通脈降脂方對神經元膠質細胞共培養缺氧模型保護作用的研究*

徐 強，鄭偕扣，李 燁，武重陽，江海濤，趙英強，孫蘭軍

（天津中醫藥大學第二附屬醫院，天津 300150）

缺血是臨床上引起神經細胞損傷最常見的原因，缺血后神經元死亡是一個極其復雜的病理過程，主要表現為壞死和凋亡兩種形式，其中凋亡可能決定了最終梗死面積。膠質細胞和神經元是中樞神經系統最主要的細胞成分，其中膠質細胞參與構成中樞神經元生存的微環境，對神經元的發育、生長及損傷后再生發揮著重要作用。由于神經保護劑可減少腦梗死面積，不引發出血，無溶栓、抗凝治療出血的并發癥，用前無需進行詳細的病因鑒別診斷，使得早期治療成為可能，因而神經保護劑的治療效果和前景是令人鼓舞的。

中藥作用的多途徑性與腦損傷病理變化的多樣性具有針對性效應，其作用靶點不僅在神經元，同時可通過其“伙伴細胞”——星形膠質細胞的介導發揮保護效應。目前已被動物模型和臨床試驗證實的中藥保護劑有銀杏、三七皂苷、人參皂苷、補陽還五湯等。通脈降脂方是天津中醫藥大學第二附屬醫院院內制劑，長期應用于臨床，對于高血壓、高脂血癥及腦血管病有確切臨床療效，獲得了顯著的社會效益和經濟效益。本方由鹿角、三七、人參、全蝎、水蛭按照 2∶2∶2∶1∶1 組成，具有滋陰益氣、活血化瘀功效，前期藥理研究證實通脈降脂方能降低血液黏度，增強紅細胞變形能力，改善腦組織微循環?；谝陨涎芯炕A，本研究從細胞和整體兩個方面探討通脈降脂方神經保護的作用及機制，為臨床上應用中藥治療腦血管疾病神經損傷提供實驗依據。

本研究采用星形膠質細胞和神經元共培養模型，將神經元細胞接種在膠原包被的3.0 μm的Transwell PTFE微孔膜上，用含阿糖胞苷的培養基培養1周后，將此長滿神經元的Transwell PTFE微孔膜轉入長有星形膠質細胞的培養孔中，實現神經元和星形膠質細胞的共培養。此種共培養體系既能夠較好地模擬在體時的腦內真實環境，反映神經元和星形膠質細胞之間的相互關系，又能夠將兩種細胞完全分離，避免了普通共培養方法無法將兩種細胞分離的缺陷。在缺氧損傷條件下，使用通脈降脂方進行干預，結果顯示通脈降脂方能促進神經元細胞和星形膠質細胞活力的提高，降低細胞早期凋亡率，明顯減少乳酸脫氫酶的釋放，神經元和膠質細胞共培養組療效優于單獨神經元組，并呈現較好的量效關系。

在此基礎上，筆者應用干預自發性高血壓（SHR）大鼠，從整體動物的層次進一步探討其作用機制。SHR大鼠是一種被廣泛認可的用于研究人類原發性高血壓的遺傳型動物模型。其在出生后前幾個月時間內能夠自行發展成為穩定的高血壓，同時伴隨出現高血壓相關的包括腦組織在內的多種靶器官損傷。本研究顯示，中藥復方通脈降脂方在改善血壓、血脂的同時，可明顯減少神經元凋亡數目，結果與體外實驗一致。提示通脈降脂方對于早期腦損傷的預防有一定價值，為開發促進內源性神經再生的適合于臨床應用的藥物提供實驗依據。

本研究從細胞學和整體動物的不同層次，揭示了中藥通脈降脂方綜合的神經保護作用，并初步闡明其獨特的作用機制，其神經保護作用可能部分通過星形膠質細胞達到保護作用。為臨床應用中藥治療神經損傷提供新的依據，并為通脈降脂方進一步深入研究和開發提供了新的思路，對神經損傷的防治有比較重要的意義。