乳腺腫瘤超聲彈性成像與肌成纖維細胞分布的相關性及臨床意義

金孟英 殷詠梅

1.浙江省青田縣人民醫院，浙江青田 323900；2.南京醫科大學，江蘇南京 210029

乳腺癌在婦科中屬于常見疾病，在臨床中具有較高的發病率，嚴重的影響女性的身體健康，盡早的診斷和治療，對提高乳腺腫瘤患者的生活質量具有較大的意義[1]。本研究對乳腺腫瘤的超聲彈性成像和肌成纖維細胞的分布情況進行深入的探究，判斷其是否能夠準確的乳腺腫瘤，從而為臨床盡早診斷乳腺腫瘤和治療提供參考，具體分析如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取浙江省青田縣人民醫院（以下簡稱“我院”）2010年1月～2011年6月治療的乳腺腫塊患者200例。乳腺良性病變 98 例為良性組，年齡 30～68 歲，平均（54.3±2.4）歲，其中纖維腺瘤患者60例，硬化性腺病患者20例，導管內乳頭狀瘤患者18例；乳腺癌病變102例為惡性組，年齡為34～79歲，平均（53.8±2.6）歲。兩組患者一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 超聲檢查方法 本次研究選取EUB-8500型彩色多普勒超聲診斷儀，且配備彩色超聲彈性成像技術，探頭的頻率7.5～13.0 MHz。本研究所有患者均在術前給予常規超聲診斷和超聲彈性成像檢查，其中主要包括腫瘤的置和大小以及縱橫比與形態、邊界等，對超聲彈性成像檢查情況進行評分，并將檢查的圖片進行保存，由2名至少工作10年以上且經驗豐富的醫師進行觀察與判斷[2]。

1.2.2 免疫組織化學法 本次研究對于乳腺間質CD34和平滑肌肌動蛋白（SMA）表達采取免疫組織化學進行檢測[3]。首先，將選取的新鮮活檢組織給予10.0%甲醛進行固定，并采取梯度酒精進行脫水處理，采取二甲苯透明和石蠟的包埋處理。然后，將石蠟切片進行HE染色，并且在每張切片滴加相應對應的一抗CD34和SMA。最后，進行DAB顯色和蘇木精復染處理，并在顯微鏡下進行觀察與判斷。

1.3 評定標準

1.3.1 彈性成像評分 本次研究對于彈性成像評分主要采取7分法進行評估[4]：①1分：腫塊的整體顯示為綠色；②2分：腫塊顯示為綠色與藍色相間，且呈現馬賽克的形狀，主要以綠色為主；③3分：腫塊的中心顯示藍色，而周邊顯示為綠色；④4分：腫塊顯示為綠色與藍色相間，且呈現馬賽克的形狀，主要以藍色為主；⑤5分：腫塊完全呈現藍色；⑥6分：腫塊的周邊和腫塊的內部均呈現藍色，只有腫塊內部出現小區域的綠色；⑦7分：腫塊的周邊均呈現為藍色。惡性：彈性成像評分＞5分；良性：彈性成像評分≤5分。

1.3.2 CD34和α-SMA光鏡觀察方法 在高倍的光學顯微鏡下進行隨機的選取10個視野（400×）進行觀察，并且每個視野選取計數100個細胞，并采取雙盲法進行觀察[5]。①0分：染色細胞計數＜5.0%；②1分：染色細胞計數5.0%～＜25.0%；③2分：染色細胞計數 25.0%～＜75.0%；④3分：染色細胞計數≥75.0%。而陽性細胞染色的強度：①0分：細胞不顯色或者顯色不清；②1分：細胞顯示為淺黃色；②2分：細胞顯示為棕黃色；③3分：細胞顯示為深棕色?？偡e分=（染色細胞計數的評分+染色強度的評分）/2。（-）：積分＜0.5分；（+）：積分在 0.5～1.5 分之間；（++）：積分＞1.5 分。

1.4 統計學方法

采用統計軟件SPSS 19.0對數據進行分析，正態分布計量資料以均數±標準差（±s）表示，兩獨立樣本的計量資料采用u檢驗；計數資料以率表示，采用χ2檢驗。相關性采取Spearman分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 彈性成像評分

惡性組的彈性成像中觀察腫塊均顯示為藍色，評分為（7.0±0.3）分，而良性組的彈性成像中觀察腫塊大部分顯示為綠色，腫塊內部顯示極少的藍色，評分為（2.2±0.4）分，兩組比較差異有統計學意義（u=11.2013，P＜0.05）。

2.2 CD34和α-SMA定位

良性組中CD34蛋白主要定位于細胞質中，α-SMA蛋白主要定位于導管肌的上皮細胞中；在惡性組中CD34蛋白主要定位于血管中，α-SMA蛋白主要定位于細胞質中。

2.3 CD34和α-SMA表達

惡性組CD34表達水平低于良性組，而α-SMA表達水平明顯高于良性組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組患者CD34和α-SMA表達水平對比分析（例）

2.4 CD34和α-SMA表達與彈性成像相關性分析

CD34表達和彈性成像呈負相關性（r=-0.124，P＜0.05）；α-SMA表達和彈性成像呈正相關性（r=0.132，P＜0.05）。

3 討論

超聲彈性成像是一種新型的超聲診斷技術，這種診斷技術比傳統的超聲診斷更加全面，能夠對腫瘤和擴散疾病進行成像觀察[6]。在臨床中已經應用到乳腺和甲狀腺以及前列腺等疾病的診斷中，而且具有較好的診斷效果[7]。臨床中采取這種診斷方法中形成的彈性成像主要是因腫瘤的硬度不同而產生的一種差異，繼而顯示不同的圖像[8]。這種診斷方法主要是依據不同組織間的彈性系數和組織發生變形的程度進行超聲探測，并將其轉變為實時的彩色圖像[9]。一般彈性系數越小，受壓程度大則顯示為紅色；而彈性系數越大，受壓程度小則顯示為藍色；彈性系數處于中等水平，一般顯示為綠色。因此，臨床中常常采取圖像的色彩進行判斷組織的硬度情況。這種診斷方法有效的拓寬了傳統超聲診斷的不足，并更形象和生動的顯示病變。

隨著人們對乳腺腫瘤的不斷研究，發現癌間質中的肌成纖維細胞是決定整個腫瘤硬度的重要因素[10]。而且其生物的學特性也不同于正常乳腺組織中的間質成纖維細胞。因此，臨床中可以依據α-SMA的表達情況進行判斷肌成纖維細胞是否在腫瘤中，從而判斷其在腫瘤中的分布特征[11]。因此，臨床中分析α-SMA的表達與超聲彈性成像的相關性，即可了解肌成纖維細胞和超聲彈性成像之間的關系。由于在α-SMA也有可能在其他的組織中得到表達，因此需要進一步的采取輔助指標進行觀察，從而更好的定位。而CD34屬于一種穿膜的糖蛋白，一般主要出現造血前驅細胞和內皮細胞等[12]。臨床中有資料顯示，在乳腺癌間質細胞中CD34將失去表達，而α-SMA將得到大量的表達，并且向肌纖維細胞進行分化。同時也有資料顯示，在硬化性乳腺疾病中，CD34蛋白將得到大量的表達，且分布在纖維細胞中。因此，本次的臨床研究選取CD34和α-SMA進行綜合評估，從而避免干擾[13]。

通過本次的臨床研究分析，在良性組中CD34蛋白主要定位于細胞質中，α-SMA蛋白主要定位于導管肌的上皮細胞中；在惡性組中CD34蛋白主要定位于血管中，α-SMA蛋白主要定位于細胞質中。由此分析，在乳腺惡性腫瘤中α-SMA蛋白得到大量的表達，進一步的分析出肌成纖維細胞在乳腺惡性腫瘤中得到大量的表達。并且本組的資料還顯示，CD34的表達和彈性成像呈現負相關性（r=-0.124，P<0.05）；α-SMA的表達和彈性成像呈現正相關性（r=0.132，P<0.05）。由此分析，在乳腺腫瘤中超聲彈性成像的評分越高，則表示α-SMA蛋白在乳腺腫瘤中得到大量的表達[14]。進一步的分析，超聲彈性成像的評分越高，則表示肌成纖維細胞在乳腺腫瘤中得到大量的表達。因此，臨床中可以采取超聲彈性成像進行判斷肌成纖維細胞的分布情況。由于肌成纖維細胞屬于非轉化的細胞，常常和腫瘤細胞相比，該細胞的基因組相對比較穩定，且不容易出現抗原丟失的情況發生。因此，這也為臨床中治療乳腺腫瘤提供新的思路。

綜上所述，臨床中可以采取超聲彈性成像進行判斷肌成纖維細胞在乳腺腫瘤中的表達情況。而且超聲彈性成像能夠為臨床中乳腺癌的肌成纖維細胞靶向治療提供科學的依據，并且對乳腺腫瘤的預后也具有一定的意義[15]。因此，超聲彈性成像技術對于乳腺腫瘤的診斷和臨床治療均具有一定的意義。

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