功能牛奶對(duì)小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的研究

任璐，張鋒華，苗君蒞，蔡濤，王輝，肖楊

（光明乳業(yè)股份有限公司乳品研究院乳業(yè)生物技術(shù)國(guó)家級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 200436）

隨著我國(guó)國(guó)民經(jīng)濟(jì)的迅猛發(fā)展，人們的工作和生活方式更加快節(jié)奏、高效率。加之總需應(yīng)對(duì)各種激烈的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)，使越來(lái)越多的人們長(zhǎng)期處于亞健康狀態(tài)，從而導(dǎo)致人體免疫力下降。與此同時(shí)，人民生活水平的提高及生活質(zhì)量觀的日益興起，人們?cè)趯?duì)飲食多樣化、營(yíng)養(yǎng)科學(xué)化方面提出了更高的要求，渴望通過(guò)調(diào)整飲食結(jié)構(gòu)、補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來(lái)提高自身的健康水平和生命質(zhì)量。綜觀這幾年的保健食品，增強(qiáng)免疫力的產(chǎn)品總是最多的，但以液態(tài)奶為主要原料的免疫牛奶產(chǎn)品較少。低聚果糖、菊粉、富硒酵母作為重要的功能性食品配料，關(guān)于其促進(jìn)腸道益生菌增殖[1-3]和抗氧化[4]的功能性報(bào)道很多。以牛奶這個(gè)普通食品為載體，通過(guò)添加低聚果糖、菊粉、富硒酵母等原料，利用主要成分各自的功能特性和相互的協(xié)同作用設(shè)計(jì)開(kāi)發(fā)了一款功能牛奶。本文通過(guò)小鼠實(shí)驗(yàn)從細(xì)胞免疫、體液免疫、單核-巨噬細(xì)胞功能及NK細(xì)胞活性4個(gè)方面，進(jìn)一步研究和全面評(píng)價(jià)自制研發(fā)的功能牛奶對(duì)其機(jī)體免疫調(diào)節(jié)的影響。

1 材料與方法

1.1 原料

牛奶：光明乳業(yè)牧場(chǎng)；低聚果糖：上海格信健康科技有限公司；菊粉：廣州市德比歐貿(mào)易有限公司；富硒酵母：安琪酵母股份有限公司。

1.2 儀器及試劑

BIO-RAD 680型酶標(biāo)儀：美國(guó)Bio-Rad公司；HERAcell 240型CO2培養(yǎng)箱：德國(guó)Heraeus公司；TW 20恒溫水浴鍋：德國(guó)Julabo公司；BX61顯微鏡：日本Olympus公司；DMI 3000-3N/PH倒置顯微鏡：德國(guó)Leica公司。高速乳化機(jī)-ULTRA-TURRAX IKA T18：IKA，德國(guó)；數(shù)顯恒溫水浴鍋：國(guó)華電器有限公司。

綿羊紅細(xì)胞（SRBC）、YAC-1細(xì)胞、雞紅細(xì)胞：北京聯(lián)合大學(xué)應(yīng)用文理學(xué)院保健食品功能檢測(cè)中心；RPMI 1640培養(yǎng)液：美國(guó)CellGro公司；都氏試劑（NaHCO31.0 g/L，K3[Fe（CN）6]0.2 g/L，KCN 0.05 g/L）；SA緩沖液（10 mmol/L醋酸鈉，pH5.0）；ConA、吩嗪二甲酯硫酸鹽、氧化型輔酶I：美國(guó)Sigma公司；小牛血清：長(zhǎng)春西諾生物科技有限公司；MTT：美國(guó)Promega公司；NP40：上海研卉生物科技有限公司；豚鼠血清、墨汁：上海麥莎生物科技有限公司；Giemsa染液：德國(guó)AppliChem公司；其他為常規(guī)試劑。

1.3 劑量設(shè)計(jì)

根據(jù)普通成人每日飲用500 mL（按60 kg體重計(jì)）牛奶計(jì)算，由于樣品量超出動(dòng)物最大承受量，需要將樣品濃縮。故將功能牛奶配方設(shè)計(jì)為：稱取低聚果糖120 g、菊粉50 g和富硒酵母1.5 mg加入100 mL牛奶中（水浴鍋中預(yù)熱到80℃），經(jīng)過(guò)高速剪切混勻、均制、殺菌后作為功能牛奶供試液，即將功效成分增加100倍，相當(dāng)于人體推薦量每日5 mL/60 kg。

1.4 受試樣品

根據(jù)本試驗(yàn)劑量設(shè)計(jì)要求及功能牛奶供試液的推薦劑量，設(shè)定低、中、高3個(gè)劑量組為每日0.4 mL/kg·bw、0.8 mL/kg·bw 和 2.5 mL/kg·bw，相當(dāng)于人體推薦量的5倍、10倍、30 倍。即取供試液 0.4 mL、0.8 mL、2.5 mL，加蒸餾水至20 mL，按照灌胃量0.4 mL/20 g·bw對(duì)小鼠灌胃。空白對(duì)照組和牛奶對(duì)照組分別給予蒸餾水和樣品牛奶。

1.5 動(dòng)物分組及喂養(yǎng)

將250只體重為（20±3）g的清潔級(jí)ICR小鼠[由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供，許可證號(hào)：SCXK-（京）2007-0005]，按體重隨機(jī)分入5個(gè)試驗(yàn)大組，每組50只（分別進(jìn)行NK細(xì)胞和淋轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)，DTH、脾指數(shù)和胸腺指數(shù)實(shí)驗(yàn)，溶血空斑和溶血素實(shí)驗(yàn)，碳廓清實(shí)驗(yàn)和吞噬實(shí)驗(yàn)）。每個(gè)試驗(yàn)大組中均設(shè)有空白對(duì)照組、牛奶對(duì)照組及低、中、高劑量組五小組，每小組10只。

1.6 試驗(yàn)方法

《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》（2003版）規(guī)定[5]：在細(xì)胞免疫功能、體液免疫功能、單核——巨噬細(xì)胞功能、NK細(xì)胞活性4個(gè)方面任2個(gè)方面結(jié)果陽(yáng)性，可判定該受試樣品具有增強(qiáng)免疫力功能作用。其中細(xì)胞免疫功能測(cè)定項(xiàng)目中的2個(gè)試驗(yàn)結(jié)果均為陽(yáng)性，或任1個(gè)試驗(yàn)的2個(gè)劑量組結(jié)果陽(yáng)性，可判定細(xì)胞免疫功能測(cè)定結(jié)果陽(yáng)性。體液免疫功能測(cè)定項(xiàng)目中的2個(gè)試驗(yàn)結(jié)果均為陽(yáng)性，或任1個(gè)試驗(yàn)的2個(gè)劑量組結(jié)果陽(yáng)性，可判定體液免疫功能測(cè)定結(jié)果陽(yáng)性。單核——巨噬細(xì)胞功能測(cè)定項(xiàng)目中的2個(gè)試驗(yàn)結(jié)果均為陽(yáng)性或任1個(gè)試驗(yàn)的兩個(gè)劑量組結(jié)果陽(yáng)性，可判定單核——巨噬細(xì)胞功能結(jié)果陽(yáng)性。NK細(xì)胞活性測(cè)定試驗(yàn)的1個(gè)以上劑量組結(jié)果陽(yáng)性，可判定NK細(xì)胞活性結(jié)果陽(yáng)性。因此，選取評(píng)價(jià)以上四方面來(lái)作為評(píng)判功能牛奶對(duì)小鼠免疫調(diào)節(jié)的作用。

1.6.1 喂養(yǎng)并稱重

按照劑量設(shè)計(jì)連續(xù)喂養(yǎng)小鼠30 d，每周稱重1次，計(jì)算試驗(yàn)初、中期、末期體重。

1.6.2 臟器/體重比值的測(cè)定

動(dòng)物連續(xù)給樣30 d后，頸椎脫臼處死，取脾臟和胸腺稱重，分別計(jì)算脾臟體重比值和胸腺體重比值。

1.6.3 細(xì)胞免疫功能測(cè)定

1.6.3.1 ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)

動(dòng)物連續(xù)給樣30 d后，頸椎脫臼處死，取脾臟制成脾細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞濃度為2×106個(gè)/mL，將細(xì)胞懸浮液分兩孔加入24孔培養(yǎng)板中，每孔1 mL，一孔加50 μL ConA 液（相當(dāng)于 5 μg/mL），另一孔作為對(duì)照，置5%CO2，37℃培養(yǎng)72 h。培養(yǎng)結(jié)束前4 h，每孔輕輕吸去上清液0.7 mL，加入0.7 mL不含小牛血清的PRMI1640 培養(yǎng)液，同時(shí)加入 MTT（5 mg/mL）50 μL/孔，繼續(xù)培養(yǎng)4 h，培養(yǎng)結(jié)束后，每孔加入1 mL酸性異丙醇，吹打混勻，使紫色結(jié)晶完全溶解后，以570 nm波長(zhǎng)進(jìn)行比色，記錄試驗(yàn)結(jié)果。

1.6.3.2 DHT測(cè)試

致敏：動(dòng)物連續(xù)給樣30 d后，每鼠腹部去毛，范圍約3 cm×3 cm，將1%的DNFB溶液50 μL均勻涂抹致敏。DHT的產(chǎn)生與測(cè)定：5 d后，用1%DNFB溶液10 μL均勻涂抹于小鼠右耳（兩面）進(jìn)行攻擊。24 h后，頸椎脫臼處死小鼠，用打孔器取下直徑8 mm的左右耳片，稱重并計(jì)算腫脹度。

1.6.4 體液免疫功能測(cè)定

1.6.4.1 抗體生成檢測(cè)試驗(yàn)

動(dòng)物連續(xù)給樣30 d后，將脫纖維綿羊紅細(xì)胞免疫5 d后，動(dòng)物頸椎脫臼處死，取脾臟，制成脾細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞濃度為5×106個(gè)/mL。將表皮層培養(yǎng)基（1 g瓊脂糖加雙蒸水至100 mL）加熱溶解后，放入45℃水浴保溫，與等量pH7.2～7.4且2倍濃度的Hanks液混合，分裝在小試管，每管0.5 mL，再向管內(nèi)加入50 μL 10%SRBC，20 μL脾細(xì)胞懸液，迅速混勻，傾倒于已刷瓊脂薄層的6 cm平皿上，放入二氧化碳培養(yǎng)箱中溫浴1.5 h，然后用SA緩沖液稀釋的補(bǔ)體（1∶10）加入到平皿中，繼續(xù)溫浴1.5 h后，計(jì)算溶血空斑數(shù)。

1.6.4.2 血清溶血素試驗(yàn)

動(dòng)物連續(xù)給樣30 d后，用2%（體積比）SRBC免疫動(dòng)物5 d后，眼眶采血，頸椎脫臼處死，分離血清。在96孔微量血凝板上加25 μL生理鹽水，分別在第一排加25 μL血清，以后各排座作對(duì)倍稀釋，每孔加1%SRBC100 μL，振蕩后 37℃放置 3 h，當(dāng)血球?qū)φ粘霈F(xiàn)沉落后觀察結(jié)果。

1.6.5 單核－巨噬細(xì)胞功能測(cè)定

1.6.5.1 小鼠碳廓清試驗(yàn)

動(dòng)物連續(xù)給樣30 d后，尾靜脈注射1∶3稀釋的印度墨汁，待墨汁注入，立即計(jì)時(shí)。注入墨汁后2 min和10 min，分別從眼靜脈叢取血20 μL，并將其加到2 mL 0.1%Na2CO3溶液中，用分光光度計(jì)在600 nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值，以Na2CO3溶液作空白對(duì)照。根據(jù)動(dòng)物體重、肝重和脾重計(jì)算吞噬指數(shù)。

1.6.5.2 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗(yàn)

動(dòng)物連續(xù)給樣30 d后，每鼠腹腔注射20%雞紅細(xì)胞懸液1 mL，間隔30 min，頸椎脫臼處死，固定于鼠板上，剪開(kāi)腹壁皮膚，注射生理鹽水2 mL，轉(zhuǎn)動(dòng)鼠板1 min，吸出腹腔洗液1 mL，分滴于2片玻片上，37℃孵箱濕孵30 min，用生理鹽水漂洗，晾干，以1∶1丙酮甲醇溶液固定，4%Giemsa－磷酸緩沖液染色3 min，再用蒸餾水漂洗晾干，用油鏡鏡檢，計(jì)算吞噬百分?jǐn)?shù)和吞噬指數(shù)。

1.6.6 NK細(xì)胞活性測(cè)定

動(dòng)物連續(xù)給樣30 d后，頸椎脫臼處死，取脾臟，制成脾細(xì)胞懸液（效應(yīng)細(xì)胞），取傳代后24 h YAC－1細(xì)胞加1640完全培養(yǎng)液，調(diào)整細(xì)胞濃度為1×105個(gè)/mL（靶細(xì)胞），取靶細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞各100 μL效靶比（50∶1），加入U(xiǎn)型96孔培養(yǎng)板，靶細(xì)胞自然釋放孔加靶細(xì)胞和培養(yǎng)液各100 μL，最大釋放孔加靶細(xì)胞和1%NP40各100 μL，上述各項(xiàng)均設(shè)3個(gè)復(fù)孔，于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 h，每孔吸取上清液100 μL置平底96孔培養(yǎng)板中，同時(shí)加入LDH基質(zhì)液100 μL，反應(yīng) 3 min，每孔加入1 mol/L的HCl30 μL終止，用酶標(biāo)儀在490 mm處測(cè)定光密度值（OD）。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

2 結(jié)果與分析

2.1 細(xì)胞免疫功能測(cè)定

2.1.1 ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)

淋巴細(xì)胞在免疫調(diào)控中起重要作用，其增殖反應(yīng)是反映淋巴細(xì)胞活化和功能的重要指標(biāo)。功能牛奶在不同劑量條件下對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的刺激作用，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1結(jié)果表明，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的功能牛奶30 d后，與空白對(duì)照組和牛奶對(duì)照組比較，每周各組的小鼠體重均無(wú)顯著差異，2.5 mL/kg·bw劑量組的OD值顯著高于空白對(duì)照組（p＜0.01），亦顯著高于牛奶對(duì)照組（p＜0.05），而0.4 mL/kg·bw劑量組和0.8 mL/kg·bw劑量組的OD值與對(duì)照組均沒(méi)有發(fā)生顯著變化（p＞0.05），淋巴細(xì)胞在免疫調(diào)控中起重要作用，特異性免疫是由淋巴細(xì)胞識(shí)別外源性抗原開(kāi)始，通過(guò)增殖和分化成效應(yīng)細(xì)胞行使清除抗原的功能。因此，淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)是反映淋巴細(xì)胞活化和功能的重要指標(biāo)[6]。說(shuō)明功能牛奶在2.5 mL/kg·bw劑量時(shí)能夠刺激淋巴細(xì)胞增殖的有絲分裂源活性，顯著增強(qiáng)其細(xì)胞免疫功能。

表1 功能牛奶對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響（n=10）Table 1 Effect of functional milk on activity of lymphocyte transformation of mice

2.1.2 對(duì)小鼠遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)（DHT）的測(cè)試

遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)是由T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答的一種類型，也是常見(jiàn)的一種免疫反應(yīng)，外周血液中T細(xì)胞亞群的數(shù)目和比值測(cè)定是估計(jì)體內(nèi)免疫調(diào)節(jié)平衡狀態(tài)的最有意義的參數(shù)，也是疾病嚴(yán)重程度和預(yù)后的重要標(biāo)志之一[7]。功能牛奶對(duì)小鼠遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)（DHT）的影響見(jiàn)表2。

表2結(jié)果表明，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的功能牛奶30 d后，與空白對(duì)照組和牛奶對(duì)照組比較，每周各組的小鼠體重均無(wú)顯著差異；各組小鼠的胸腺指數(shù)和脾指數(shù)均無(wú)顯著差異；在DTH試驗(yàn)中，2.5 mL/kg·bw劑量組的左右耳重量差值（腫脹度）顯著高于空白對(duì)照組（p＜0.01），亦顯著高于牛奶對(duì)照組（p＜0.05）；而牛奶對(duì)照組、0.4 mL/kg·bw劑量組和0.8 mL/kg·bw劑量組略高于空白對(duì)照組，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。以上結(jié)果說(shuō)明2.5 mL/kg·bw劑量組對(duì)小鼠遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)（DHT）有顯著影響，顯著增強(qiáng)其細(xì)胞免疫功能。

表2 功能牛奶對(duì)小鼠遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)（DHT）的影響（n=10）Table 2 Effect of functional milk on DTH of mice

2.2 體液免疫功能測(cè)試

體液免疫功能在免疫調(diào)控中起重要作用。功能牛奶在不同劑量條件下對(duì)小鼠體液免疫（溶血空斑數(shù)和抗體積數(shù)）的影響，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3結(jié)果表明，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的功能牛奶30 d后，與空白對(duì)照組和牛奶對(duì)照組比較，每周各組的小鼠體重均無(wú)顯著差異；在抗體生成細(xì)胞檢測(cè)試驗(yàn)中，2.5 mL/kg·bw劑量組的空斑數(shù)顯著高于空白對(duì)照組（p＜0.01），亦高于牛奶對(duì)照組（p＜0.05）；而牛奶對(duì)照組、0.4 mL/kg·bw劑量組和0.8 mL/kg·bw劑量組與空白對(duì)照組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在血清溶血素試驗(yàn)中，2.5 mL/kg·bw劑量組的抗體積數(shù)顯著高于空白對(duì)照組（p＜0.01），亦高于牛奶對(duì)照組（p＜0.05）；而牛奶對(duì)照組、0.4 mL/kg·bw劑量組和0.8 mL/kg·bw劑量組與空白對(duì)照組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。以上結(jié)果說(shuō)明2.5 mL/kg·bw劑量組有助于提高小數(shù)體液抗體水平。

2.3 單核－巨噬細(xì)胞功能測(cè)試

巨噬細(xì)胞是機(jī)體免疫系統(tǒng)的一種重要免疫細(xì)胞，不僅具有很強(qiáng)的吞噬功能，而且是主要的抗原提呈細(xì)胞，在非特異性和特異性免疫應(yīng)答中均起關(guān)鍵作用 。巨噬細(xì)胞在抗腫瘤免疫、抗感染免疫及免疫調(diào)節(jié)中均起重要作用，其吞噬功能的強(qiáng)弱可以直接反映細(xì)胞免疫功能的強(qiáng)弱[9]。

表3 功能牛奶對(duì)小鼠體液免疫（溶血空斑數(shù)和抗體積數(shù)）的影響（n=10）Table 3 Effect of functional milk on humoral immunity of mice

2.3.1 小鼠碳廓清試驗(yàn)

碳廓清法可以表觀小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能，通過(guò)測(cè)定其吞噬指數(shù)的變化來(lái)研究不同劑量組對(duì)小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能的影響，結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 功能牛奶對(duì)小鼠碳廓清試驗(yàn)的影響（n=10）Table 4 Effect of functional milk on clearance capacity of carbon of mice

表4結(jié)果表明，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的功能牛奶30 d后，與空白對(duì)照組和牛奶對(duì)照組比較，每周各組的小鼠體重均無(wú)顯著差異；在碳廓清試驗(yàn)中，2.5 mL/kg·bw劑量組的吞噬指數(shù)顯著高于空白對(duì)照組（p＜0.01），亦高于牛奶對(duì)照組（p＜0.05）；而牛奶對(duì)照組、0.4 mL/kg·bw劑量組和0.8 mL/kg·bw劑量組與空白對(duì)照組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。以上結(jié)果說(shuō)明2.5mL/kg·bw劑量組對(duì)小鼠有提高小鼠吞噬指數(shù)的作用，對(duì)小鼠的非特異免疫功能有顯著促進(jìn)作用。

2.3.2 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗(yàn)

巨噬細(xì)胞的吞噬功能在免疫反應(yīng)中起著至關(guān)重要的作用。功能牛奶在不同劑量條件下對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬能力的影響，結(jié)果見(jiàn)表5。

由表5結(jié)果可知，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的功能牛奶30 d后，與空白對(duì)照組和牛奶對(duì)照組比較，每周各組的小鼠體重均無(wú)顯著差異；在小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗(yàn)中，0.8 mL/kg·bw劑量組的吞噬率和吞噬指數(shù)顯著高于空白對(duì)照組（均p＜0.05）；2.5 mL/kg·bw劑量組的吞噬百分率和吞噬指數(shù)均顯著高于空白對(duì)照組（均p＜0.01），亦均顯著高于牛奶對(duì)照組（均p＜0.01），牛奶對(duì)照組與空白對(duì)照組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。以上結(jié)果說(shuō)明，0.8 mL/kg·bw劑量組和2.5 mL/kg·bw劑量組對(duì)小鼠的非特異免疫功能有顯著促進(jìn)作用。

表5 功能牛奶對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬能力的影響（n=10）Table 5 Effect of functional milk on phagocytic capacity of macrophages of mice

2.4 NK細(xì)胞活性測(cè)試

NK細(xì)胞（natural killer cell，自然殺傷細(xì)胞）是與T、B細(xì)胞并列的第三類群淋巴細(xì)胞，可非特異直接殺傷靶細(xì)胞，這種天然殺傷活性既不需要預(yù)先由抗原致敏，也不需要抗體參與，且不受主要組織相容性復(fù)合體（MHC）的約束，因此，把NK細(xì)胞活性作為非特異性免疫的重要指標(biāo)[10]。功能牛奶對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響見(jiàn)表6。結(jié)果可知，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的功能牛奶30 d后，與空白對(duì)照組和牛奶對(duì)照組比較，每周各組的小鼠體重均無(wú)顯著差異；在小鼠NK細(xì)胞活性測(cè)試試驗(yàn)中，2.5 mL/kg·bw劑量組的NK細(xì)胞活性顯著高于空白對(duì)照組（p＜0.05），且顯著高于牛奶對(duì)照組（p＜0.05）。以上結(jié)果說(shuō)明2.5 mL/kg·bw劑量組對(duì)于增強(qiáng)NK細(xì)胞活性有顯著促進(jìn)作用。

表6 功能牛奶對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響（n=10）Table 6 Effect of functional milk on activity of NK cells of mice

3 結(jié)論

本次試驗(yàn)從細(xì)胞免疫、體液免疫、單核-巨噬細(xì)胞功能及NK細(xì)胞活性4個(gè)方面，對(duì)功能牛奶的免疫功能的調(diào)節(jié)作用進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，不同劑量的功能牛奶對(duì)小鼠的體重差異無(wú)顯著影響；0.8 mL/kg·bw劑量組對(duì)于提高巨噬細(xì)胞吞噬能力有顯著作用；2.5 mL/kg·bw劑量組對(duì)提高小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化、增強(qiáng)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)、增加溶血空斑數(shù)和抗體體積、以及提高小鼠碳廓清能力和巨噬細(xì)胞吞噬能力，提高NK細(xì)胞活性均有顯著作用。該研究證明功能牛奶能全面提高機(jī)體免疫能力，且具有食用安全性。

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[1]張帆,汪會(huì)玲,孟晶.低聚果糖對(duì)人體腸道菌群的影響[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2006,33(2):158-159

[2]Gibson G R,Beatty E B,Wang X,et al.Selective stimulation of Bifidobacterium in the human colon by oligofructose and inulin[J].Gastroenterology,1995,108(4):975-982

[3]郭明若,S Gokavi,程建軍,等.益生素、益生菌與結(jié)腸癌[J].中國(guó)乳品工業(yè),2006,34(3):26-31

[4]羅培林,鄭萍,何軍,等.不同硒源及硒水平對(duì)大鼠生長(zhǎng)性能、血清抗氧化能力和組織硒沉積的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2012,24(7):1-9

[5]凌關(guān)庭.保健食品原料手冊(cè)[M].2版.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2007:13

[6]林學(xué)顏,張玲.現(xiàn)代細(xì)胞與分子免疫學(xué)[M].2版.北京:科學(xué)出版社,2000:75

[7]李榮,李俊,胡成穆,等.橙皮苷對(duì)免疫功能低下小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的試驗(yàn)研究[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào),2007,23(2):169-172

[8]Ki HK,Kyung IK,Woo JJ,etal.In vitro and in vivo effects of macrophage-stimulatopolysaceharidefrom leavesofPerilla frutescens var.crispa[J].Biol Phann Bull,2002,25(1):367-371

[9]朱奇,郭善利,劉國(guó)富,等.雙歧因子人工蜂糧保健食品對(duì)小鼠免疫功能的影響[J].食品科技,2004(6):101-103

[10]杭鋒,伍劍鋒,龔廣予,等.不同劑量蔗果低聚糖對(duì)小鼠免疫調(diào)節(jié)的研究[J].乳品科學(xué)與技術(shù),2009,138(5):101-103