化療聯(lián)合CIK細(xì)胞治療轉(zhuǎn)移性胰腺癌的臨床觀察*

王子兵，尚藝曼，張 勇，高全立

多年以來(lái)，手術(shù)、放療和化療一直是癌癥治療的主流［1］。直到1985年發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞介素 －2(IL－2)成功被應(yīng)用于黑素瘤的治療后，生物治療成為惡性腫瘤的第四種治療模式［2］。目前在我國(guó)臨床上應(yīng)用最為廣泛的生物治療是細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(cytokineinduced killer cells，CIK)治療。它是將人外周血單核細(xì)胞在體外用多種細(xì)胞因子共同培養(yǎng)一段時(shí)間后獲得的一類免疫細(xì)胞，這類細(xì)胞具有非主要組織相容性抗原限制性殺瘤活性，對(duì)多種惡性腫瘤細(xì)胞均有殺滅作用。臨床觀察發(fā)現(xiàn)，單純應(yīng)用CIK細(xì)胞或者與化療聯(lián)合應(yīng)用可使肺癌、胃癌、腎癌、鼻咽癌等患者獲益［3－6］。然而在胰腺癌中的治療效果尚不清楚。本文通過回顧性分析筆者所在科11例轉(zhuǎn)移性胰腺癌患者聯(lián)合應(yīng)用CIK細(xì)胞治療與化療的臨床資料討論該方法在該疾病治療中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與療法

1.1 一般資料 選擇2010－09～2012－07于筆者所在科住院的11例晚期胰腺患者，年齡18～80歲，其中6例經(jīng)病理學(xué)證實(shí)，5例靠影像學(xué)檢查診斷。所有患者KPS評(píng)分≥60分，內(nèi)臟器官功能正常，均接受化療聯(lián)合CIK細(xì)胞治療，化療用藥如下:7例接受替吉奧單藥，2例接受吉西他濱和替吉奧，2例接受吉西他濱也接受過單藥替吉奧治療。化療藥物的用量按照體表面積計(jì)算，具體為:吉西他濱1000 mg/m2，第1、8 d靜脈滴注30 min;替吉奧膠囊60 mg 2次/d(體表面積大于1.5m2)。化療用藥結(jié)束后2～3 d回輸CIK細(xì)胞。

本研究在實(shí)施之前已獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)，參與研究的所有患者均簽署知情同意書。

1.2 CIK細(xì)胞培養(yǎng) 采集患者外周血50 ml置于抗凝管中，利用Ficoll－Paque分離外周血單核細(xì)胞，在培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，同時(shí)加入IL－2、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子、抗CD3單抗、IFN、Retronectin等促進(jìn)T細(xì)胞增殖。待細(xì)胞數(shù)量達(dá)到5×109(需要10～16 d)將其溶于含有2%人血清蛋白的生理鹽水溶液中回輸給患者。回輸后第2天開始連續(xù)應(yīng)用2～5 dIL－2(200萬(wàn)U/d)以強(qiáng)化細(xì)胞療效。

1.3 療效評(píng)價(jià) 2～4周期治療后進(jìn)行評(píng)估，直至治療結(jié)束。按實(shí)體瘤評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)RESIST標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)價(jià):完全緩解(complete regression，CR)，部分緩解(partial regression，PR)，疾病穩(wěn)定(stable disease，SD)和疾病進(jìn)展(progressive disease，PD)。近期療效觀察指標(biāo)為疾病控制率(disease control rate，DCR)，包括 CR、PR 和SD。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 生存時(shí)間比較采用非配對(duì)t檢驗(yàn)，生存率比較采用Log－rank(Mantel－Cox)檢驗(yàn)分析，P≤0.05視為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 近期療效 11例中無(wú) CR病例，3例 PR，6例SD，2例PD，DCR為81.82%。

2.2 生存時(shí)間 截止至2012－04－30隨訪，8例病死，3例仍然生存。患者中位生存時(shí)間為14.87(4.7～30.53)個(gè)月，1年生存率為72.73%。

2.3 不良反應(yīng) Ⅱ度骨髓抑制2例，Ⅲ度骨髓抑制1例，Ⅳ度骨髓抑制1例，Ⅱ度腹瀉1便，Ⅲ度腹瀉1例，乏力、納差1例。

3 討論

胰腺癌預(yù)后極差［7］。化療是轉(zhuǎn)移性胰腺最常用的治療手段。在所有的化療藥物中，吉西他濱最為常用，是胰腺癌治療的金標(biāo)準(zhǔn)，但是其作用有限，有效率只有5%，中位生存時(shí)間5.7個(gè)月［8］。一項(xiàng)吉西他濱與厄洛替尼聯(lián)合應(yīng)用的臨床觀察結(jié)果證實(shí)，聯(lián)合應(yīng)用吉西他濱和/或替吉奧化療與樹突狀細(xì)胞疫苗取得了較好的療效，患者中位生存時(shí)間可達(dá)到近12個(gè)月［10］。在本研究中，接受吉西他濱和/或替吉奧聯(lián)合CIK細(xì)胞化療的患者中位生存時(shí)間達(dá)到14.87個(gè)月，1年生存率72.73%。這些結(jié)果提示，吉西他濱和/或替吉奧聯(lián)合生物治療在胰腺癌的治療中具有很大的應(yīng)用前景。

吉西他濱和/或替吉奧聯(lián)合生物治療取得較好療效的原因可能得益于化療藥物具有免疫調(diào)節(jié)作用。髓樣抑制性細(xì)胞(myeloid－derived suppressor cells，MDSC)是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一群免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞。腫瘤、感染、創(chuàng)傷等均可誘導(dǎo)該群細(xì)胞產(chǎn)生。腫瘤誘導(dǎo)產(chǎn)生的MDSC主要通過抑制CD4和CD8 T細(xì)胞的功能和促進(jìn)腫瘤血管形成發(fā)揮促進(jìn)腫瘤用［11］。因此，抑制MDSC的數(shù)量和功能有利于腫瘤的排斥。根據(jù)以往的報(bào)道，吉西他濱和5－氟尿嘧啶均可下調(diào)MDSC［12，13］。因此可以理解，當(dāng) MDSC 受到抑制后，作為主要由T細(xì)胞組成的CIK細(xì)胞能夠更好地發(fā)揮抗腫瘤作用。

根據(jù)以往的報(bào)道，單純應(yīng)用CIK細(xì)胞最常出現(xiàn)的不良反應(yīng)是發(fā)熱，在本項(xiàng)研究中并未出現(xiàn)。本研究中出現(xiàn)的不良反應(yīng)包括骨髓抑制、腹瀉、乏力、納差，考慮與應(yīng)用的化療藥物吉西他濱和/或替吉奧有關(guān)。

總而言之，本項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)晚期胰腺癌患者應(yīng)用化療聯(lián)合CIK細(xì)胞治療獲益顯著，但是由于樣本數(shù)量較少，這一結(jié)論尚需要更大樣本量的研究進(jìn)行證實(shí)。

［1］Devita V T Jr and Rosenberg SA．Two hundred years of cancer research［J］.N Engl J Med，2012，366(21):2207 － 2214.

［2］Rosenberg SA，Lotze M T，Muul L M，et al.Observations on the systemic administration of autologous lymphokine－activated killer cells and recombinant interlerkin－2 to patients with metastatic cancer［J］.N Engl J Med，1985，313(2):1485 －1492.

［3］Li JJ，Gu MF，Pan K，et al.Autologous cytokine－induced killer cell transfusion in combination with gemcitabine plus cisplatin regimen chemotherapy for metastatic nasopharyngeal cacinoma［J］.J Immunother，2012，35(2):189 －95.

［4］Liu L，Zhang W，Qi X，et al.Randomized study of autologous cytokine－induced killer cell immunotherapy in metastatic renal carcinoma［J］.Clin Cancer Res，2012，18(6):1751 － 9.

［5］Thanendrarajan S，Kim Y，Schmidt－wolf I.New adoptive immunotherapy strategies for solid tumours with CIK cells［J］.Expert O-pinion on Biological Therapy，2012，12(5):565 －72.

［6］Mesiano G，Todorovic M，Gammaitoni L，et al.Cytokine－induced killer(CIK)cells as feasible and effectiveadoptive immunotherapy for the treatment of solid tumors［J］.Expert Opinion on Biological Therapy，2012，12(6):673 －84.

［7］Jemal A，Siegel R，Ward E，et al.Cancer statistics［J］.CACancer J Clin，2009，59(2):225 －249.

［8］Burris H A，Moore M J，Andersen J，et al.Improvements in survival and clinical manifestation benefit with gemcitabine as firstline therapy for patients with advanced pancreas cancer:a randomized trial［J］．J Clin Oncol，1997，15(24):2403 －2413．

［9］Moore MJ，Goldstein D，Hamm J，et al．Erlotinib plus gemcitabine compared with gemcitabine alone in patients with advanced pancreatic cancer:A phaseⅢtrial of the National Cancer Institute of Canada Clinical Trials Group［J］．J Clin Oncol，2007，25(18):1960－1966．

［10］Kimura Y，Tsukada J，Tomode T，et al．Clinical and immunologic evaluation of dendritic cell－based immunotherapy in combination with gemcitabine and/or S－1 in patients with advanced pancreatic carcinoma［J］．Pancreas，2012，41(2):195 － 205．

［11］Gabrilovich D I and Nagaraj S．Myeloid－derived suppressor cells as regulators of the immune system［J］．Nat Rev Immunol，2009，9(2):162－174．

［12］Suzuki E，Kappoor V，Jassar A S，et al．Gemcitabine selectively eliminates splenic Gr－1+/CD11b+myeloid suppressor cells in tumor－bearing animals and enhances antitumor immune activity［J］．Clin Cancer Res，2005，11(24):6713 － 6721．

［13］Vincent J，Mignot G，Chalmin F．5－Fluorouracil selectively kills tumor－associated myeloid－derived suppressor cells resulting in enhanced T cell－ dependent antitumor immunity［J］．Cancer Res，2010，70(15):3052 －3061．