均相免疫發光檢測法測定在肺癌患者血清CA125中的應用比較

劉佳 王鈞 王燕

廣東省第二人民醫院呼吸內科 廣東廣州 516898

肺癌是最常見的惡性腫瘤之一，病死率極高。據統計，2000年我國城市居肺癌死亡率為42.08/10萬人口，并呈逐年增加趨勢，在許多發達國家及我國大城市如北京、上海、廣州患病率和病死率均上升為惡性腫瘤的第1位。血清腫瘤標志物的檢測是肺癌診斷和治療觀察的重要指標之一。目前采用半定量酶免試劑和進口熒光免疫、放免試劑進行檢測，不但需要進口，而且在準確性和敏感性方面還有一定的欠缺，本研究應用國產新型測定試劑和方法對臨床Ⅲ～Ⅳ期肺腺癌血清CAl25進行測定并與傳統測定方法進行比較，應用該測定方法對患者化療前后血清CAl25水平進行了觀察，旨在了解該種測定方法的穩定性和和敏感性，并觀察化療對患者血清CAl25水平的影響。

資料與方法

資料:選擇本院2009年1月～2012年4月住院肺癌患者30例，男19例，女11例;年齡39～76歲，平均59歲;均經支氣管鏡或CT引導下經皮肺肺活檢病理證實，均為腺癌Ⅲ～Ⅳ期患者，且無明顯心臟、肝臟和腎臟等疾病。

化療前2天及化療后1周，清晨空腹抽取外周靜脈血6rnl，離心提取血清備用。

儀器采用美國雅培公司ACCESS2型全自動自動發光免疫分析儀，分別采用進口熒光免疫試劑盒及廣東虹業抗體科技有限公司生產的脂質體均相免疫發光檢測對患者血清CA125進行測定，并且采用脂質體均相免疫發光檢測對患者化療前后血清CAl25水平的動態變化進行對比。

計量資料比較:分別應用X2檢驗和 t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

結 果

采用進口熒光免疫試劑肺腺癌檢出陽性患者21例，陽性率為70%，而采用脂質體均相免疫發光檢試劑盒檢出陽性患者為24例，陽性率為80%，前者血清CAl25水平為(133.59±53.45)u/ml，后者 CAl25 水平為(128.23 ±42.95)u/ml，兩種方法在肺癌檢出陽性率方面差異顯著。在血清CAl25水平上兩種方法無明顯差異。化療后患者血清CAl25水平均呈現明顯下降，具有明顯統計學意義。見表1和表2。

表1 傳統方法與脂質體均相免疫發光檢測法檢出率比較

表2 化療前后患者血清cAl25水平變化

討 論

CA125是一種細胞表面的高分子量黏液樣糖蛋白，1981年由Bast等首先發現從卵巢漿液性乳頭狀囊腺癌所獲得上OVCA433表達的抗原，是一種類似黏蛋白的糖蛋白負荷物，它存在于卵巢癌細胞的表面，80%以上的非黏液表皮卵巢癌可表達這種抗原，是目前臨床上最重要的卵巢癌標志物，被廣泛用于卵巢癌及子宮內膜異位癥的診斷和治療。近來研究表明，CAl25濃度水平在肺癌患者與肺部良性疾病患者之間存在顯著性差異，對協助肺癌診斷及提示預后有一定的臨床價值［1］，CA125作為肺癌的血清學標志物之一具有非常高的敏感性和特異性［2］。周國勝等測定45例肺癌患者治療前血清CAl25［3］，結果腺癌Ⅲ～Ⅳ期患者CAl25水平明顯高于正常水平。CAl25水平隨臨床分期的增加而升高，陽性檢出率遞增。因此我們選擇腺癌Ⅲ～Ⅳ期患者，應用不同的測定方法對其CAl25水平進行檢測，以觀察其敏感性和穩定性，并對化療前后CAl25水平進行觀察，以期了解化療對患者血清CAl25水平的影響。結果發現應用脂質體均相免疫發光法，對肺癌的檢測陽性率明顯高于傳統檢測方法，穩定性良好。肺癌患者經化療后，患者血清CAl25較化療前明顯降低。說明應用脂質體均相免疫發光法測定CAl25是一種新型穩定、敏感的測定方法。脂質體均相免疫發光法采用CA～125 N～連接糖鏈抗原制備的單克隆抗體分離純化技術。此單抗特異性非常高，與其他糖類抗原沒有交叉反應。同時采用補體和抗體反應后介導的脂質體裂解技術，進一步增加了檢測的特異性;每個免疫脂質體可以交聯多個抗體，并包封有大量的堿性磷酸酶(AP)。當脂質體破裂，釋放大量的AP，經增強化學發光底物的作用導致很強的信號放大作用。因此具有很高的特異性。此方法操作簡單、定量準確。采用脂質體均相免疫發光法，不用洗去未結合的免疫脂質體，不失為一種臨床檢測患者血清CAl25水平好方法。Cedrés S，等發現［4］，CAl25水平在Ⅳ期肺癌患者血清中的變化與病情的惡化程度有關，因此，動態檢測CAl25水平可以幫助臨床選擇和調整治療方案。CAl25是腺癌Ⅲ～Ⅳ期患者診斷和治療過程中的一項重要參考指標，但作為肺癌的腫瘤學標志物，都有一定的局限性，多指標聯合檢測血清腫瘤學標志物，可提高檢出率［5］，采用脂質體均相免疫發光法測定肺癌患者血清 CAl25水平提高了陽性檢測率，聯合其它標志物檢測，有利于肺癌，特別是腺癌的診斷。

1 張麗華.NSE、CEA及CAl25聯合檢測在肺癌診斷中的價值.現代腫瘤醫學，2006，14(2):160 ～161.

2 Li CG，Huang XE，Xu L，et al.Clinical Application of Serum Tumor Associated Material(TAM)from Non～small Cell Lung Cancer Patients.Asian Pac JCancer Prev，2012，13(1):301 ～304.

3 周國勝，段紅興.肺癌患者血清CAl25檢測分析.中國臨床實用醫學，2010，4(11):131 ～132.

4 Cedrés S，Nuez I，Longo M，et al.Serum tumor markers CEA，CYFRA21 ～1，and CA ～125 are associated with worse prognosis in advanced non～smalL － Cell lung cancer(NSCLC).Clin Lung Cancer，2011，12(3):172～179.

5 方明，趙本玉.聯合檢測血清CEA、CAl25、FERRI、NSE在肺癌診斷中的應用價值.臨床肺科雜志，2010，15(9):1238～1239.