大耳兔去勢手術及脊椎骨的CT觀察

趙愛蓮 楊 林 劉建民

（遵義醫(yī)學院第五附屬（珠海）醫(yī)院 廣東 珠海 519000）

骨質(zhì)疏松癥是危及老年人健康的三大疾病之一，關于骨質(zhì)疏松的預防及治療仍沒有令人滿意的方法，臨床上關于骨質(zhì)疏松的實驗研究很多，主要基于建立骨質(zhì)疏松癥動物模型，兔是比較常用的動物之一，本文敘述大耳兔去勢手術方法，并對脊柱骨質(zhì)的CT形態(tài)及QCT骨密度進行研究，分析兔脊柱骨在手術后形態(tài)與骨密度的改變。

1 方法

將16只5月齡雌性大耳兔隨機分為手術組和偽手術組，每組各8只。

麻醉使用丙泊酚注射液，用生理鹽水按1∶5稀釋，用量為2.0－2.5mg／Kg體重，經(jīng)耳緣靜脈緩慢注射，一邊注射一邊觀察兔的角膜反應、肌松程度、痛疼反應，達到麻醉狀態(tài)后立即停止注藥，以防出現(xiàn)麻醉意外；待麻醉生效后保留靜脈通道，開始進行手術，術中根據(jù)兔麻醉情況適當追加劑量，保證手術正常進行。

麻醉生效后首選進行備皮，用剪毛剪剪去兔腹部皮毛，用碘伏皮膚消毒，鋪無菌巾，用左手拇、食二指橫向繃緊腹壁，右手用手術刀在腹正中縱向切一小口，并切透腹膜，然后用食指和中指伸入切開的小口，用手術剪在兩手指之間小心地沿腹正中線向上將腹膜、肌肉、皮膚一次剪開4～5cm，注意不要損傷腹內(nèi)器官；腹壁切開后，將腸管輕輕向一邊撥開，在腎臟后面尋找淡紅色的卵巢；如果沒有發(fā)現(xiàn)可沿著子宮輸卵管，于輸卵管末端，脊柱兩側(cè)尋找；找到卵巢后，手術組首先結(jié)扎卵巢兩端組織及血管，然后分別切除兩側(cè)卵巢，關閉腹腔（注意不要把卵巢掉入腹腔）；偽手術組打開腹腔并找到卵巢不做特殊處理后即關閉腹腔，用消毒過的腸線將腹膜、肌肉一次縫合，然后在傷口區(qū)灑上青霉素G80萬單位，再用螺旋縫合法縫合皮膚，傷口縫合后在傷口上涂碘酊消毒；術后3天內(nèi)肌注青霉素G80萬單位，每天1次。術后兔自由喂食、飲水，飼養(yǎng)溫度20－25℃，相對濕度為40%－70%。

脊柱骨的CT檢測用Siemens Somatom CT機、CT機配套的骨密度檢測模型及配套軟件；術前、術后1月、2月、3月及4月分別做CT腰椎骨層厚1mm薄層容積掃描；進行QCT骨密度檢測，并稱體重；做CT檢查對兔進行麻醉，麻醉方法和手術麻醉一樣；術后用薄層掃描數(shù)據(jù)做冠狀位及矢狀位多平面重組以及SSD重建。

QCT檢測：將麻醉后的兔仰臥放在骨密度測量模型上面，測量靠近脊柱骨兩端的松質(zhì)部分，用3mm層厚序列掃描，通過機器配置的骨密度測量軟件自動計算骨密度，每次復查檢測對比部位距腰椎骨端的距離一致。

2 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 15.0for windows統(tǒng)計軟件，組間均數(shù)比較用獨立樣本t檢驗，手術前后均數(shù)比較用配對t檢驗。

3 結(jié)果

16只兔手術均一次成功，術后兔均正常生活至實驗結(jié)束，其中12例順利在腎背后方找到卵巢，4例順著卵巢找到位于腎旁的卵巢，手術時間10分至25分鐘，平均約15分鐘；偽手術組時間比手術組平均短約2分鐘。

脊柱骨在術后3月密質(zhì)骨明顯變薄，兩端松質(zhì)骨密度減低，松質(zhì)部分范圍縮小，偽手術組變化不明顯。

手術組及偽手術組術前腰椎骨端松質(zhì)骨平均骨密度無差異；手術組術后松質(zhì)骨密度逐漸下降，但1、2月與術前比較無統(tǒng)計學意義；3、4月與術前比較骨密度減少有顯著差異（P＜0.01），術后第4個月松質(zhì)骨密度較術前減低27.14%（符合骨質(zhì)疏松診斷標準）。偽手術組術后各月變化沒有統(tǒng)計意義，兩組間的腰椎骨端松質(zhì)骨骨密度在術后1、2月無統(tǒng)計學差別，3、4月份兩組間都有顯著差異（P＜0.01）。

4 討論

骨質(zhì)疏松癥是以骨組織顯微結(jié)構(gòu)退化，骨礦物成分和骨基質(zhì)等比例地減少，骨皮質(zhì)變薄，骨小梁數(shù)量減少，骨脆性增加和骨折危險度升高的一種全身骨代謝障礙的疾病，嚴重危及老年人健康，臨床上有很多關于骨質(zhì)疏松的研究，主要基于動物實驗，在骨質(zhì)疏松癥動物模型的報道中，選用的動物多為大鼠，而大鼠的骨體積小、骨量較少；一些作者［1，2］選用兔制作骨質(zhì)疏松模型，兔具有以下優(yōu)點：性情溫順，易于獲取，便于飼養(yǎng)，成本低廉，取血方便而利于動態(tài)觀察。骨骼轉(zhuǎn)化快，約為人的三倍，故短期內(nèi)即可觀察到骨組織的改變［3］；兔骨質(zhì)疏松模型的建立主要方法也是去勢法，詳細介紹雌兔去勢手術的文章不多。

兔的卵巢為卵圓形，長1.0－1.7cm，寬0.3－0.7cm，淡紅色，表面常有半透明的顆粒狀突起，形似桑椹，位于腹腔背側(cè)脊柱兩側(cè)緣，輸卵管的前端附近［4］，Merle［5］指出卵巢一般位于腎臟的背側(cè)尾端脂肪內(nèi)，卵巢懸韌帶的足夠長，這樣就容易將卵巢、輸卵管和子宮角拉出卵巢窩，方便手術。

Merle對兔在內(nèi)的嚙齒類去勢手術方式采取俯臥，從背部做小切口，然后從脊柱兩旁最后面了骨下緣進入腹內(nèi)切除卵巢，這種方法創(chuàng)傷小，但操作難度大，要求手術者必須非常熟練，并且容易損傷肝脾及腎。

盧慶琢［6］的方法是自膝皺褶前緣向腹中線作垂線，其交點為切口部位，沿腹正中線向前將腹膜、肌肉、皮膚一次剪開4－5cm，，這種方式切口大，利于尋找并切除卵巢；術后無需特殊護理。

我們采用兔仰臥，腹部正中切口，根據(jù)視野可適當擴大切口，一般從腸管側(cè)緣找到腎臟，在腎臟的背后側(cè)常常都能順利找到卵巢，少數(shù)是通過子宮角、卵巢找到卵巢。

腹壁采用分兩次縫合，在腹膜肌肉層縫合后在傷口上涂抹青霉素G，術后注射三天，全組未出現(xiàn)感染及其它并發(fā)癥。

本實驗顯示手術組腰椎骨端松質(zhì)骨骨密度在手術后2月開始下降，第3、4月下降明顯，與手術組術前及偽手術組術后同時間比較都有統(tǒng)計學的差異（P＜0.01）；第4月時與術前骨密度比較減低大于25%，根據(jù)中國人骨質(zhì)疏松癥建議診斷標準（第二稿）［7］，符合骨質(zhì)疏松診斷標準。偽手術組術前及術后1－4月松質(zhì)骨骨密度密沒有統(tǒng)計學差異，說明本手術方法可靠，達到去勢建立骨質(zhì)疏松模型的效果。

5 結(jié)論

去勢法建立兔骨質(zhì)疏松癥模型切實可行，用通過腹部正中切口是一個操作簡便、安全可靠的方法。

［1］ 張娟，黃少慧，吳湘慧，等.骨靈片對去勢大鼠骨小梁三維結(jié)構(gòu)／骨強度的干預研究［J］.熱帶醫(yī)學雜志，2008；8（5）：429－432

［2］ 宮琳，周延民，李春艷，等.快速建立兔骨質(zhì)疏松癥動物模型的方法［J］.吉林大學學報（醫(yī)學版），2008；34（5）：903－906

［3］ 陳旭.骨質(zhì)疏松動物模型的研究進展（綜述）［J］.中國城鄉(xiāng)企業(yè)衛(wèi)生2009，132（4）：51－54

［4］ 胡建華，姚明，崔淑芳.實驗動物學教程［M］.上海：上海科學技術出版社；2009：446－447

［5］ Merle E.Olson and Jim Bruce；Ovariectomy，Ovariohysterectomy and Orchidectomy in Rodents and Rabbits［J］.Can Vet J Volume 27，No.12December 1986525－527

［6］ 盧慶琢，鮑勝森，劉正吉.母兔的卵巢摘除術［J］；中國獸醫(yī)雜志，1994，11（20）：34

［7］ 劉忠厚，楊定焯，等.中國人骨質(zhì)疏松癥建議診斷標準（第二稿）［J］.中國骨質(zhì)疏松雜志，2002；6（1）：1