分光光度法測定新疆海棠果中的單寧

2013-09-11 17:35:09謝瓊馮劍

大陸橋視野·下 2013年7期

謝瓊馮劍

摘要本文建立了FD顯色分光光度法測定新疆海棠果中單寧的測定方法。在弱堿性條件下，海棠果中單寧與鎢酸鈉—磷鉬酸形成穩定的藍色配合物，在760 nm處測定顯色液的吸光度確定單寧的含量。以單寧酸為標樣，測得單寧在0.05 mg /ml～0.35 mg /ml濃度范圍內，服從比爾定律，回歸方程為：A= 1.286×10-3 + 1. 7936ρ，相關系數為R=0. 999 6，方法回收率為96.0%～101.4%，相對標準偏差為0.05%。

關鍵詞新疆海棠果單寧分光光度法

海棠果（ plumleaf crab）別名楸子、圓葉海棠、海紅等。屬薔薇科，落葉小喬木。原產我國，分布于西北、華北、東北及長江以南各地。栽培歷史很久，類型很多，各地名稱都不相同，我們新疆的黃海棠就屬于此種。海棠果營養豐富，具有解毒生津、止渴降火、利尿、健胃、助消化，對小兒尿道炎有特效。

植物單寧是一類重要的天然活性物質，在植物界分布十分廣泛，在石油、礦業、建材、化工、紡織、食品、醫藥、農林等方面已得到廣泛應用。天然植物中單寧的測定方法主要有高錳酸鉀滴定法、Folin-酚法[ Fo lin-Denis 法（ FD ）和Folin-Cio calteu法（ FC） ] 、香草醛法。單寧廣泛存在于植物的葉、果實、樹皮、樹木和根等植物器官中，它與果實成熟前后的澀味、苦味和霉褐變密切相關，因此，測定果實中單寧的舍量具有重要意義。本試驗采用Folin-Denis（ FD）顯色分光光度法測定新疆海棠果中單寧的含量，為進一步開發利用該植物資源提供依據。

一、實驗儀器、試劑與材料

1.實驗儀器。紫外分光光度計（上海光學儀器廠），電子天平（常州市天之平儀器設備有限公司），電熱加熱爐（上海電加熱器制造廠）。

2.實驗試劑。鎢酸鈉、磷鉬酸、磷酸、硫酸鋰、無水碳酸鈉均為分析純，水為自制新鮮蒸餾水。Folin-Denis 顯色劑：稱取鎢酸鈉50 g，磷鉬酸10 g，加入蒸餾水375 ml溶解，加入85% 磷酸25 mL，水浴回流2 h，冷卻后定容至500 mL棕色瓶中。

3.實驗樣品材料：市售海棠果，無霉爛、黑斑、碰傷。

二、方法與結果

1.樣品處理。樣品打漿，稱漿狀適量樣品于三角瓶中，加水50 mL，沸水提取30 min，轉入100 ml容量瓶中，定容，過濾。

2.發色方法（FD法）。

取濾液3 mL于100 mL容量瓶中，加2%硫酸鋰溶液3 ml，加入FD試劑5 mL，搖勻后靜置幾分鐘，加入20%無水碳酸鈉溶液10 ml，定容后搖勻，靜置30 min，在波長760 nm處比色。

3.標準曲線的繪制。

（1）配制單寧標準溶液：稱取0.025 0 g單寧標準品，水溶后定容于250 mL容量瓶中，即為0.1 mg/mL單寧標準品溶液，此溶液1 ml相當于0.1 mg單寧。

（2）標準曲線繪制：按試驗發色方法依次分別吸取單寧標準品溶液0.0 mL、0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL、3.0 mL、3.5 mL配制成系列單寧標準溶液進行測定，以單寧質量濃度ρ（mg/ml）為橫坐標，吸光度A 為縱坐標繪制標準曲線，線性范圍為0.05～ 0.35 mg /mL，得線性回歸方程A= 1.286×10-3 + 1. 7936ρ，相關系數為0. 999 6。

4.回收試驗。

于已知含量的海棠果樣品提取液中，加入一定量的單寧標準溶液，計算單寧含量進行回收試驗。（見表1）。

表1 回收試驗結果

5.精密度試驗。對海棠果樣品提取液進行多次平行測定，5次平行測定的相對標準偏差為0.05%，（見表2），說明該方法法測定結果重復性較好。

表2 精密度試驗結果

6.樣品含量的測定。稱取樣品9.260g 按照樣品處理及發色方法比色，由標準曲線查出樣品濃度，計算出樣品單寧含量，測定結果表明樣品海棠果中單寧平均含量為0.056%，結果見表3。計算方法如下：

X（%）=ρ1V1/ m V2×f×100/1000

公式中：ρ1-從標準曲線中查得的單寧含量（mg）

m-稱樣量（g） V1-定容體積（ml）；

V2-取液體積（ml） f-稀釋倍數

表3 海棠果單寧測定結果

三、討論