川楝子與炒黃川楝子急性毒性作用比較研究＊

唐大軒 熊靜悅 譚正懷

（四川省中醫藥科學院·國家中醫藥管理局中藥質量生物評價重點研究室，四川 成都 610041）

川楝子（Melia toosendan）為楝科（Meliaceae）楝屬（Meliaceae）川楝的果實（又名金鈴子等），廣泛分布于四川、湖北、貴州、河南等地。性味苦寒，有小毒，歸肝、小腸、膀胱經，具有疏肝泄熱、行氣止痛、殺蟲等功效，臨床用于治療胸脅、脘腹脹痛、疝氣痛、蟲積腹痛。川楝子中主要有效成分為川楝素，此外，還含有揮發油、黃酮及多糖等多種化學成分，川楝子活性成分還大量用于植物防護和機體毒理及藥理研究。有關川楝子毒性的記載首見于《名醫別錄》，謂川楝子有小毒，但臨床應用仍很廣泛，現代對其毒性的研究較少。由于川楝子的毒性作用，人們采用炒黃以炮制川楝子，達到降低其毒性作用的目的，然而，炒黃炮制川楝子真的可以達到減毒作用嗎？本文擬通過比較研究川楝子和炒黃川楝子水提物、乙醇提取物對小鼠的急性毒性作用，為臨床應用提供科學的實驗依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品

生川楝子水提取物，棕色膏體，1g浸膏相當于2.8g原生藥；生川楝子70%乙醇提取物，深棕色膏體，1g 浸膏相當于4.95g原生藥；炒黃川楝子水提物，棕褐色膏體，1g浸膏相當于2.6g原生藥。炒黃川楝子70%乙醇提取物，棕褐色膏體，1 g浸膏相當于4.34g原生藥。生川楝子飲片購自四川新荷花飲片公司，提取物由中國科學院成都生物研究所提供，給藥時以蒸餾水配制，給藥劑量以原生藥g·kg-1計。

1.1.2 動物

昆明種小鼠，SPF級，♀♂各半，由四川省中醫藥科學院實驗動物中心提供，合格證號SCXK（川）2008-19。飼養于SPF屏障系統中，光照條件為12h／12h明暗交替，溫度20-26℃，相對濕度40%-70%，以鼠全價顆粒飼料喂養。

1.1.3 儀器

電子天平，JY10001，良平儀器；電子天平，JA1003A，上海精天電子儀器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 生川楝子水提取物最大耐受量試驗

預實驗結果顯示無法測出其LD50，故本實驗擬測定其最大耐受量。將40只昆明種小鼠禁食不禁水16h后按體重隨機分為對照組和生川楝子水提物組（n=20），以最大濃度（1.12g原生藥·ml-1）、最大給藥體積（0.4ml·10g-1）灌胃小鼠1 次，逐日觀察并記錄給藥后14 日內動物的中毒表現以及死亡情況。第14d處死小鼠取心、肝、脾、肺、腎計算臟器指數。

1.2.2 生川楝子70%乙醇提取物LD50試驗

預實驗結果得到全死劑量及不致死劑量，故本實驗擬測定其LD50值。將50只昆明種小鼠禁食不禁水16h后按體重隨機均分為5組，給藥濃度分別為3.30g·ml-1、2.64g·ml-1、2.11g·ml-1、1.69 g·ml-1及1.35 g·ml-1，給 藥 體 積0.4ml·10g-1，灌胃給予小鼠1 次；逐日觀察并記錄給藥后14d內動物的中毒表現以及死亡情況。

1.2.3 炒黃川楝子水提物最大耐受量試驗

預實驗結果顯示無法測出其LD50，故本實驗擬測定其最大耐受量。將40只小鼠禁食不禁水16h后按體重隨機分為對照組和炒黃川楝子水提物組（n=20）；以最大濃度（0.95g原生藥·ml-1）、最大給藥體積（0.4 ml·10g-1）灌胃小鼠1次；逐日觀察并記錄給藥后14日內動物的中毒表現以及死亡情況；第14d處死小鼠取心、肝、脾、肺、腎計算臟器指數。

1.2.4 炒黃川楝子70%乙醇提取物LD50試驗

預實驗結果得到全死劑量及不致死劑量，故本實驗擬測定其LD50值。將60只小鼠禁食不禁水16h后按體重隨機分均為6組（n=10），給藥濃度分別為3.48g·ml-1、2.78g·ml-1、2.23g·ml-1、1.7g·ml-1、1.43g·ml-1及1.14g·ml-1，相鄰組見的劑量比為1∶0.8，給藥體積0.4ml·10g-1，灌胃給予小鼠1次；逐日觀察并記錄給藥后14日內動物的中毒表現以及死亡情況。

1.3 統計方法

所有數據均以表示，使用SPSS11.5軟件進行單因素方差分析；半數致死量LD50用Bliss法進行計算。

2 結果

2.1 生川楝子水提取物最大耐受量試驗

小鼠灌胃給予生川楝子水提取物或蒸餾水后未出現死亡或行為學、排泄物、分泌物等異常。給藥組體重與對照組比較無統計學差異，解剖肉眼檢查各組小鼠主要臟器均未發現明顯異常；從表1可以看出生川楝子水提取物組與對照組肝臟系數有顯著性差異。測得生川楝子水提取物的最大耐受量為≥44.80g·kg-1。

2.2 生川楝子70%乙醇提取物LD50試驗

小鼠在給生川楝子70%乙醇提取物后先后出現趴伏、少動、對外界刺激的反應降低，行動遲緩，嚴重者抽搐，從表2、3可見，多數動物在給藥后3h內發生死亡。解剖死亡小鼠見呼吸先于心臟搏動停止。測得其LD50為80.92g·kg-1，回歸方程y（Probit）=-18.52+12.32Log（D），LD50（Feiller校正）95% 的 可 信 限 為 72.71 -89.99 g · kg-1，LD5為59.51g·kg-1，LD95為110.04g·kg-1。

2.3 炒黃川楝子水提物最大耐受量試驗

小鼠灌胃給予炒黃川楝子水提取物或蒸餾水后未出現死亡或行為學、排泄物、分泌物等異常，給藥組體重與對照組比較無統計學差異，肉眼檢查各組小鼠主要臟器均未發現明顯異常；從表4可以看出炒黃川楝子水提取物組與對照組臟器系數比較無顯著性差異。測得炒黃川楝子水提取物的最大耐受量為≥38.0g·kg-1，臟器系數見表4。

2.4 炒黃川楝子70%乙醇提取物LD50試驗

動物在給藥后出現趴伏，少動，對外界刺激的反應降低，行動遲緩，嚴重者抽搐，解剖死亡小鼠見呼吸先于心臟搏動停止。多數動物在給藥后1h內發生死亡。由Bliss法計算得LD50為67.75g·kg-1，回歸方程y（Probit）=-7.93+7.06Log（D），LD50（Feiller校正）95%的可信限為57.86-77.57g·kg-1，LD5為39.63g·kg-1，LD95為115.82g·kg-1，見表5、6。

3 討論

川楝子是我國傳統中藥材，具有來源廣泛、價格低廉、作用多樣化且療效確切等優點。主要有鎮痛抗炎作用以及抗生育作用［1，2］。《名醫別錄》謂川楝子有小毒，但臨床應用仍很廣泛，現代對其毒性的研究較少。有臨床研究表明消化道的不良反應大多在服藥后1～2h內出現，表現為胃腸道刺激癥狀，并可發生急性中毒性肝炎，出現轉氨酶升高［3］。成年果子貍飼喂一定量的川楝子后，在短時間內即可引起中毒，主要表現為胃腸道刺激，肌肉震顫、四肢抽搐、肌無力等中樞神經系統癥狀，伴有肝臟為主的其他內臟器官出血［4］。

本研究測得生川楝子和炒黃川楝子70%乙醇提取物LD50分別80.92和67.75原生藥g·kg-1；生川楝子及炒黃川楝子水提物最大耐受量≥44.80 及38.0 原生藥g·kg-1。說明生川楝子與炒黃川楝子70%乙醇提取物的急性毒性作用相似，炒黃炮制川楝子并沒有降低其急性毒性作用。

表1 生川楝子水提取物對小鼠臟器系數的影響（，n＝10）

表1 生川楝子水提取物對小鼠臟器系數的影響（，n＝10）

注：與對照組比較，＊＊P＜0.01。

表3 給藥后死亡時間分布情況

表4 炒黃川楝子水提取物對小鼠臟器系數的影響（，n＝10）

表4 炒黃川楝子水提取物對小鼠臟器系數的影響（，n＝10）

表5 用Bliss法計算半數致死量

表6 給藥后死亡時間分布情況

1 紀青華，陸兔林.川楝子不同炮制品鎮痛抗炎作用研究［J］.中成藥，1999，21（4）：181-183.

2 賈瑞鵬，周性明，陳甸英，等.川楝子油對雄性大鼠的抗生育作用［J］.南京鐵道醫學院學報，1996，15（1）：1-3.

3 路志強.川楝子的性味功能與現代臨床應用［J］.內蒙古中醫藥，1997，15（1）：45-46.

4 劉進輝，曹迎春，李文平，等.果子貍川楝子中毒后的臨床表現及病理變化［J］.特產研究，1996，14（3）：28-29.