豬瘟免疫失敗原因分析

王 彬，萬 莉，張 琦，馬 磊，顏其貴,2*!

(1.四川農業大學動物生物技術中心，四川 雅安 625014；2.動物疫病與人類健康四川省重點實驗室，四川農業大學，四川 雅安 625014)

豬瘟具有高度接觸傳染性，流行廣泛，發病率、死亡率高，危害極大[l-2]。由于豬瘟造成的損失嚴重，促使很多國家制定和執行豬瘟的防治和根除計劃，并在歐美許多國家取得成功。目前仍有很多國家和地區有豬瘟流行，近年來在一些宣布消滅豬瘟的國家也相繼復發，我國一些地區的豬瘟發病率也呈上升的趨勢。

目前，除典型的病例外，豬瘟流行和發病特點已發生了很大變化，這種變化是世界性的。我國豬瘟的流行形式也發生了很大變化，如：流行形式轉變為地區性散發流行，疫點顯著減少；病程由急性變為慢性過程；臨床癥狀由典型變為非典型的溫和型豬瘟，癥狀顯著減輕，發病率不高，病勢較緩和，死亡率降低，仔豬死亡率較高，成年豬較輕或可耐過，病理變化也不典型[3-4]。由于病原毒力降低，出現持續感染(亞臨床隱性感染)、胎盤垂直感染(仔豬先天性感染)、妊娠母豬帶毒感染(母豬繁殖障礙)及新生仔豬的免疫耐受等[5-6]。這些帶毒豬的存在，成為豬瘟發生的重要原因，尤其是亞臨床感染的豬，常規方法很難確診,從而給豬瘟防治工作帶來新的困難。此外多種因素引起的免疫失敗也是威脅養豬業的健康發展主要因素。現將目前導致豬瘟免疫失敗的原因歸納如下。

1 機體因素

1.1 母源抗體的干擾

母源抗體具有雙重性，對初生仔豬有保護作用，但也會影響仔豬的免疫效果。因此在仔豬免疫時，能否起良好的免疫效果與母源抗體滴度有關。當母源抗體滴度高時，實施免疫接種，疫苗病毒會被母源抗體中和而不起保護作用。因此，在免疫接種前要考慮母源抗體的滴度，同時還要注意母源抗體的整齊度。具體做法是免疫接種前測母源抗體滴度，調整母源抗體的整齊度保證空懷母豬豬瘟的抗體水平不低于1:64，分娩母豬豬瘟的抗體水平不低于1:32。對反復接種后抗體水平仍然很低的母豬以及帶毒母豬應及時淘汰。

有資料報道，母豬在妊娠30 d前、10～ 50 d、20～ 97 d排 毒、30～100 d接種疫苗后均可引起胎盤感染，即引起母豬繁殖障礙。胎盤感染后沒有死亡的仔豬往往成為亞臨床感染者，可能長期帶毒、排毒。也有資料顯示，母豬帶毒則對豬瘟疫苗的免疫應答差，并能垂直傳播給下一代，從而引起溫和型豬瘟的發生。

1.2 母豬持續感染和仔豬胎盤感染

母豬持續感染和仔豬胎盤感染是目前引起免疫失敗的重要原因。導致豬瘟在豬場形成惡性循環。即豬瘟亞臨床感染—胎盤感染—母豬繁殖障礙—仔豬帶毒—后備母豬—亞臨床感染，如此惡性循環。使得帶毒豬在臨床中有3%～33%的帶毒率。

母豬持續感染是對同窩豬和環境的最大污染。持續感染母豬不停地向外排出病毒。有試驗報道人工復制的豬瘟病毒持續感染的帶毒母豬動物模型，可帶毒750 d，這種豬甚至可以終生帶毒、排毒，為豬瘟病毒的主要儲存宿主，血液中的含毒量可達105～106PFU/mL。再與帶毒公豬或健康公豬自然交配或人工授精懷孕產仔，可產下帶毒的木乃伊胎和死胎，用豬瘟熒光抗體檢查“胎豬”均為陽性。

胎盤感染后，引起母豬繁殖障礙，出現弱胎、死胎、甚至木乃伊胎。從死亡仔豬體內可分離到豬瘟病毒。經胎盤感染不死的仔豬往往成為持續感染者，可長期帶毒、排毒，其本身并不表現臨床癥狀。除了對豬場造成惡性循環外，這種經胎盤感染的仔豬出生后，吸吮初乳，數日內病毒血癥可一次性降低。但病毒存在于全身上皮組織、淋巴樣組織和網狀內皮組織。這種感染豬不能建立中和性抗體應答，形成免疫耐受，以至于對疫苗免疫后不能產生免疫應答。這些豬的存在，使得豬場隨時面臨豬瘟的威脅。

1.3 免疫抑制性疾病造成的免疫失敗

近年來，豬瘟疫苗抑制性疾病呈上升趨勢。一方面使豬瘟呈現非典型性感染和發病，豬瘟典型癥狀消失給診斷帶來極大的困難；另一方面，豬瘟病毒的毒力增強，雖然經過免疫接種，仍常造成免疫失敗；同時多種病原混合感染和復合癥使疾病更為復雜，特別是一些條件性、環境性病原微生物所致的疾病如豬繁殖和呼吸綜合征、圓環病毒感染、支原體肺炎等都破壞豬的免疫器官，造成不同程度的免疫抑制，除了容易導致細菌性疾病混合感染或繼發感染外，更為嚴重的是導致相關疫苗免疫失敗。

1.4 濫用免疫抑制性藥物

一些藥物如氟苯尼考、卡那霉素、磺胺唑類、皮質激素等，對B淋巴細胞的繁殖有一定抑制作用，能明顯影響細菌性和病毒性疫苗的免疫效果。尤其在免疫前后不規范的使用這些藥物，可導致機體白細胞減少，從而影響免疫應答。另外，霉變飼料含有各種霉菌毒素，可引起肝細胞的變性和壞死，淋巴結出血、水腫，嚴重破壞機體的免疫器官，造成機體免疫抑制。

1.5 應激

動物機體的免疫功能在一定程度上受到神經、體液和內分泌的調節，在氣候驟變(過冷過熱)、濕度過大、通風不良、噪音、環境突然改變、轉群、運輸、斷奶、去勢、擁擠、捕捉、驚嚇、飼料突然改變等各種應激因素的影響下，機體腎上腺皮質激素分泌增加，而這些激素可顯著損傷T淋巴細胞，對巨噬細胞產生抑制作用，并促進IgG的分解代謝。應激反應敏感期豬的免疫力會有不同程度的下降，而疫苗接種作為另一種應激會加重機體的負面反應，進一步增加免疫失敗的幾率。

2 疫苗因素

2.1 疫苗的質量

1)疫苗可能受到豬瘟病毒污染。目前生產廠家多用細胞培養法制苗，如果用同源(乳豬腎)細胞來生產疫苗，就存在帶毒傳染豬瘟的危險；用異源(牛睪丸、羊腎)細胞生產苗，也存在豬瘟病毒污染的危險性。

2)疫苗效價達不到要求。免疫劑量與保護水平密切相關，當劑量不足時，攻毒后不能阻止強毒在體內復制和帶毒。由于監管不嚴，有的廠家只重視經濟效益，忽略了質量，疫苗制造工藝流程控制不嚴，導致疫苗效價和抗原效價降低或失效。

2.2 運輸和保存

絕大多數疫苗必須于低溫下保存和運輸，并嚴禁反復凍融。

豬瘟凍干疫苗要求低溫保存，而且在不同溫度條件下保存的期限有所不同。按生物制品規程規定。本疫苗應于-l5 ℃冷凍條件下保存。有效期為1.5年；0～8 ℃冷暗、干燥處保存，有效期為6個月；8～25 ℃陰暗干燥處保存，有效期為10 d。

疫苗從生產廠家到用戶手中需要經過許多環節和長途運輸，由于運輸條件和保溫措施的制約，有時疫苗到場的時已近于失效或低效苗。當然豬瘟淋脾毒耐熱保護劑疫苗可以解決這個問題。

2.3 疫苗稀釋

稀釋疫苗的有效期：豬瘟疫苗稀釋后降解速度加快，有效時間縮短，用0.9%無菌生理鹽水稀釋后，在氣溫15 ℃以下6 h用完，15～27 ℃應在3 h用完。如不能在冰箱或冰瓶內保存 8 h內效價會損失90%。

疫苗稀釋液失效：豬瘟疫苗稀釋液的pH值應控制在6.8～7.4之間。實際操作時，由于對稀釋液pH值的測試不嚴格，使用過酸或過堿的稀釋液稀釋疫苗，造成病毒蛋白質變性而失去免疫性。

2.4 “聯苗”免疫效果不確實

目前我國部分生物制品廠生產的“豬瘟-丹毒二聯苗”、“豬瘟-丹毒-肺疫三聯苗”，由于丹毒菌苗中含有吐溫-80成分，它干擾豬瘟疫苗的免疫，致使豬瘟的免疫效果不確實。據調查，部分場在注射“聯苗”后，豬瘟的發病率明顯偏高。

2.5 疫苗間的干擾

如果同時使用2種或2種以上具有干擾作用的疫苗，接種疫苗的間隔時間不當，影響抗體的產生。

3 免疫程序不合理

免疫程序存在缺陷是造成免疫失敗的主要原因。合理的免疫程序是指選擇最佳的疫苗，最佳的免疫劑量，最佳的免疫途徑，最佳的免疫次數和最佳的免疫間隔時間。制定合理的免疫程序的關鍵是排除母源抗體的干擾，確定合理的首免日期。做好母源抗體水平監測，隨時調整仔豬首免日期。目前，我國大多數養豬場戶一般采用種豬集中統一免疫、斷奶時母豬與其仔豬同時免疫和超前免疫3種免疫程序。

第1種，種公豬、種母豬一年2次集中統一免疫，每頭種(公、母)豬每次接種4～6頭份豬瘟疫苗；仔豬2l～25日齡左右進行首次免疫，每頭仔豬接種2～3頭份；50～60日齡左右加強免疫，每頭豬接種3～4頭份。

第2種，即“斷奶時母豬與其仔豬同時免疫”的方法有一定的理論根據，在生產上也起到很大的積極作用。但由于目前我國許多規模豬場都采取了早期斷奶技術，仔豬的斷奶時間在21～28日齡。雖然多數學者認為，適當提高免疫劑量有利于提高抗體水平，同時加大劑量亦可中和一定的母源抗體[7]。采用這種免疫程序時，應先測定仔豬母源抗體效價，再確定免疫的時間和劑量[8]。

第3種，即“超前免疫”的方法在理論上也是可行的[3]。因為豬的多數母源抗體不能通過胎盤進入胎兒體內，初生仔豬體內母源抗體極少，不足以干擾弱毒疫苗與免疫細胞的接觸。但是初生仔豬的免疫系統尚未發育完全，免疫應答的能力不強，也存在免疫效果不佳的問題。

4 免疫操作技術的問題

4.1 器械消毒不嚴

由于缺乏消毒觀念，預防注射時，不按要求消毒器械。遇潛伏感染豬瘟病毒的豬只，在注射時，若不能做到一豬一針，那么，針頭和注射器將會帶毒，而且還會造成整瓶稀釋后的疫苗污染或機械帶毒接種。使防疫注射變成了帶毒感染傳播的直接途徑。致使免疫接種后引發豬瘟流行。

4.2 消毒藥品使用不當

預防注射時，防疫人員往往只用碘酊作局部消毒，而不用酒精脫碘或應用過多的5%碘酊消毒，碘酊未干就急于注射疫苗。使碘酊與疫苗接觸，造成疫苗失效或效價降低，失去免疫效力。實驗研究結果表明，當碘酊濃度為5%～6% 時，對豬瘟疫苗效價有明顯影響。

4.3 注射針頭選擇不當

獸醫在防疫注射時為了注射方便，常常選用短而粗的針頭進行防疫注射，針孔大而淺，疫苗注射到皮下脂肪層，影響機體對疫苗的吸收速度，同時容易造成疫苗從針孔中向外流失，減少了有效免疫劑量。

4.4 疫苗的用量

我國目前核定的豬瘟免疫量為每頭份150個兔體反應單位，而國外的核定標準為每頭份400個兔體反應單位。因此，在我國每頭豬接種1頭份的豬瘟免疫量顯然是不夠的。

疫苗的用量過多或不足。在一定的安全范圍內，抗體產生的多少隨抗原的增加而增加，但抗原超過一定的安全范圍時就會導致“免疫麻痹”；相反疫苗使用劑量過少，也不能刺激機體產生較高的抗體水平。

5 霉菌毒素的影響

幾乎所有的霉菌毒素都對免疫系統有破壞作用，使豬的免疫系統不足以抑制病原體的侵害，為疾病的發生創造了有利條件；霉菌毒素能導致機體產生免疫抑制，引起豬群免疫失敗[9]，使豬只注射疫苗后抗體水平仍然很低，誘發多種疾病的發生，導致疫病傳播。例如黃曲霉素1(AFB1)和新月霉菌產生的T-2毒素會抑制蛋白質合成和細胞增殖，霉菌毒素在生物體外對淋巴細胞具有細胞毒殺性，可能因霉菌毒素對細胞膜作用(包括淋巴細胞受體改變)或干擾巨分子合成及其功能。

6 飼養管理和飼料質量的影響

飼養密度過大，通風不良，空氣中有害氣體濃度過高，使豬群長期處于應激狀態下，免疫應答能力下降，造成免疫失敗。飼料中維生素E、維生素A和鋅、鐵、硒等微量元素營養物質缺乏或不足均會影響抗體的生成速度或生成數量而導致免疫滯后。霉變飼料對機體的影響更大，由于其含有各種霉菌毒素，可嚴重破壞機體的免疫器官，造成機體的免疫抑制。

根據對豬瘟免疫失敗的原因分析，切實做好豬瘟的綜合防治工作是減少免疫失敗發生豬瘟的關鍵。可以采取針對性的措施如：優化飼養條件，提高豬群的免疫應答率，定期監測血清、淘汰帶毒種豬和及時補注豬瘟疫苗，規范免疫環節，重視疫苗管理工作，規范臨床用藥，制定合理的免疫程序，杜絕使用霉變飼料，控制免疫抑制性疾病，加強管理，建立和完善可備查的防疫檔案及生豬出生檔案，強化對防疫注射工作的監督管理。

豬瘟免疫失敗不僅對生豬生產造成不同程度的損失，而且對防疫隊伍的服務質量、行業威望和行業形象造成極為不利的影響。因此，探索免疫失敗的原因是獸醫防疫工作者應研究的課題，是有效預防和控制畜禽疫病發生、傳播、流行的一項重要工作，是促進畜牧業健康穩定發展的關鍵。

徹底解決豬瘟免疫失敗將對我國豬瘟的防治和凈化具有重要的意義。

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