原子吸收光譜法測定八寶驚風散中重金屬元素

陳繁華， 曾玉梅， 姚海燕

(梅州市食品藥品監督檢驗所，廣東梅州514071)

八寶驚風散質量標準收載于《中華人民共和國衛生部藥品標準》中藥成方制劑第二十冊，由天麻、防風、金礞石、黃芩、龍齒等十余味中藥組成，具有祛風化痰，退熱鎮驚的功效［1］，在兒科臨床上使用甚廣。中藥作為天然藥物，因毒副作用小、療效好、使用安全而受到人們的青睞，并越來越被國際社會所接受［2］。人們服用中藥治療的現象與日俱增，同時對中藥的不良反應也日益關注。重金屬量超標是造成中藥不良反應中最突出的問題之一，已嚴重影響到中藥的聲譽及出口［3］。其中尤以鉛、鎘超標最為普遍［4］。葉國華等［5］以西南地區多個GAP種植基地的20多種中藥材為研究對象，對其所含鉛、鎘、銅等重金屬進行了測定分析，結果表明:鎘和銅的超標情況最嚴重，分別為63.2%和30.2%，鉛超標的情況較好，為1.19%。

經查閱，鉛、鎘對人體的影響是全身性、多系統的，長期接觸低濃度的鉛、鎘會導致免疫、生殖、神經等系統的損害［6］。考慮到八寶驚風散中含有多種礦物類藥直接粉碎入藥，重金屬元素富集的可能性較高，本實驗參考《中國藥典》規定方法［7］測定其中重金屬元素污染概率較高的鉛、鎘和銅的量，為制訂合理安全的限度范圍提供科學依據。

1 儀器和試藥

1.1 儀器 AA—7000/GFA—7000原子吸收分光光度計 (日本SHIMADZU公司);Mars 6微波消解儀 (美國CEM公司);Sartorius BP 211D電子分析天平 (德國Sartorius公司)。

1.2 試藥 八寶驚風散 (規格:每瓶裝0.26 g)由廣東聯康藥業有限公司生產提供。鉛、鎘、銅單元素溶液標準物質均由中國計量科學研究院提供(質量濃度:1 000μg/mL);硝酸為優級純;其他試劑均為分析純;水為超純水。

2 方法與結果

2.1 測定參數 以石墨爐法測定鉛和鎘的量:以氬氣為載氣，氘燈扣背景，以峰高值測量，進樣體積為10μL。以火焰原子吸收法測定銅的量。相關儀器工作參數見表1，石墨爐法升溫程序見表2。

表1 測定參數Tab.1 Working conditions of the instrument

表2 石墨爐法升溫程序Tab.2 Program of temperature elevation of the grahite furnace

2.2 樣品消解方法 取供試品10瓶，混勻，稱取0.2 g，精密稱定，置聚四氟乙烯消解罐中，加硝酸5 mL，混勻，浸泡過夜，蓋好內蓋，旋緊罐蓋，置微波消解儀中消解。消解完全后，取消解內罐置電熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸氣揮盡，并繼續緩緩濃縮至2～3 mL，放冷，用水轉入25 mL量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。同法同時制備試劑空白溶液。

2.3 線性關系考察

2.3.1 Pb線性關系考察 取1 000μg/mL的Pb標準貯備液適量，用2%硝酸溶液稀釋至80 ng/mL的溶液。精密吸取上述溶液2 mL，精密加含1%磷酸二氫銨和0.2%硝酸鎂的溶液1 mL，混勻，置儀器上自動稀釋為 0.00、16.00、32.00、48.00、64.00、80.00 ng/mL作為標準系列溶液，注入石墨爐原子化器，測定吸光度，以吸光度為縱坐標，質量濃度為橫坐標，繪制標準曲線，得線性回歸方程Y=0.006 560 6X+0.008 963 5(r=0.999 5)。供試品質量濃度在0～80.0 ng/mL范圍內，線性關系良好。

2.3.2 Cd線性關系考察 取1 000μg/mL的Cd標準貯備液適量，用2%硝酸溶液稀釋至8.0 ng/mL的溶液，置儀器上自動稀釋為0、1.6、3.2、4.8、6.4、8.0 ng/mL作為標準系列溶液，注入石墨爐原子化器，測定吸光度，以吸光度為縱坐標，質量濃度為橫坐標，繪制標準曲線，得線性回歸方程Y=0.061 288X－0.008 247(r=0.999 3)。供試品質量濃度在0～8.0 ng/mL范圍內，線性關系良好。

2.3.3 Cu線性關系考察 取1 000μg/mL的Cu標準貯備液適量，用2%硝酸溶液分別稀釋為0、0.05、0.2、0.4、0.6、0.8μg/mL作為標準系列溶液，依次噴入火焰，測定吸光度，以吸光度為縱坐標，質量濃度為橫坐標，繪制標準曲線，得線性回歸方程 Y=0.088 433X+0.001 502(r=0.999 7)。供試品質量濃度在0～0.8μg/mL范圍內，線性關系良好。

2.4 加樣回收率試驗 批號為1104004的供試品減半取樣，精密加入相當于等量待測元素的標準溶液，按2.2項樣品消解方法進行消解，測定，結果見表3。

表3 回收率測定結果 (n=6)Tab.3 Results of recovery tests(n=6)

根據《藥用植物及制劑進出口綠色行業標準》［8］的規定 (鉛≤5.0 mg/g，鎘≤0.3 mg/g，銅≤20 mg/g)進行評價，表明樣品中鉛、鎘、銅量符合規定。

2.5 重復性考察 取同一批樣品 (1104004)6份，按樣品測定項下方法進行消解、測定。6份測定的結果，Pb平均值為4.5μg/g，RSD為2.3%;Cd平均值為0.2μg/g，RSD為1.7%;Cu平均值為16.1μg/g，RSD為1.2%。

2.6 檢出限考察 將儀器設備調節至最佳狀態，對空白溶液平行測定10次，以空白溶液測定值的3倍標準偏差除以標準曲線的斜率計算檢出限。鉛、鎘、銅3種元素的檢出限分別為0.49 ng/mL、0.025 ng/mL、7.19 ng/mL。

2.7 樣品測定 稱取供試品適量，按上述方法消解后進行測定。結果見表4。

表4 樣品測定結果Tab.4 Determination results of samples

3． 討論

目前，實驗室常用的消解方法主要有濕法、干法和微波消解法。濕法操作簡單、對設備要求低，但缺點是耗時長、用酸量大。干法雖然也操作簡單，對設備要求低但高溫下砷、鉛等一些熱穩定性差的元素容易揮發損失，導致結果偏低。微波消解技術因為其加熱均勻、消解效率高、使用試劑量少、環保等優勢，近年來被大量應用于食品、藥品、化妝品等行業的消解過程中［9］。本實驗采用微波消解技術對組成復雜的中成藥八寶驚風散進行前處理，曾經參考《中國藥典》取用0.5 g樣品消解，結果發現用5 mL硝酸仍不能消解完全。經過試驗，取用0.2 g樣品消解結果空白值低、重復性好，能滿足靈敏度的要求。

中藥及其制劑中測定微量重金屬元素的方法主要有原子吸收光譜法 (AAS)、電感耦合等離子體質譜法 (ICP-MS)、原子發射光譜法 (AES)、X-射線分析法等［10-11］。由于原子吸收光譜法具有較強的選擇性、較高的靈敏度、分析范圍較廣、很強的抗干擾能力等，使其在中藥重金屬微量元素的形態分析中，充當著極其重要的角色，其應用越來越廣泛［12］。本實驗采用原子吸收光譜法測定，結果鉛、鎘、銅元素的質量濃度與吸光度呈良好的線性關系，各元素的回收率在92.7% ～110.0%，相對標準偏差RSD在1.4%～3.8%，可以滿足定量分析的要求。

本實驗方法簡便，準確，專屬性強，可用于該制劑的質量控制。

［1］衛生部藥典委員會．中華人民共和國衛生部藥品標準中藥成方制劑第二十冊［S］．1998:7．

［2］汪學英，殷曉俊．微波消解樣品-石墨爐原子吸收光譜法測定雙黃連口服液及其藥材中重金屬元素［J］．理化檢驗:化學分冊，2012，48(1):87．

［3］王 剛，陳榮達，林炳承．中藥中微量元素測定的研究進展［J］．藥物分析雜志，2002，22(2):151．

［4］曹小用，李新生，馮曉東．原子吸收分光光度法測定3種中成藥中銅鉛砷汞的含量［J］．中成藥，2004，26(5):附9．

［5］葉國華，呂方軍．21種中藥材中重金屬含量測定［J］．遼寧中醫雜志，2008，35(2):265-266．

［6］韓 磊，張恒東．鉛、鎘的毒性及危害［J］．職業衛生與病傷，2009，24(3):173-177．

［7］國家藥典委員會．中華人民共和國藥典:2010年版一部［S］．北京:中國醫藥科技出版社，2010:附錄48．

［8］國家對外貿易經濟合作部．藥用植物及制劑進出口綠色行業標準［S］．WM2-2001．

［9］賈 薇．中藥材中重金屬的分析方法及其吸收富集特征研究［D］．廣州:廣州中醫藥大學，2009:40．

［10］Viitak A，Volynsky A B．Simple procedure for the determination of Cd，Pb，As and Se in biological samples by electrothermal atomic absorption spectrometry using colloidal Pd modifier［J］．Talanta，2006，70(4):890．

［11］Switzer J A，Rajasekharan V V，Boonsalee S，et al．Evidence that monochloramine disinfectant could lead to elevated Pb levels in drinking dater［J］．Environ Sci Technol，2006，40(10):3384．

［12］劉 毅，邱昌貴．中藥中重金屬研究綜述［J］．微量元素與健康研究，2008，2(4):56-58．