一致.說明魔芋膠具有降血脂作用.

超氧陰離子自由基(O-·2)是SOD的底物,如不能被及時清除,它們會攻擊生物膜脂質中的多聚不飽和脂肪酸,引發脂質過氧化反應,生成MDA等脂質過氧化物.在不同的條件下既可作還原劑在SOD作用下變成O2,又可作氧化劑變成H2O2,H2O2可在CAT作用下生成H2O和O2.徐玲玲等[16]研究表明,提高小鼠體內 SOD 和CAT的活性、降低MDA的含量,可以提高小鼠的抗氧化能力;黃訓端等[15]研究顯示,銀杏黃酮和魔芋精粉的復合物可降低血清和肝臟中的MDA含量,提高紅細胞和肝臟中SOD活性,從而可提高小鼠的抗氧化能力.本研究表明,魔芋膠可以提高高脂小鼠肝臟中SOD活性及腦中CAT活性,降低小鼠腦中MDA含量,說明魔芋膠可以增強高脂小鼠的抗氧化能力.

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